STAT3乙酰化在白介素6调控谷氨酸诱导神经细胞凋亡中的作用

发布时间：2021-01-08 15:14

　　目的:观察白介素6（IL-6）对谷氨酸（Glu）诱导神经细胞凋亡的保护作用并明确信号转导与转录激活因子3（STAT3）乙酰化在其中所发挥的作用。方法:（1）本研究选用SH-SY5Y（神经母细胞瘤）细胞株,分为以下四组:Control组;IL-6（10ng/mL）组;Glu（20mmol/L）组;IL-6+Glu组。各组进行如下检测:（1）CCK8法检测细胞存活率;（2）乳酸盐脱氢酶（LDH）释放实验检测LDH活性;（3）倒置显微镜观察细胞形态;（4）流式细胞技术检测细胞凋亡水平;（5）Real-time PCR法和Western Blot法检测SH-SY5Y细胞凋亡相关基因和蛋白的表达水平,包括抗凋亡因子Bcl-xl、促凋亡因子Bax和凋亡关键酶半胱氨酸蛋白酶3（caspase3）的mRNA和蛋白的表达水平;（6）采用Western Blot法检测STAT3第685位赖氨酸（Lys685）乙酰化水平。（2）进一步确定STAT3乙酰化在IL-6抵抗SH-SY5Y细胞凋亡中的作用,使用去乙酰化酶SIRT1的激活剂白藜芦醇（Rev）（12.5μmol/L）抑制STAT3乙酰化,通过Weste... 

【文章来源】： 钟忆 遵义医科大学

【文章页数】：59 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

谷氨酸对SH-SY5Y细胞存活率的影响

遵义医科大学硕士学位论文钟忆222.2IL-6对谷氨酸诱导SH-SY5Y细胞损伤的影响分别采用CCK8法及LDH释放实验检测SH-SY5Y细胞损伤情况。结果显示（表9，图2），与Control组比，Glu组细胞存活率显著降低，LDH活性明显升高，差异具有统计学意义（p<0.05）；与Glu组相比，IL-6+Glu组细胞存活率明显升高，LDH活性显著降低，差异具有统计学意义（p<0.05）；Control组和IL-6组细胞存活率和LDH活性无明显差异。表9IL-6对谷氨酸诱导SH-SY5Y细胞损伤的影响分组细胞存活率（%）LDH活性（U/L）Control组100±014.24±4.03IL-6组99.6±1.7713.95±3.12Glu组65.13±3.52*39.15±5.56*IL-6+Glu组75.76±3.82#13.13±4.71#注：数据采用均数±标准差（x±s,n=3）表示,*p<0.05vsControl组，#p<0.05vsGlu组。图2IL-6对谷氨酸诱导SH-SY5Y细胞损伤的影响注：A：IL-6对谷氨酸诱导细胞存活率的影响；B:IL-6对谷氨酸诱导细胞LDH释放活性的影响；数据采用均数±标准差（x±s,n=3）表示,*p<0.05vsControl组，#p<0.05vsGlu组。

遵义医科大学硕士学位论文钟忆232.3IL-6对谷氨酸诱导SH-SY5Y细胞形态的影响图3示Control组SH-SY5Y细胞呈长梭形，有明显的细胞突起；谷氨酸组细胞损伤明显，表现为细胞变圆、皱缩、聚集成团，细胞突起减少或消失；IL-6+Glu组的SH-SY5Y细胞损伤较Glu组减轻，变圆皱缩细胞较Glu组减少，细胞突起较Glu组多；IL-6组细胞形态同Control组无明显差异。图3倒置显微镜观察IL-6对谷氨酸诱导SH-SY5Y细胞形态的影响（×100）注：a：Control组；b：IL-6组；c:Glu组；d:IL-6+Glu组。

【参考文献】：
期刊论文
[1]异基因造血干细胞移植术后CD4+T细胞中缺乏SIRT1诱发急性移植物抗宿主病[J]. 张媛媛,杨晶,张国平,彭捷,陈旭,陈方平,徐雅靖.  中南大学学报(医学版). 2018(07)
[2]白介素-6拮抗N-甲基-D-天门冬氨酸诱导的神经元凋亡[J]. 刘展,黄慧伟,黄彦,彭聿平.  南通医学院学报. 2009(02)
[3]白介素-6保护小脑颗粒神经元抵抗NMDA的神经毒性作用[J]. 王晓春,邱一华,彭聿平.  生理学报. 2007(02)
[4]白介素-6保护小脑颗粒神经元抗谷氨酸的神经毒性作用[J]. 陆健花,邱一华,彭聿平.  中国应用生理学杂志. 2006(03)



本文编号：2964820