獐牙菜苦苷对SH-SY5Y细胞OGD/R损伤的保护作用及其作用机制研究

发布时间：2021-04-30 10:06

　　目的:查阅参考獐牙菜苦苷与脑缺血再灌注损伤的相关文献,建立人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y缺氧缺糖/复氧（OGD/R）损伤模型,研究獐牙菜苦苷对OGD/R损伤的SH-SY5Y细胞的潜在神经保护作用及作用机制。另建立獐牙菜苦苷高效液相色谱分析方法并对其进行方法学考察,研究其溶解性和稳定性的影响因素,为深入开发利用獐牙菜苦苷提供实验基础和药理基础。方法:1.构建人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y的OGD/R模型并随机分为:正常组（Control）、OGD/R损伤模型组（Vehicle）、OGD/R损伤+STM组（120、60、30μM）共计5组;2.用CCK-8法检测不同浓度（30μM,60μM和120μM）的STM作用于SH-SY5Y细胞24小时后的细胞毒性;利用CCK-8法检测各组SH-SY5Y细胞的细胞活力;3.用Annexin V/PI法测定各组凋亡细胞的比例;4.采用JC-1探针检测各组细胞线粒体膜电位（MMP）的变化;5.采用DCFH-DA染色法检测各组细胞内活性氧（ROS）生成水平;6.观察獐牙菜苦苷对SH-SY5Y细胞OGD/R损伤的影响,采用Western blot方法对细... 

【文章来源】：湖北中医药大学湖北省

【文章页数】：66 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
缩略词表
前言
第一部分 细胞培养与OGD/R模型的建立
    1.材料
        1.1 细胞株
        1.2 试剂
        1.3 仪器
    2.方法
        2.1 SH-SY5Y细胞株的培养
        2.2 OGD/R模型的建立及实验分组
    3.结果
    4.结论
    5.讨论
第二部分 獐牙菜苦苷对SH-SY5Y细胞OGD/R损伤的保护作用
    1.材料
        1.1 试剂
        1.2 仪器
    2.方法
        2.1 CCK-8 法测定细胞存活率
        2.2 Annexin V/PI法测定细胞凋亡情况
        2.3 JC-1 法测定细胞线粒体膜电位的变化
        2.4 DCFH-DA探针测定细胞内ROS水平
    3.统计学处理
    4.结果
        4.1 STM对 SH-SY5Y细胞存活率的影响
        4.2 STM对 OGD/R诱导SH-SY5Y细胞凋亡的影响
        4.3 STM对 SH-SY5Y细胞OGD/R损伤线粒体膜电位的影响
        4.4 STM对 SH-SY5Y细胞OGD/R损伤ROS的影响
    5.结论
    6.讨论
第三部分 獐牙菜苦苷基于TLR4/PARP1/NF-κB信号途径对SH-SY5Y细胞OGD/R损伤的保护机制研究
    1.材料
        1.1 试剂
        1.2 仪器
    2.方法
    3.统计学处理
    4.结果
    5.结论
    6.讨论
第四部分 獐牙菜苦苷在Hank’s平衡盐溶液中的溶解性与稳定性研究
    1.材料
        1.1 药品
        1.2 试剂
        1.3 仪器
    2.方法
        2.1 HPLC分析方法建立
        2.2 助溶剂和增溶剂的选择
        2.3 溶解性和稳定性实验
    3.结果
        3.1 pH值对STM在 HBSS中溶解性和稳定性的影响
        3.2 温度对STM在 HBSS中溶解性和稳定性的影响
        3.3 光照对STM在 HBSS溶液中的稳定性的影响
    4.结论
    5.讨论
结语
参考文献
附录
    综述
        参考文献
发表论文
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]缺血性脑卒中的病理机制研究进展及中医药防治[J]. 张艾嘉,王爽,王萍,王烨燃.  中国实验方剂学杂志. 2020(05)
[2]脑缺血再灌注神经细胞凋亡机制研究进展[J]. 王冬睿,范蕾.  中国药理学与毒理学杂志. 2019(10)
[3]电针通过调节TLR4/MyD88/NF-κb信号通路改善缺血性脑卒中损伤研究现状[J]. 庄丽华,詹松华,杨烁慧,陆方,孔营楠,龚志刚.  中华中医药学刊. 2019(09)
[4]坎地沙坦对脑缺血再灌注大鼠抗氧化的作用[J]. 陈亚雪,宋岚,尹加珍,李国春,张红,黄新武.  广东医学. 2019(S1)
[5]獐牙菜苦苷的抗炎活性及其对NF-κB通路相关因子p65和IKK-α表达的影响[J]. 王君燕,童晔玲,赵文慧.  中国现代应用药学. 2018(12)
[6]缺血性脑卒中损伤机制研究进展[J]. 吴咏梅,陶茹莹,孟祥宝,孙晓波,孙桂波,张辉.  吉林中医药. 2018(03)
[7]Toll样受体4对大鼠脑缺血再灌注损伤的作用[J]. 邢海会,丁晓慧,解辉,王忠华,谢菊华,陈丰洋,罗崟洲,周胜男.  中国医科大学学报. 2018(03)
[8]微小RNA与脑缺血再灌注损伤机制的研究进展[J]. 李强,王洪新.  中国城乡企业卫生. 2018(02)
[9]脑缺血再灌注损伤细胞凋亡机制的研究进展[J]. 彭智远,刘旺华,曹雯.  中华中医药学刊. 2017(08)
[10]NF-κB通路与川芎提取物抗脑缺血作用相关性研究[J]. 俞茹云,过忆,林莉莉.  南京中医药大学学报. 2017(01)



本文编号：3169323