柯萨奇病毒A组2型小鼠模型的研究及候选疫苗体内效力评估

发布时间：2024-06-30 18:56

　　手足口病(Hand,foot and mouth disease,HFMD)是一种法定丙类传染性疾病,能够由多种肠道病毒血清型引起。HFMD多发于5岁以下儿童,目前研究表明造成该病的主要病原体有人肠道病毒71型(Enterovirus 71,EV71)、柯萨奇病毒A组6型(Coxsackievirus A 6,CVA6)、CVA10、CVA16和CVA2[1,2]。CVA2衣壳由四种结构蛋白(VP1,VP2,VP3,VP4)组成,其中VP1含有的结合表位能与细胞受体特异性识别^[3]。目前,关于CVA2蛋白功能的研究较为缺乏,根据其它肠道病毒的研究,推测CVA2 VP1、VP2和VP3可含有抗原表位能促使机体产生抗病毒的中和抗体,因此本研究选择了CVA2的VP1和VP3片段,将CVA2-VP1和CVA2-VP3部分基因分别整合入pGEX-6p-1载体,并经诱导、纯化免疫等步骤最终获得兔抗血清并进行鉴定,为研究CVA2提供了结构蛋白抗原检测的方法。在研发疫苗过程中,有两个非常重要的技术环节:一是候选疫苗株的筛选;二是建立动物模型用以评价候选疫苗的体内保护效力。本研究作...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图0.1肠道病毒基因组结构与蛋白功能Fig.0.1Structureoftheenterovirusgenome

武汉生物制品研究所2020届硕士研究生毕业论文95′UTR复杂的二级结构能够形成茎环，Poly(A)尾巴位于3′UTR，中间为一段较长的开放阅读框（ORF）。ORF能编码产生病毒的结构蛋白P1域以及非结构蛋白P2和P3域，且蛋白酶能将P1分解为4种病毒衣壳蛋白（VP1、VP2、V....

图0.2多克隆抗体制备技术路线图

武汉生物制品研究所2020届硕士研究生毕业论文11技术路线本研究为多价手足口病疫苗研发项目的子课题，目的是在小鼠模型的建立以及疫苗株的筛选过程中能够取得突破。为此本研究主要从四个部分进行实验设计，第一部分是制备CVA2–VP1、VP3兔抗血清用于后续抗原的鉴定，第二部分是制备CV....

图0.3主动免疫实验技术路线图

武汉生物制品研究所2020届硕士研究生毕业论文11技术路线本研究为多价手足口病疫苗研发项目的子课题，目的是在小鼠模型的建立以及疫苗株的筛选过程中能够取得突破。为此本研究主要从四个部分进行实验设计，第一部分是制备CVA2–VP1、VP3兔抗血清用于后续抗原的鉴定，第二部分是制备CV....

图1.1pGEX-6p-1表达载体图谱

武汉生物制品研究所2020届硕士研究生毕业论文12第一章材料与方法1.1实验材料1.1.1细胞RD细胞由本研究所质量控制部提供，Vero细胞由美国模式培养物集存库中购买而来。1.1.2菌株、载体菌株：大肠杆菌DH5α、BL21(DE3)、感受态细胞本研究所病毒性疫苗研究一室(以下....

本文编号：3998939