AMPK介导线粒体融合与裂变在抑制P2X7受体抗小鼠脑缺血/再灌注损伤中的作用

发布时间：2021-05-20 05:55

　　缺血性脑卒中的发生是由脑部血液供应不足造成的,目前主要的治疗手段是恢复血液再灌注,但是在这一过程中会进一步加重脑组织损伤,这种病理生理改变称为脑缺血/再灌注（ischemia/reperfusion,I/R）损伤。由于其发生机制复杂,近年来对脑I/R损伤的病理生理机制及如何减轻这一损伤成为研究的热点。研究表明,P2X7受体受到抑制时可发挥抗脑I/R损伤的作用,但其作用机制仍需要进一步的研究。线粒体是为细胞提供能量的动态细胞器,在正常状态下处于融合与裂变的平衡之中。但当发生I/R损伤时,其动态平衡会遭到破坏并趋向于裂变,从而加重损伤。研究表明AMP-activated protein kinase（AMPK）可以调节线粒体的融合与裂变,且在酒精性肝病中抑制P2X7受体可以增强AMPK的活性。但在小鼠脑I/R损伤中,抑制P2X7受体与AMPK是否存在相似的作用尚未有文献报导。因此,本研究采用在体和离体两部分实验来探讨AMPK介导的线粒体融合与裂变在抑制P2X7受体抗小鼠脑I/R损伤中的作用及具体的作用机制。目的:探讨AMPK介导的线粒体融合与裂变在抑制P2X7受体抗小鼠脑I/R损伤中的作用... 

【文章来源】：蚌埠医学院安徽省

【文章页数】：58 页

【学位级别】：硕士

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中文摘要
Abstract
前言
材料与方法
    1. 材料与要仪器
        1.1. 实验动物
        1.2. 主要药品与试剂
        1.3. 主要仪器设备
    2. 方法
        2.1. 实验分组与给药处理
        2.2. 小鼠脑I/R损伤模型制备
        2.3. 小鼠神经行为学评分
        2.4. 小鼠脑梗死体积百分率的计算
        2.5. 小鼠大脑皮层中线粒体形态的检测
        2.6. Western Blot检测小鼠脑组织中p-AMPK、p-Drp1、Mfn2蛋白表达的变化
        2.7. 神经元细胞提取
        2.8. 神经元细胞分组、给药及H/R损伤模型制备
        2.9. 细胞存活率检测
        2.10. ROS检测
        2.11. 线粒体形态检测
        2.12. Western Blot检测神经元细胞中p-AMPK、p-Drp1、Mfn2蛋白表达的变化
    3. 统计学分析
实验结果
    1. 抑制P2X7受体对脑I/R损伤小鼠神经行为学评分的影响
    2. 抑制P2X7受体对脑I/R损伤小鼠脑梗死体积百分率的影响
    3. 抑制P2X7受体对脑I/R损伤小鼠脑脑组织线粒体形态的影响
    4. 抑制P2X7受体对脑I/R损伤小鼠脑组织p-AMPK表达的影响
    5. 抑制P2X7受体对脑I/R损伤小鼠脑组织Mfn2、p-Drp1表达的影响
    6. 神经元细胞生长状态
    7. 抑制P2X7受体对H/R损伤神经元细胞死亡率的影响
    8. 抑制P2X7受体对H/R损伤神经元细胞线粒体形态的影响
    9. 抑制P2X7受体对H/R损伤神经元细胞ROS产生的影响
    10. 抑制P2X7受体对H/R损伤神经元细胞p-AMPK表达的影响
    11. 抑制P2X7受体对H/R损伤神经元细胞Mfn2、p-Drp1表达的影响
讨论
结论
课题创新点
参考文献
致谢
附录A 主要英文缩略词表
附录B 主要试剂配制方法
附录C 个人简历及论文发表情况
附录D 综述
    参考文献



本文编号：3197215