Prokineticin-2在脓毒症中通过调控巨噬细胞功能发挥免疫保护作用的机制研究

发布时间：2021-02-06 01:33

　　目的:脓毒症（Sepsis）的定义是宿主抗感染免疫失调引起的危及生命的器官功能障碍。脓毒症发病率高,病情凶险,病死率高,是导致感染患者死亡的主要原因。但脓毒症发病机制复杂,目前尚未明确。为研究脓毒症致病机制,近期我们通过全基因组表达谱芯片筛选到一个在脓毒症中发挥关键免疫调节作用的新分子—Prokineticin-2（PROK2或者PK2）。PK2属于Prokineticin（前动力蛋白）家族,可高表达于外周血细胞、树突状细胞、淋巴细胞等重要免疫细胞,具有调节神经发育、血管生成、炎症性疼痛等多种生物学效应,但PK2在脓毒症中的作用目前尚无相关报道。因此,本研究拟检测脓毒症患者和脓毒症小鼠中PK2的表达水平,明确其作为脓毒症诊断标志物的潜在临床价值,并进一步阐明PK2在脓毒症中发挥免疫调节作用的具体分子机制,为脓毒症机制研究提供新的实验室证据,为脓毒症的临床治疗提供新的策略。方法:从重庆医科大学附属第一医院收集47例成人脓毒症患者和30例健康体检者血清标本;从重庆医科大学附属儿童医院收集31例儿童脓毒症患者以及20例健康体检者血清标本,采用ELISA法检测血清中PK2表达水平;通过脓毒症经... 

【文章来源】：重庆医科大学重庆市

【文章页数】：63 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

盲肠结扎穿刺术法构建小鼠脓毒症模型

重庆医科大学硕士研究生学位论文26图2脓毒症患者全血中PK2的表达量Figure2TheexpressionofPK2insepsis.(A)PK2concentrationsweretestedinserumsamplescollectedfrom47adultpatientswithsepsisandfrom21healthycontrolsubjects.(B)PK2concentrationsweretestedinserumsamplescollectedfrom31childrenpatientswithsepsisandfrom20healthycontrolsubjects.(C)PK2concentrationsweretestedinserumsamplesfromhealthycontrols,patientswithsepsisorsepticshock.3.1.2PK2在脓毒症小鼠中的表达具有时间依赖性为了进一步验证PK2在脓毒症中的表达规律，并进行后续机制研究，首先我们构建了小鼠脓毒症模型，收集不同时间点脓毒症小鼠全血以及PLF，并通过ELISA检测发现，如图3所示，相较于正常对照组，脓毒症小鼠体内PK2的表达具有时间依赖性，即早期呈一过性增加，并随疾病进展逐渐降低，具有统计学意义。再次表明，PK2可能确实在脓毒症中发挥重要的免疫调控作用。B

重庆医科大学硕士研究生学位论文28图4PK2处理后进行小鼠生存率实验.Figure4SurvivaltestsofsepticmiceafteradministrationofrecombinantPK2.3.2.2PK2处理后可部分改善脓毒症小鼠组织病理损伤情况由于脓毒症是宿主抗感染免疫失调导致的器官功能障碍，脓毒症进展后期多器官的功能衰竭是导致宿主死亡的直接因素。因此，我们又探索了PK2蛋白在脓毒症小鼠多器官损伤中的影响。首先，我们构建了脓毒症小鼠模型，收集并检测建模后24h和48h后将小鼠安乐死，所取小鼠的肺脏、肝脏、肾脏以及脾脏组织，经HE染色后进行评估小鼠各组织器官的病理损伤情况，如图5-A，发现rmPK2处理显著改善了肺脏、肝脏等多器官的损伤。进一步通过检测与损伤相关的生化指标发现，rmPK2处理组小鼠ALT、AST、Crea等损伤标志物较对照组降低，如图5-B，5-C与HE染色结果相吻合。说明PK2蛋白可改善脓毒症介导的多器官损伤。


本文编号：3019925