针刺对卵巢储备功能减退模型大鼠HPO轴及FSH-cAMP信号通路的影响
发布时间：2021-02-02 19:27
背景卵巢储备功能减退（diminished ovarian reserve,DOR）是指卵巢内卵母细胞数目的减少和（或）质量下降,可导致生育力下降,同时伴有抗苗勒管激素（anti-Mullerian hormone,AMH）水平降低、窦卵泡计数（antral follicle count,AFC）减少及促卵泡激素（follicle-stimulating hormone,FSH）水平升高。随着社会发展,女性面临的生活压力和工作压力逐渐加重,DOR发病率逐年上升,由此导致的不孕严重影响女性生殖健康和生活质量,给其家庭带来沉重的精神及经济负担。FSH是下丘脑-垂体-卵巢（Hypothalamic-pituitary-ovarian,HPO）轴的主要激素之一,可促进颗粒细胞的增殖分化,影响卵泡的发育、成熟及排卵,影响雌激素的合成。FSH与其特异性受体（FSHR）的结合是其发挥生物学效应的基础。FSH与FSHR结合,可进一步激活环磷酸腺苷（Cyclic adenosine monophosphate,cAMP）/蛋白激酶 A（Protein kinase A,PKA）信号转导通路下游信号分子的...
【文章来源】：中国中医科学院北京市
【文章页数】：79 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２ＦＳＨ／ｃＡＭＰ－ＰＫＡ信号通路示意图??卵巢储备功能下降最终可发展为卵巢早衰，近几年来逐渐成为生殖内分泌领域研究??的热点
阴道冲洗法”［６］进行阴道脱落细胞学检查，具体步骤如下：??（１）将大鼠用钻手套法固定，轻轻抬起大鼠臀部。??（２）用移液器吸取８０?ｙ?Ｌ生理盐水，将一次性枪头轻轻插入大鼠阴道。??（３）将阴道分泌物吸出，放在干净的玻璃显微镜载玻片上，在显微镜下观察脱落细??胞的形态。依据脱落细胞的形态确定具体周期，其中动情间期主要特点是以大量的白??细胞为主，形态呈点状；动情前期主要以少量角化脱落细胞为主，动情期以大量角化脱??落细胞为主，形状似落叶状，动情后期以少量角化脱落细胞及白细胞为主。见图３。??动情间期?Ｂ动情前期??５ｍｍ?５ｍｍ??Ｃ动情期／?Ｄ动情后期?ｖ??＂ｂ?（：臭—??＇?．３?。ｉｆ?、?〇??，．身?＇?＊??．＊?．?ｉ?．丨?５ｍｍ?５ｍｍ??图３不同动情周期大鼠阴道脱落细胞形态（未染色，放大倍数：Ｘ?１０，标尺＝５?ｍｍ）??３８??
?针刺对卵巢储备功能减退模型大鼠ＨＰＯ轴及ＦＳＨ－ｃＡＭＰ信号通路的影响???顺势将大鼠处于臀高头低位，利用采血管收集血液，按照大鼠体重一般收集１．５ｍｌ至３ｍｌ，??采血完毕立即用洁净干棉球对大鼠进行止血处理，密切观察其眼眶损伤情况。要求采眼??眶血操作均由技术熟练的同一人完成，以减轻大鼠应激并保证每只大鼠刺激量基本一致，??避免对后续实验造成不良影响。??１．３．３干预方法??各组干预方法具体如下（图４）。??Ｃｏｎｔｒｏｌ组：不干预。??ＤＯＲ组：不干预。??ＤＯＲ＋ａｃｕ组：针刺百会、关元＠１、次髎穴Ｍｌ。每次针刺２０分钟，隔日一次，共??１０次。针刺操作方法：（１）大鼠清醒状态下针刺至要求深度；（２）将针柄弯折并用胶??布固定；（３）将大鼠放置高台，以确保留针时长并尽量减少束缚应激对针刺效应的影??响，具体做法参考王宇［３２］等推荐的方法。??大鼠穴位定位：参考《实验针灸学实验指导》［３３］及《大鼠穴位图谱的研制》［３４］。??百会穴：位于大鼠头部正中，向后平刺２ｍｍ，胶布固定针柄。关元穴：位于大鼠脐（脐??平双髂嵴连线中点）下约２５＿处，直刺２ｍｍ，胶布固定针柄。次髎穴：次髎穴取穴是??难点，参考以往文献次髎穴定位［３１］，左手固定大鼠后右手顺势提起鼠尾，以能活动的关??节作为第一尾椎与骶椎结合处，向上定位第二、三骶骨棘突间，旁开约５？１０ｍｍ处，手??下能感受到明显凹陷，刺入约１５？２０＿深度，有落空感为宜。??ＤＯＲ＋ｒｅｓ组：除不采取针刺操作外，其他采取与ＤＯＲ＋ａｃｕ组相同的抓取及穴位处??粘贴胶布以及放置高台处理，时长２０分钟，隔日一次。??２ＥＳＩ?０＾３??！?：?／?＾
【参考文献】：
期刊论文
[1]模拟高原间断缺氧暴露对雌性大鼠动情周期的影响[J]. 蒲玲玲,邓炳楠,徐洪宝,王新兴,王天辉,段瑞峰,陈照立,刘伟丽. 第三军医大学学报. 2020(06)
[2]电针百会穴的即刻及动态大脑局部一致性研究[J]. 康英杰,陈义磊,谭文莉,黄炎文,龚志刚,王辉,石玉萍,魏翔宇,罗诗蕾,詹松华. 磁共振成像. 2020(02)
[3]探析紫杉醇药物制剂的研究进展[J]. 陈康. 黑龙江医药. 2019(06)
[4]SIRT1因子对延缓卵巢衰老的相关研究进展[J]. 郭孟佳,夏天,赵志梅,宋佳怡,马瑞红,王宝娟,李南南. 河北医药. 2019(23)
[5]针刺对雷公藤多苷片所致卵巢功能减退大鼠氧化应激及凋亡的影响[J]. 方晨晨,徐倩倩,沈洁,李茜,沈梅红. 针刺研究. 2019(11)
[6]实验动物与人类年龄相关性研究进展[J]. 陈玥,苏丹,贵文娟,孙效容. 中国比较医学杂志. 2019(11)
[7]大鼠“次髎”穴的取穴方法研究[J]. 刘笑萌,许明,邓石峰,余雨荷,艾坤,张泓. 湖南中医药大学学报. 2019(11)
[8]环磷酰胺的临床应用及其毒性防治[J]. 刘俊业,李乐乐,江素鑫,范红艳. 吉林医药学院学报. 2019(06)
[9]三种早发性卵巢功能不全小鼠造模方法的比较研究[J]. 苏先芝,刘一斐,孔文娟,闫菲,王晓梅,韩福国,刘清飞,史云. 中国实验动物学报. 2019(06)
[10]抗苗勒管激素评估卵巢储备功能的应用进展[J]. 元万芹. 药品评价. 2019(14)
博士论文
[1]cAMP调控小鼠卵母细胞第一次减数分裂和原始卵泡形成[D]. 王怡婧.中国农业大学 2015
[2]不同脉冲频率GnRH调节大鼠GTH表达的受体后信号转导机制研究[D]. 王新.吉林大学 2007
[3]卵巢早衰动物模型的建立及口服耐受治疗自身免疫性卵巢早衰的相关研究[D]. 付莉.吉林大学 2005
硕士论文
[1]异氟烷暴露对成年雌鼠卵巢功能影响及其机制探讨[D]. 唐夏楠.华中科技大学 2019
[2]基于TGF-β/smads信号通路探讨坤泰胶囊对早发性卵巢功能不全大鼠的影响[D]. 陈淑萍.南京中医药大学 2019
[3]调经促孕针刺法对卵巢储备功能下降影响的临床探索性研究[D]. 李晓彤.中国中医科学院 2017
[4]探讨坤泰胶囊对环境化学物质诱导的卵巢储备功能下降大鼠模型颗粒细胞凋亡机制[D]. 耿利华.南京中医药大学 2017
[5]小鼠发情周期卵泡发育、生长因子与促进腺激素受体表达规律及超数排卵研究[D]. 朱娜.西北农林科技大学 2012
[6]心理应激对卵巢储备功能下降的调查研究[D]. 逯芳芳.广州中医药大学 2012
本文编号：3015248
【文章来源】：中国中医科学院北京市
【文章页数】：79 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２ＦＳＨ／ｃＡＭＰ－ＰＫＡ信号通路示意图??卵巢储备功能下降最终可发展为卵巢早衰，近几年来逐渐成为生殖内分泌领域研究??的热点
阴道冲洗法”［６］进行阴道脱落细胞学检查，具体步骤如下：??（１）将大鼠用钻手套法固定，轻轻抬起大鼠臀部。??（２）用移液器吸取８０?ｙ?Ｌ生理盐水，将一次性枪头轻轻插入大鼠阴道。??（３）将阴道分泌物吸出，放在干净的玻璃显微镜载玻片上，在显微镜下观察脱落细??胞的形态。依据脱落细胞的形态确定具体周期，其中动情间期主要特点是以大量的白??细胞为主，形态呈点状；动情前期主要以少量角化脱落细胞为主，动情期以大量角化脱??落细胞为主，形状似落叶状，动情后期以少量角化脱落细胞及白细胞为主。见图３。??动情间期?Ｂ动情前期??５ｍｍ?５ｍｍ??Ｃ动情期／?Ｄ动情后期?ｖ??＂ｂ?（：臭—??＇?．３?。ｉｆ?、?〇??，．身?＇?＊??．＊?．?ｉ?．丨?５ｍｍ?５ｍｍ??图３不同动情周期大鼠阴道脱落细胞形态（未染色，放大倍数：Ｘ?１０，标尺＝５?ｍｍ）??３８??
?针刺对卵巢储备功能减退模型大鼠ＨＰＯ轴及ＦＳＨ－ｃＡＭＰ信号通路的影响???顺势将大鼠处于臀高头低位，利用采血管收集血液，按照大鼠体重一般收集１．５ｍｌ至３ｍｌ，??采血完毕立即用洁净干棉球对大鼠进行止血处理，密切观察其眼眶损伤情况。要求采眼??眶血操作均由技术熟练的同一人完成，以减轻大鼠应激并保证每只大鼠刺激量基本一致，??避免对后续实验造成不良影响。??１．３．３干预方法??各组干预方法具体如下（图４）。??Ｃｏｎｔｒｏｌ组：不干预。??ＤＯＲ组：不干预。??ＤＯＲ＋ａｃｕ组：针刺百会、关元＠１、次髎穴Ｍｌ。每次针刺２０分钟，隔日一次，共??１０次。针刺操作方法：（１）大鼠清醒状态下针刺至要求深度；（２）将针柄弯折并用胶??布固定；（３）将大鼠放置高台，以确保留针时长并尽量减少束缚应激对针刺效应的影??响，具体做法参考王宇［３２］等推荐的方法。??大鼠穴位定位：参考《实验针灸学实验指导》［３３］及《大鼠穴位图谱的研制》［３４］。??百会穴：位于大鼠头部正中，向后平刺２ｍｍ，胶布固定针柄。关元穴：位于大鼠脐（脐??平双髂嵴连线中点）下约２５＿处，直刺２ｍｍ，胶布固定针柄。次髎穴：次髎穴取穴是??难点，参考以往文献次髎穴定位［３１］，左手固定大鼠后右手顺势提起鼠尾，以能活动的关??节作为第一尾椎与骶椎结合处，向上定位第二、三骶骨棘突间，旁开约５？１０ｍｍ处，手??下能感受到明显凹陷，刺入约１５？２０＿深度，有落空感为宜。??ＤＯＲ＋ｒｅｓ组：除不采取针刺操作外，其他采取与ＤＯＲ＋ａｃｕ组相同的抓取及穴位处??粘贴胶布以及放置高台处理，时长２０分钟，隔日一次。??２ＥＳＩ?０＾３??！?：?／?＾
【参考文献】：
期刊论文
[1]模拟高原间断缺氧暴露对雌性大鼠动情周期的影响[J]. 蒲玲玲,邓炳楠,徐洪宝,王新兴,王天辉,段瑞峰,陈照立,刘伟丽. 第三军医大学学报. 2020(06)
[2]电针百会穴的即刻及动态大脑局部一致性研究[J]. 康英杰,陈义磊,谭文莉,黄炎文,龚志刚,王辉,石玉萍,魏翔宇,罗诗蕾,詹松华. 磁共振成像. 2020(02)
[3]探析紫杉醇药物制剂的研究进展[J]. 陈康. 黑龙江医药. 2019(06)
[4]SIRT1因子对延缓卵巢衰老的相关研究进展[J]. 郭孟佳,夏天,赵志梅,宋佳怡,马瑞红,王宝娟,李南南. 河北医药. 2019(23)
[5]针刺对雷公藤多苷片所致卵巢功能减退大鼠氧化应激及凋亡的影响[J]. 方晨晨,徐倩倩,沈洁,李茜,沈梅红. 针刺研究. 2019(11)
[6]实验动物与人类年龄相关性研究进展[J]. 陈玥,苏丹,贵文娟,孙效容. 中国比较医学杂志. 2019(11)
[7]大鼠“次髎”穴的取穴方法研究[J]. 刘笑萌,许明,邓石峰,余雨荷,艾坤,张泓. 湖南中医药大学学报. 2019(11)
[8]环磷酰胺的临床应用及其毒性防治[J]. 刘俊业,李乐乐,江素鑫,范红艳. 吉林医药学院学报. 2019(06)
[9]三种早发性卵巢功能不全小鼠造模方法的比较研究[J]. 苏先芝,刘一斐,孔文娟,闫菲,王晓梅,韩福国,刘清飞,史云. 中国实验动物学报. 2019(06)
[10]抗苗勒管激素评估卵巢储备功能的应用进展[J]. 元万芹. 药品评价. 2019(14)
博士论文
[1]cAMP调控小鼠卵母细胞第一次减数分裂和原始卵泡形成[D]. 王怡婧.中国农业大学 2015
[2]不同脉冲频率GnRH调节大鼠GTH表达的受体后信号转导机制研究[D]. 王新.吉林大学 2007
[3]卵巢早衰动物模型的建立及口服耐受治疗自身免疫性卵巢早衰的相关研究[D]. 付莉.吉林大学 2005
硕士论文
[1]异氟烷暴露对成年雌鼠卵巢功能影响及其机制探讨[D]. 唐夏楠.华中科技大学 2019
[2]基于TGF-β/smads信号通路探讨坤泰胶囊对早发性卵巢功能不全大鼠的影响[D]. 陈淑萍.南京中医药大学 2019
[3]调经促孕针刺法对卵巢储备功能下降影响的临床探索性研究[D]. 李晓彤.中国中医科学院 2017
[4]探讨坤泰胶囊对环境化学物质诱导的卵巢储备功能下降大鼠模型颗粒细胞凋亡机制[D]. 耿利华.南京中医药大学 2017
[5]小鼠发情周期卵泡发育、生长因子与促进腺激素受体表达规律及超数排卵研究[D]. 朱娜.西北农林科技大学 2012
[6]心理应激对卵巢储备功能下降的调查研究[D]. 逯芳芳.广州中医药大学 2012
本文编号：3015248
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