金钗石斛生物碱对APP/PS1模式小鼠芳香化酶及雌激素/ERK信号通路的影响
发布时间：2021-03-07 17:05
目的:观察金钗石斛生物碱（Dendrobium nobile Lindl alkaloids,DNLA）对APP/PS1模式小鼠学习记忆功能的影响,并探讨其机制是否与芳香化酶及雌激素/ERK信号通路有关。方法:采用雌、雄鼠同时进行实验。将7月龄APP/PS1模式小鼠随机各分为3个组（10只/组）:APP/PS1组、APP/PS1+DNLA 10 mg/kg组、APP/PS1+DNLA 20 mg/kg组;同性别野生型（Wild-type,WT）对照组:共20只,雌雄各半（10只/组）。给药组小鼠每日灌胃给药1次,连续给药4个月,对照组小鼠给予同等体积的溶媒（含1%吐温80的双蒸水）。给药结束前,采用筑巢实验检测小鼠日常活动及社会执行能力;Y迷宫实验检测小鼠短暂的学习记忆能力;使用硫黄素-S染色观察小鼠皮质中老年斑的情况;Western blot测定雌性及雄性小鼠皮质中芳香化酶（Aromatase）,雌激素受体相关蛋白（ER1、ER2、GPR30）的表达,ERK/pERK蛋白的表达;APP非淀粉样途径中ADAM10、APP、Aβ1-42蛋白水平;采用ELISA对血清...
【文章来源】：遵义医科大学贵州省
【文章页数】：50 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
DNLA对APP/PS1模式小鼠筑巢行为能力的影响
遵义医科大学硕士学位论文魏胜焦162.1.2Y迷宫实验Y迷宫是小鼠一种自发交替行为，自发交替行为的正确率可以反映小鼠短暂的学习记忆能力。如图2所示，雌性APP/PS1模式小鼠的自发探索交替行为正确率明显低于同性别WT小鼠（P<0.05），给予DNLA后小鼠的自发探索交替行为正确率后明显增加（P<0.05）；雄性APP/PS1模式小鼠的自发探索交替行为正确率明显低于同性别WT小鼠（P<0.05），给予DNLA后，给药20mg/kg组小鼠的自发探索交替行为正确率明显增加（P<0.05）。Y迷宫结果提示，DNLA在雌性及雄性小鼠中均可改善APP/PS1小鼠的空间学习记忆能力。图2DNLA对APP/PS1模式小鼠Y迷宫实验的影响。（A）雌性小鼠Y迷宫自发探索交替行为；（B）雄性小鼠Y迷宫自发探索交替行为。（x±SEM，n=10），与正常对照组比较，*P<0.05；与APP/PS1组相比较，#P<0.05。Fig.2EffectofDNLAonYmazeinAPP/PS1mice.(A)ThecorrectrateofYmazetestspontaneousalternationinfemale;(B)ThecorrectrateofYmazetestspontaneousalternationinmale.(x±SEM,n=10),*P<0.05vsWT+Vehicle;#P<0.05vsAPP/PS1.2.2DNLA对APP/PS1模式小鼠皮质中Aβ沉积的影响Aβ在AD模式小鼠大脑皮质和海马中沉积形成的老年斑是AD的病理特征之一。为了探索DNLA对APP/PS1转基因模式小鼠大脑内老年斑的变化情况，本研究采用硫黄素-S染色法来观察AD小鼠脑内老年斑的变化。经硫黄素-S荧光染色结果可知11月龄的野生型小鼠皮质组织中未见老年斑的沉积，而同月龄同性别的APP/PS1对照组小鼠皮质组织形成大量老年斑，且部分聚集成团，给予DNLA后，APP/PS1给药组小鼠皮质中老年斑数量明显减少，且多为小体积，老年斑数量(P<0.05)明显被DNLA抑制。
遵义医科大学硕士学位论文魏胜焦17图3DNLA对APP/PS1模式小鼠皮质老年斑的影响。（A）雌性各组小鼠皮质硫黄素-S染色图片（标尺=500μm）；（B）雄性各组小鼠皮质硫黄素-S染色图片（标尺=500μm）（C）雌性小鼠硫黄素-S染色数量统计图；（D）雄性小鼠硫黄素-S染色数量统计图。（x±SEM，n=3），与正常对照组比较，*P<0.05；与APP/PS1组相比较，#P<0.05。Fig.3EffectsofDNLAonsenileplaquesformationinthecortexofmice.ThecoronalfrozensectionsofbrainswerestainedwiththioflavineS.(A)ImagesofthioflavineS-stainedsenileplaquesinthecortexofAPP/PS1miceinfemale(scalebar=500μm);(B)ImagesofthioflavineS-stainedsenileplaquesinthecortexofAPP/PS1miceinmale(scalebar=500μm);(C)StatisticsofthioflavineS-stainedamyloidplaquesnumberinthecortexofAPP/PS1miceinfemale;(D)StatisticsofthioflavineS-stainedamyloidplaquesnumberinthecortexofAPP/PS1miceinmale.(x±SEM,n=3);*P<0.05vsWT+Vehicle;#P<0.05vsAPP/PS1.2.3DNLA对APP/PS1模式小鼠ADAM10、APP、Aβ1-42蛋白的影响Aβ是脑内的正常产物，生理量的Aβ具有抑制神经元过度活化的作用，是保证神经元正常和持续性功能所必需的。APP基因的突变会引起脑内Aβ异常聚集，Aβ异常聚集形成的老年斑是AD主要的病理特征之一。我们采用Westernblot方法检测了雌、雄性小鼠皮质中ADAM10、APP及Aβ1-42蛋白。如图4显示：APP/PS1组较WT组雌、雄性小鼠中ADAM10蛋白水平表达明显降低（P<0.05），APP及Aβ1-42蛋白水平表达明显升高（P<0.05）。给予DNLA后升高了ADAM10蛋白水平表达（P<0.05），降低了APP、Aβ1-42蛋白水平表达（P<0.05）。结果提示DNLA可上调小鼠皮质中ADAM10蛋白水平表达，并可以抑
【参考文献】：
期刊论文
[1]蛇床子素对APP/PS1小鼠学习记忆功能及脑内Aβ产生的影响[J]. 李菲,刘义伟,李祖高,张洋洋,石京山. 遵义医学院学报. 2019(04)
[2]检测淀粉样沉淀蛋白的三种染色方法比较:抗体染色、Gallyas银染和硫磺素S染色（英文）[J]. 施新泽,魏轩,沙龙泽,许琪. Chinese Medical Sciences Journal. 2018(03)
[3]以β-淀粉样蛋白为靶点的阿尔茨海默病治疗途径[J]. 樊星,陈红,高雪峰,赵鹏,董贵成. 中西医结合心血管病电子杂志. 2016(36)
[4]阿尔茨海默病相关基因研究进展[J]. 黄少轩,娄季宇,白宏英. 中国实用神经疾病杂志. 2016(04)
[5]石斛药理研究进展[J]. 蒋元斌. 闽东农业科技. 2015(01)
[6]α-雌激素受体介导的膜信号转导通路[J]. 王麟,魏敏杰,金万宝. 生命的化学. 2006(06)
博士论文
[1]金钗石斛的化学成分与生物活性研究[D]. 张雪.沈阳药科大学 2005
硕士论文
[1]淫羊藿苷通过改善脑糖代谢功能紊乱对APP/PS1/Tau三转基因AD模式小鼠的神经保护作用[D]. 张莹.遵义医科大学 2019
[2]金钗石斛总生物碱对SAMP8小鼠脑衰老的保护作用及机制研究[D]. 吕凌丽.遵义医学院 2018
[3]金钗石斛总生物碱对APP/PS1转基因小鼠学习记忆影响及其相关因素研究[D]. 杨小惠.遵义医学院 2017
[4]金钗石斛总生物碱对阿尔茨海默病转基因模型Tg2576小鼠的影响[D]. 姚寅.遵义医学院 2013
本文编号：3069486
【文章来源】：遵义医科大学贵州省
【文章页数】：50 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
DNLA对APP/PS1模式小鼠筑巢行为能力的影响
遵义医科大学硕士学位论文魏胜焦162.1.2Y迷宫实验Y迷宫是小鼠一种自发交替行为，自发交替行为的正确率可以反映小鼠短暂的学习记忆能力。如图2所示，雌性APP/PS1模式小鼠的自发探索交替行为正确率明显低于同性别WT小鼠（P<0.05），给予DNLA后小鼠的自发探索交替行为正确率后明显增加（P<0.05）；雄性APP/PS1模式小鼠的自发探索交替行为正确率明显低于同性别WT小鼠（P<0.05），给予DNLA后，给药20mg/kg组小鼠的自发探索交替行为正确率明显增加（P<0.05）。Y迷宫结果提示，DNLA在雌性及雄性小鼠中均可改善APP/PS1小鼠的空间学习记忆能力。图2DNLA对APP/PS1模式小鼠Y迷宫实验的影响。（A）雌性小鼠Y迷宫自发探索交替行为；（B）雄性小鼠Y迷宫自发探索交替行为。（x±SEM，n=10），与正常对照组比较，*P<0.05；与APP/PS1组相比较，#P<0.05。Fig.2EffectofDNLAonYmazeinAPP/PS1mice.(A)ThecorrectrateofYmazetestspontaneousalternationinfemale;(B)ThecorrectrateofYmazetestspontaneousalternationinmale.(x±SEM,n=10),*P<0.05vsWT+Vehicle;#P<0.05vsAPP/PS1.2.2DNLA对APP/PS1模式小鼠皮质中Aβ沉积的影响Aβ在AD模式小鼠大脑皮质和海马中沉积形成的老年斑是AD的病理特征之一。为了探索DNLA对APP/PS1转基因模式小鼠大脑内老年斑的变化情况，本研究采用硫黄素-S染色法来观察AD小鼠脑内老年斑的变化。经硫黄素-S荧光染色结果可知11月龄的野生型小鼠皮质组织中未见老年斑的沉积，而同月龄同性别的APP/PS1对照组小鼠皮质组织形成大量老年斑，且部分聚集成团，给予DNLA后，APP/PS1给药组小鼠皮质中老年斑数量明显减少，且多为小体积，老年斑数量(P<0.05)明显被DNLA抑制。
遵义医科大学硕士学位论文魏胜焦17图3DNLA对APP/PS1模式小鼠皮质老年斑的影响。（A）雌性各组小鼠皮质硫黄素-S染色图片（标尺=500μm）；（B）雄性各组小鼠皮质硫黄素-S染色图片（标尺=500μm）（C）雌性小鼠硫黄素-S染色数量统计图；（D）雄性小鼠硫黄素-S染色数量统计图。（x±SEM，n=3），与正常对照组比较，*P<0.05；与APP/PS1组相比较，#P<0.05。Fig.3EffectsofDNLAonsenileplaquesformationinthecortexofmice.ThecoronalfrozensectionsofbrainswerestainedwiththioflavineS.(A)ImagesofthioflavineS-stainedsenileplaquesinthecortexofAPP/PS1miceinfemale(scalebar=500μm);(B)ImagesofthioflavineS-stainedsenileplaquesinthecortexofAPP/PS1miceinmale(scalebar=500μm);(C)StatisticsofthioflavineS-stainedamyloidplaquesnumberinthecortexofAPP/PS1miceinfemale;(D)StatisticsofthioflavineS-stainedamyloidplaquesnumberinthecortexofAPP/PS1miceinmale.(x±SEM,n=3);*P<0.05vsWT+Vehicle;#P<0.05vsAPP/PS1.2.3DNLA对APP/PS1模式小鼠ADAM10、APP、Aβ1-42蛋白的影响Aβ是脑内的正常产物，生理量的Aβ具有抑制神经元过度活化的作用，是保证神经元正常和持续性功能所必需的。APP基因的突变会引起脑内Aβ异常聚集，Aβ异常聚集形成的老年斑是AD主要的病理特征之一。我们采用Westernblot方法检测了雌、雄性小鼠皮质中ADAM10、APP及Aβ1-42蛋白。如图4显示：APP/PS1组较WT组雌、雄性小鼠中ADAM10蛋白水平表达明显降低（P<0.05），APP及Aβ1-42蛋白水平表达明显升高（P<0.05）。给予DNLA后升高了ADAM10蛋白水平表达（P<0.05），降低了APP、Aβ1-42蛋白水平表达（P<0.05）。结果提示DNLA可上调小鼠皮质中ADAM10蛋白水平表达，并可以抑
【参考文献】：
期刊论文
[1]蛇床子素对APP/PS1小鼠学习记忆功能及脑内Aβ产生的影响[J]. 李菲,刘义伟,李祖高,张洋洋,石京山. 遵义医学院学报. 2019(04)
[2]检测淀粉样沉淀蛋白的三种染色方法比较:抗体染色、Gallyas银染和硫磺素S染色（英文）[J]. 施新泽,魏轩,沙龙泽,许琪. Chinese Medical Sciences Journal. 2018(03)
[3]以β-淀粉样蛋白为靶点的阿尔茨海默病治疗途径[J]. 樊星,陈红,高雪峰,赵鹏,董贵成. 中西医结合心血管病电子杂志. 2016(36)
[4]阿尔茨海默病相关基因研究进展[J]. 黄少轩,娄季宇,白宏英. 中国实用神经疾病杂志. 2016(04)
[5]石斛药理研究进展[J]. 蒋元斌. 闽东农业科技. 2015(01)
[6]α-雌激素受体介导的膜信号转导通路[J]. 王麟,魏敏杰,金万宝. 生命的化学. 2006(06)
博士论文
[1]金钗石斛的化学成分与生物活性研究[D]. 张雪.沈阳药科大学 2005
硕士论文
[1]淫羊藿苷通过改善脑糖代谢功能紊乱对APP/PS1/Tau三转基因AD模式小鼠的神经保护作用[D]. 张莹.遵义医科大学 2019
[2]金钗石斛总生物碱对SAMP8小鼠脑衰老的保护作用及机制研究[D]. 吕凌丽.遵义医学院 2018
[3]金钗石斛总生物碱对APP/PS1转基因小鼠学习记忆影响及其相关因素研究[D]. 杨小惠.遵义医学院 2017
[4]金钗石斛总生物碱对阿尔茨海默病转基因模型Tg2576小鼠的影响[D]. 姚寅.遵义医学院 2013
本文编号：3069486
本文链接：https://www.wllwen.com/shoufeilunwen/mpalunwen/3069486.html
最近更新
教材专著
