多西紫杉醇—双氢青蒿素偶联前药自组装纳米粒的构建与抗肿瘤活性评价
发布时间：2021-03-19 23:04
目的:为发挥多西紫杉醇（docetaxel,DTX）与双氢青蒿素（dihydroartemisinin,DHA）协同抗肿瘤效果,本文设计了以肿瘤内环境还原响应的二硫键为连接臂的多西紫杉醇-双氢青蒿素偶联前药（docetaxel-dihydroartemisinin prodrug）,通过纳米沉淀法制备成自组装纳米粒（docetaxel-dihydroartemisinin nanoconjugates,DSDNs）,并对纳米制剂的制剂学特性、在大鼠体内的药动学、对4T1细胞体外的抗肿瘤活性及对4T1荷瘤小鼠的体内抗肿瘤活性进行评价,以期为两者协同抗肿瘤提供支持。方法:1.多西紫杉醇-双氢青蒿素偶联前药的制备与表征以多西紫杉醇及双氢青蒿素为原料,通过两步酯化反应制备含有二硫键连接的DTX-DHA偶联前药（DTX-S-S-DHA）。采用高分辨质谱（HR-MS）,核磁共振氢谱与碳谱(1H-NMR,13C-NMR)和傅里叶红外光谱仪（FT-IR）进行结构确证。2.多西紫杉醇-双氢青蒿素偶联前药自组装纳米粒的制备及处方优化采用高效液相色谱法（high ...
【文章来源】：山西医科大学山西省
【文章页数】：92 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
DSDNs共载药纳米系统的流程图
山西医科大学硕士学位论文4述反应瓶中，于35℃条件下反应24h，TLC监测反应进程（展开剂为环己烷：乙酸乙酯：冰乙酸=3:1.5:0.1）。硅胶柱层析（254nm紫外灯下Rf值鉴于0.4-0.6之间），对产物进行分离纯化得淡黄色粘稠固体产物1（S-S-DHA）。取产物1（200mg，0.42mmol），NHS（29.5mg，0.50mmol）、EDC（49.2mg，0.50mmol），精密称定，加入TEA3滴及适量二氯甲烷溶解，在0℃条件下反应1h，加入DTX（172.8mg，0.21mmol）于30℃反应24h。TLC监测反应（展开剂：环己烷：乙酸乙酯：冰乙酸=1:1:0.1）。反应结束后，进行硅胶柱层析（254nm紫外灯下Rf值鉴于0.6左右的强吸收带），收集目标组分的洗脱液，将其真空旋干，获得淡黄色粘稠液体终产物2（DTX-S-S-DHA）。合成路线见图1-1。图1-1DHA-S-S-DTX合成路线Figure1-1SynthesisroutofDTX-S-S-DHA1.4结构鉴定采用U3000型超高效液相色谱仪-ThermoScientificQExtractive质谱仪、JNM-ECZS400核磁共振波谱仪以及Thermofisher红外光谱仪对其分子量进行确证与表征。1.5熔点测定取适量DTX-S-S-DHA置于载玻片上，轻轻研展至薄薄一层，盖上盖玻片，置于YRT-3型熔点仪中，调整焦距开始缓慢加热，在显微镜下观察样品的物态变化，记录初熔和终熔温度。
山西医科大学硕士学位论文52结果2.1HR-MS分子量鉴定DTX-S-S-DHA的高分辨质谱图结果见图1-2，质荷比m/z1288.479为[M+Na]+峰，表明合成产物的分子量正确。图1-2DHA-S-S-DTX高分辨质谱结果Figure1-2HR-MSspectrumofDTX-S-S-DHA.2.21H-NMR结构鉴定DTX-S-S-DHA的1H-NMR结果见图1-3，DTX-S-S-DHA的1H-NMR（400MHz，DMSO-d6，ppm）的结果如下：δ7.95（d，J=8.2Hz，2H），7.75-7.65（m，1H），7.63-7.59（m，2H），7.44-7.28（m，4H），7.16-7.12（m，1H），5.76（s，1H），5.68-5.65（m，1H），5.54（s，2H），5.36（d，J=7.8Hz，1H），5.06（d，J=13.9Hz，2H），4.96（d，J=7.5Hz，1H），4.92-4.79（m，2H），4.39（s，1H），3.60（d，J=7.7Hz，1H），2.95-2.87（m，4H），2.82-2.69（m，4H），2.63-2.53（m，1H），2.32（s，2H），2.21（s，3H），2.12（d，J=14.1Hz，1H），1.87（s，2H），1.67（s，3H），1.64-1.54（m，3H），1.50（d，J=4.1Hz，3H），1.47（s，3H），1.43（d，J=16.0Hz，1H），1.34（s，9H），1.28（s，1H），1.25（s，3H），1.19（s，1H），1.15（d，J=0.9Hz，1H），1.14（s，1H），1.12（d，J=0.9Hz，2H），0.94（s，6H），0.90（s，1H），0.85（d，J=6.7Hz，3H），0.79（s，1H）)，0.75（d，J=7.4Hz，3H）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]十八胺修饰的双氢青蒿素前药自组装纳米粒的制备及其抗疟活性评价[J]. 王蓉蓉,任国莲,王锐利,张丽锋,张淑秋. 中国医药工业杂志. 2019(10)
[2]PD-1/PD-L1抑制剂联合其他方法治疗乳腺癌的研究进展[J]. 李国瑞,强磊,宫春爱,田泾,高申. 山东医药. 2018(37)
本文编号：3090385
【文章来源】：山西医科大学山西省
【文章页数】：92 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
DSDNs共载药纳米系统的流程图
山西医科大学硕士学位论文4述反应瓶中，于35℃条件下反应24h，TLC监测反应进程（展开剂为环己烷：乙酸乙酯：冰乙酸=3:1.5:0.1）。硅胶柱层析（254nm紫外灯下Rf值鉴于0.4-0.6之间），对产物进行分离纯化得淡黄色粘稠固体产物1（S-S-DHA）。取产物1（200mg，0.42mmol），NHS（29.5mg，0.50mmol）、EDC（49.2mg，0.50mmol），精密称定，加入TEA3滴及适量二氯甲烷溶解，在0℃条件下反应1h，加入DTX（172.8mg，0.21mmol）于30℃反应24h。TLC监测反应（展开剂：环己烷：乙酸乙酯：冰乙酸=1:1:0.1）。反应结束后，进行硅胶柱层析（254nm紫外灯下Rf值鉴于0.6左右的强吸收带），收集目标组分的洗脱液，将其真空旋干，获得淡黄色粘稠液体终产物2（DTX-S-S-DHA）。合成路线见图1-1。图1-1DHA-S-S-DTX合成路线Figure1-1SynthesisroutofDTX-S-S-DHA1.4结构鉴定采用U3000型超高效液相色谱仪-ThermoScientificQExtractive质谱仪、JNM-ECZS400核磁共振波谱仪以及Thermofisher红外光谱仪对其分子量进行确证与表征。1.5熔点测定取适量DTX-S-S-DHA置于载玻片上，轻轻研展至薄薄一层，盖上盖玻片，置于YRT-3型熔点仪中，调整焦距开始缓慢加热，在显微镜下观察样品的物态变化，记录初熔和终熔温度。
山西医科大学硕士学位论文52结果2.1HR-MS分子量鉴定DTX-S-S-DHA的高分辨质谱图结果见图1-2，质荷比m/z1288.479为[M+Na]+峰，表明合成产物的分子量正确。图1-2DHA-S-S-DTX高分辨质谱结果Figure1-2HR-MSspectrumofDTX-S-S-DHA.2.21H-NMR结构鉴定DTX-S-S-DHA的1H-NMR结果见图1-3，DTX-S-S-DHA的1H-NMR（400MHz，DMSO-d6，ppm）的结果如下：δ7.95（d，J=8.2Hz，2H），7.75-7.65（m，1H），7.63-7.59（m，2H），7.44-7.28（m，4H），7.16-7.12（m，1H），5.76（s，1H），5.68-5.65（m，1H），5.54（s，2H），5.36（d，J=7.8Hz，1H），5.06（d，J=13.9Hz，2H），4.96（d，J=7.5Hz，1H），4.92-4.79（m，2H），4.39（s，1H），3.60（d，J=7.7Hz，1H），2.95-2.87（m，4H），2.82-2.69（m，4H），2.63-2.53（m，1H），2.32（s，2H），2.21（s，3H），2.12（d，J=14.1Hz，1H），1.87（s，2H），1.67（s，3H），1.64-1.54（m，3H），1.50（d，J=4.1Hz，3H），1.47（s，3H），1.43（d，J=16.0Hz，1H），1.34（s，9H），1.28（s，1H），1.25（s，3H），1.19（s，1H），1.15（d，J=0.9Hz，1H），1.14（s，1H），1.12（d，J=0.9Hz，2H），0.94（s，6H），0.90（s，1H），0.85（d，J=6.7Hz，3H），0.79（s，1H）)，0.75（d，J=7.4Hz，3H）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]十八胺修饰的双氢青蒿素前药自组装纳米粒的制备及其抗疟活性评价[J]. 王蓉蓉,任国莲,王锐利,张丽锋,张淑秋. 中国医药工业杂志. 2019(10)
[2]PD-1/PD-L1抑制剂联合其他方法治疗乳腺癌的研究进展[J]. 李国瑞,强磊,宫春爱,田泾,高申. 山东医药. 2018(37)
本文编号：3090385
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