反相×亲水全二维液相色谱构建及其在中药分析中的应用

发布时间：2021-01-29 11:50

　　中药是一种典型的复杂体系,了解其化学成分是深入研究中药的作用机制,促进中药的现代化的基础。然而,由于其复杂性,只使用一种分离技术往往不能达到很好的分离效果,因此,探索分离效果更好的策略成为中药研究领域至关重要的课题。二维色谱由于其峰容量远超一维分离而成为复杂中药成分研究的选择之一,在中药复杂体系的分离上有很大的发展空间。由于能在两维提供几乎完全相反的分离机理,高正交组合二维系统（如反相×亲水色谱组合）理论上可以实现如中药这样的复杂体系的高效分离,然而,两维溶剂的高度不兼容问题限制了这种组合二维色谱的应用。因此,本研究着眼于解决高正交组合两维溶剂不兼容的问题。通过综合采用第一维脉冲梯度洗脱、捕集柱技术、在柱稀释调制3种辅助技术相结合,构建了一种既克服了溶剂不兼容问题,又可以实现两维分离自由调节的反相×亲水相互作用色谱（RPLC×HILIC）全二维系统。为了验证所构建系统在复杂中药分析的应用,选择具有代表性中药三七、党参和桔梗作为分析对象,在系统地优化各项分离条件的基础上,与质谱检测器进行联用,实现了三种中药的组分高效分离及在线鉴定。具体研究如下:1.首先,以同时具有亲水基和疏水基的三七中... 

【文章来源】：湖南师范大学湖南省 211工程院校

【文章页数】：99 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

（A）脉冲梯度（黑色部分）；（B）脉冲梯度部分扩大示意图

硕士毕业论文12馏分可以被第二维弱溶剂稀释，并在每个调制的初始阶段采用“三明治”模式。这样的辅助调制方法和类似的方法已经分别应用于HILIC×RPLC和NPLC×RPLC的组合[91,95]中。但是要实现弱溶剂和样品段的完全混合，需要较高的切换频率，这就带来了二维超压的潜在风险。图1-3“三明治”稀释调制的2D-LC系统装置图Figue1-3Schemeofthe2D-LCsystemwith“sandwich”dilutionmodulation.与“三明治”稀释法不同，旁路稀释调制法属于连续稀释法，该方法最早由Petersson等人提出[45]，命名为固定溶剂调制法（Fixedsolventmodulation，FSM）。采用这种调制方式的2D-LC的设置如图1-4所示。FSM可以使第二维流动相在进入开关阀之前分成两部分，一个通过收集回路来输送馏分，另一个通过旁路而绕过开关阀，然后两个分流通过开关阀后的T型连接器再次汇合，在T型连接器中，从样品环流路转移的部分被来自旁路的第二维弱流动相稀释。然而，由于两种分流所经过的距离与没有旁路的传统调制方法不同，移动相的组成受到干扰，这导致测量时基线偏移，干扰了对低强度信号的检测。为了改善FSM的缺点，Stoll小组开发了一种新的调制方法[97]-主动溶剂调制（Activesolventmodulation，ASM）。采用ASM的2D-LC的设置如图1-5所示，改进的调制器用于控制每个调制周期初始阶段的旁路开关。这意味着第二维流动相的分流只发生在馏分转移阶段，对二维分离和检测的负面影响较校这种调制方法对低浓度化合物的分离和检测具有良好的性能，在2D-LC领域具有广阔的应用前景。然

固定溶剂调制（FSM）的2D-LC系统装置图

【参考文献】：
期刊论文
[1]基于UPLC-Q-TOF MS技术的三七中皂苷类成分质谱裂解规律研究[J]. 赵静,秦振娴,彭冰,刘永刚,刘勇.  质谱学报. 2017(01)
[2]HPLC-LTQ-Orbitrap-MSn快速鉴别党参药材中化学成分[J]. 张靖,徐筱杰,徐文,黄娟,白俊其,朱大元,丘小惠.  中国实验方剂学杂志. 2015(09)
[3]生三七与蒸制熟三七在复方丹参配伍中部分药理作用的比较研究[J]. 李春梅,杨瑞,周新惠,却翎,毛晓健,赵荣华.  环球中医药. 2015(01)
[4]2D-HPLC结合捕集柱同时测定黄连药材中6个生物碱[J]. 李威,肖轶雯,邱细敏,王峰.  药物分析杂志. 2014(04)
[5]“中药组分”相关研究的发展现状分析及探讨[J]. 刘丹,贾晓斌.  中国中药杂志. 2014(02)
[6]柱层析技术在中药材有效成分分离纯化中的应用[J]. 许政,赵志强.  中国中医药信息杂志. 2013(12)
[7]在线二维液相色谱法快速测定桂枝茯苓胶囊中芍药苷、丹皮酚、苦杏仁苷和肉桂酸的含量[J]. 张艳海,张大伟,孟兆青,刘绿叶,金燕.  中国中药杂志. 2013(23)
[8]Fingerprint Analysis of Codonopsis Radix by HPLC Coupled with Chemometrics Analysis[J]. CHEN Fang-fang,QI Huan-yang,SHI Yan-ping.  Chinese Herbal Medicines. 2013(04)
[9]党参总皂苷的提取·分离和纯化[J]. 蒋小飞,张宝顺.  安徽农业科学. 2011(04)
[10]HPLC法测定不同产地党参药材中党参炔苷的含量[J]. 时军,马方励,廖华卫,梁培华.  广东药学院学报. 2011(01)



本文编号：3006839