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辣椒素影响神经胶质瘤细胞自噬的机制及意义研究

发布时间:2021-04-08 08:47
  目的:探讨神经胶质瘤中辣椒素与自噬的作用及关系及其作用机制和临床意义。方法:1.应用免疫组化ElivisionTMplus法检测151例人不同级别神经胶质瘤组织(实验组)和20例水肿脑组织(对照组)中的自噬相关蛋白SQSTM1/p62、LC3B和mTOR蛋白的表达情况;并分析上述因子与胶质瘤患者与临床病理参数及预后(整体生存期、无瘤生存期)之间的关系。2.实验分组1:分别用自噬诱导剂雷帕霉素(对照组)、辣椒素及雷帕霉素+辣椒素联合处理人胶质母细胞瘤T98G和人星形细胞瘤U373细胞株,观察自噬相关蛋白SQSTM1/p62和Beclin1在各组中表达水平的差异。3.实验分组2:构建抑制自噬的mTOR表达质粒,将实验分为(1)空白对照组(2)空载体组(3)mTOR过表达组(4)辣椒素组(5)mTOR过表达+辣椒素组。运用Lipofectamin3000试剂盒瞬时转染T98G和U373细胞株,CCK-8试剂盒检测上述各组细胞的增殖情况的差异;qRT-PCR检测上述各组细胞的mRNA水平差异;WB检测上述各组中自噬相关蛋白SQSTM1/p62、LC3B、ATG5和Becl... 

【文章来源】:蚌埠医学院安徽省

【文章页数】:68 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

辣椒素影响神经胶质瘤细胞自噬的机制及意义研究


星形细胞瘤Ⅰ-Ⅳ级HE镜下图像

胶质,神经,蛋白,情况


25图2:各级别神经胶质瘤组织中mTOR、LC3B、SQSTM1/p62的蛋白表达情况(×100)。A:Ⅰ级高表达,强阳性;B:Ⅱ级中等阳性;C:Ⅲ级弱表达;D:Ⅳ级阴性表达;E:Ⅰ级中呈弱表达;F:Ⅱ级中呈中等阳性;G:Ⅲ级中呈中等阳性;H:Ⅳ级中呈高表达;I:Ⅰ级中呈弱表达;J:Ⅱ级中呈弱阳性;K:Ⅲ级中呈中等阳性;L:Ⅳ级中呈中等强度表达。Figure2:ExpressionofmTOR,LC3B,andSQSTM1/p62proteiningliomatissuesofvariousgrades(×100).A:GradeⅠhighexpression,strongpositive;B:GradeⅡmediumpositive;C:GradeⅢweakexpression;D:GradeⅣnegativeexpression;E:WeakexpressioningradeⅠ;F:ModeratepositiveingradeⅡ;G:ModeratepositiveingradeⅢ;H:HighexpressioningradeⅣ;I:WeakexpressioningradeⅠ;J:weaklypositiveingradeⅡ;K:moderatelypositiveingradeⅢ;L:moderatelystrongexpressioningradeⅣ.3.2LC3B、SQSTM1/p62、mTOR的表达水平与神经胶质瘤患者临床病理参数的相关性分析151例神经胶质瘤病例中,LC3B高表达者为107例(70.90%)。在性别、肿瘤大孝KPS评分、有无复发等分组中,LC3B的表达在各组之间均不具有统计学意义(P>0.05);而在年龄、分级分组中LC3B的表达在这两组中均具有统计学意义(P<0.001)。其中,在年龄分组中,<50岁组77例中有41例LC3B高

曲线图,生存率,相关性,胶质


31图3:LC3B、SQSTM1/p62、mTOR与总生存率和无瘤生存率之间的相关性。A.LC3B表达水平胶质瘤患者的无瘤生存曲线图(Log-rank=18.319,P<0.001);B.LC3B不同表达水平胶质瘤患者的总体生存曲线图(Log-rank=51.197,P<0.001);C.SQSTM1/p62不同表达水平胶质瘤患者的无瘤生存曲线图(Log-rank=15.304,P<0.001);D.SQSTM1/p62不同表达水平胶质瘤患者的总体生存曲线图(Log-rank=51.526,P<0.001);E.mTOR不同表达水平

【参考文献】:
期刊论文
[1]MEG3和腺苷对HepG2细胞自噬和增殖的影响[J]. 蒲泽锦,李国平,詹浩炼,周小涛,郭益添,项梦琦,刘丽璇,谭辉,吴灵飞.  中国病理生理杂志. 2018(09)
[2]MicroRNA和雪旺细胞自噬与周围神经再生修复的研究进展[J]. 高群,宁昕杰,王辉.  中国病理生理杂志. 2018(08)
[3]辣椒素通过抑制自噬活性抑制实验性自身免疫性神经炎[J]. 周寿红,薛瑞瑞,郭潇潇,盛思敏,杜倩,夏嘉辉,肖婷,林芬.  中国药理学通报. 2018(02)
[4]雷帕霉素减轻氧糖剥夺对SH-SY5Y细胞的损伤[J]. 卢娜,魏林郁,王宝英,李璐,杨坤丽,李东亮.  中国病理生理杂志. 2017(01)
[5]辣椒素及二氢辣椒素对神经胶质瘤C6细胞和骨肉瘤ROS 17/2.8细胞的抑制作用[J]. 谢乐,周慎,伍大华,刘冬,向光红,唐涛,唐劲天.  湖南中医药大学学报. 2014(10)
[6]自噬与胶质瘤治疗研究[J]. 崔磊,陈忠平.  中国神经肿瘤杂志. 2009(02)

博士论文
[1]ARPP-19,LC3B,P62在神经胶质瘤中的表达和意义[D]. 江涛.安徽医科大学 2016



本文编号:3125248

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