人尿源性干细胞外基质对人牙周膜干细胞增殖、黏附、铺展和分化的影响

发布时间：2021-02-26 13:10

　　研究背景:人牙周膜干细胞（h PDLSCs）是牙周组织再生中最适宜的种子细胞之一。在组织工程中,除适宜的种子细胞以外,生物材料也是必不可少的组成部分。良好的生物材料可以在体外扩增或体内移植种子细胞时与其协作,发挥积极作用。来源于间充质干细胞（MSCs）的细胞外基质（ECM）最近被证明是培养MSCs的理想表面材料。人尿源性干细胞（h USCs）具有易收集、采集非侵入性、价格低廉等优点,使它成为产生干细胞外基质的合适来源。本研究的目的为探究h USCs来源ECM（UECM）的生物学特点,以及对于h PDLSCs增殖、粘附、铺展和分化的作用。材料和方法:体外实验:从健康成年男性（年龄:20-25岁之间）尿液中提取h USCs。从正畸患者（年龄:12-18岁之间）中收集因为正畸治疗而拔除的健康前磨牙用于提取h PDLSCs。流式细胞仪检测两种干细胞的细胞表面标志物并进行多向分化能力鉴定。第4代h USCs和h PDLSCs接种于空白塑料孔板（TCP）,刺激产生细胞外基质。8天后脱细胞处理,只留下ECM。利用免疫荧光和扫描电镜检测人尿源性干细胞外基质（UECM）的蛋白组成和显微形态。将h PDL... 

【文章来源】：重庆医科大学重庆市

【文章页数】：70 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

hUSCs和hPDLSCs的形态学观察Figure1-1ThemorphologyofhPDLSCsandUSCsA：原代hUSCs呈“米粒状”或梭形，少许伞状形态

重庆医科大学硕士研究生学位论文18图1-1hUSCs和hPDLSCs的形态学观察Figure1-1ThemorphologyofhPDLSCsandUSCsA：原代hUSCs呈“米粒状”或梭形，少许伞状形态。B：传代后hUSCs形态均一。C：原代hPDLSCs呈长梭形或多角形，放射状排列。D：传代后hPDLSCs呈现长梭形。3.2人牙周膜干细胞和人尿源性干细胞表面标志物鉴定流式细胞仪检测显示，P3代hPDLSCs和hUSCsCD90和CD146表达呈阳性，CD31，CD43和CD45表达呈阴性（图1-2、1-3）。图1-2hPDLSCs的表面标志物检测Figure1-2FlowcytometricanalysisofhPDLSCs

重庆医科大学硕士研究生学位论文19图1-3hUSCs的表面标志物检测Figure1-3FlowcytometricanalysisofhUSCs3.3人牙周膜干细胞和人尿源性干细胞多向分化能力鉴定P3代hPDLSCs和hUSCs在成骨诱导培养基诱导21天，茜素红染色后倒置显微镜下可见红色钙结节（图1-4A，C）。P3代hPDLSCs和hUSCs在成脂诱导培养基诱导21天，油红O然后色倒置显微镜下可见红色脂滴（图1-4B，D）。图1-4hPDLSCs和hUSCs的茜素红染色和油红O染色Figure1-4AlizarinredSstainingandOilRedOstainingofhPDLSCsandhUSCsA：hPDLSCs茜素红染色可见红色钙结节。B：hPDLSCs油红O染色可见红色脂滴。C：hUSCs茜素红染色可见红色钙结节。D：hUSCs油红O染色可见红色脂滴。

【参考文献】：
期刊论文
[1]酶解组织块法原代培养人牙周膜干细胞和牙髓干细胞[J]. 李颖,谷子芽,吕秋峰,尤金彪,刘芳菲.  中国组织工程研究. 2012(32)



本文编号：3052633