血管紧张素（1-7）通过调节MIN6细胞表型因子对高糖诱导的胰岛β细胞去分化的影响

发布时间：2021-05-16 08:40

　　目的:体外培养小鼠MIN-6细胞,进行分组干预,明确血管紧张素（1-7）对高糖应力下胰岛β细胞去分化的影响,为糖尿病治疗提供新思路。方法:在紫外线消毒30分钟的超净工作台,将MIN-6小鼠胰岛细胞吸入至提前配置好的完全培养基3ml（10%胎牛血清、1%青链霉素双抗溶液、89%RPMI-1640基础培养基混匀配置）,吹打均匀后放于25T培养瓶,最后放置37℃,5%CO₂细胞培养箱中孵化,24小时换液,显微镜下观察细胞生长状态,细胞贴壁均匀生长至70%-80%可进行传代,传至第5代时进行实验具体操作。将悬浮的MIN-6细胞均匀分布于6孔板中,分别标记A、B、C、D组,分别为实验对照组、高糖组、高糖+Ang-（1-7）组、高糖+Ang-（1-7）+Mas受体阻断剂A779组,共同培养24小时,重复3次上述操作。用细胞免疫荧光法检测各组MIN-6成熟β细胞表面标志物PDX-1蛋白以及去分化后祖细胞表面标志物Oct4、Nanog蛋白表达。结果:1.细胞形态:显微镜下观察,正常对照组中的MIN-6细胞,呈瓦片状,贴壁均匀生长;高糖组可见悬浮细胞,贴壁细胞分布不均匀,且形态不一... 

【文章来源】：山西医科大学山西省

【文章页数】：42 页

【学位级别】：硕士

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中文摘要
ABSTRACT
常用缩写词中英文对照表
前言
1 材料与方法
    1.1 实验细胞
    1.2 实验主要试剂
    1.3 实验主要仪器
    1.4 实验主要试剂配制方法
2 研究方法
    2.1 MIN-6 小鼠胰岛细胞培养
        2.1.1 细胞复苏
        2.1.2 细胞传代
        2.1.3 细胞冻存
    2.2 实验分组
    2.3 细胞免疫荧光
    2.4 统计学分析
3 结果
    3.1 显微镜下观察各组MIN-6 细胞生长状况
    3.2 细胞免疫荧光法检测各组MIN-6 成熟细胞表面标志物PDX-1 以及去分化后祖细胞表面标志物Oct4、Nanog3 蛋白表达
    3.3 小鼠 MIN-6 内分泌祖细胞表型标志物 Oct4、Nango 免疫荧光结
    3.4 MIN-6 细胞表型标志物 PDX-1、Oct4、Nango 相对表达水平
4 讨论
5 结论
参考文献
综述
    参考文献
致谢
个人简历


【参考文献】：
期刊论文
[1]2型糖尿病的胰岛β细胞衰竭新机制——胰岛β细胞去分化[J]. 谭明红,魏平.  中国糖尿病杂志. 2017(01)
[2]血管紧张素1-7对2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗的影响及机制[J]. 何军华,刘航,王丽,吴慧璐,丹妮,郭红,李兴.  中国药物与临床. 2017(01)
[3]高糖通过下调FoxO1磷酸化诱导β细胞去分化[J]. 刘婵,郑晓雅,夏佳佳,任伟,李林蔓,刘兰.  中国生物化学与分子生物学报. 2016(01)



本文编号：3189368