蛇床子素调控AKT/mTORC1/FASN和Erk信号通路延缓肝细胞癌发展的作用机制研究
发布时间：2021-06-05 13:58
目的:肝细胞癌（HCC）是世界上最常见的癌症之一,在中国每年约有20多万人死于肝癌。尽管HCC的治疗药物不断发展,但生存率仍然不高。研究表明从头脂肪酸合成异常是HCC发生和发展的重要原因,且抑制从头脂肪酸合成关键酶脂肪酸合酶（FASN）的表达能够抑制小鼠HCC的形成。中医药是我国的传统科学,在抑制肿瘤进展、减轻手术并发症以及提高化疗和放射疗法的敏感性等癌症治疗的多个过程中都发挥着重要作用。因此,从中药提取物中寻找化合物抑制FASN的表达来抑制从头脂肪酸异常合成,从而延缓HCC的发展是一个可能的方向。蛇床子素具有抗炎、免疫调节和抗肿瘤等多种药理作用,且已有体外和裸鼠模型研究表明蛇床子素对HCC具有一定的治疗作用,但其能否通过AKT/mTORC1/FASN通路调控从头脂肪酸合成来抑制HCC的发展还未有人研究。本课题组前期研究结果表明采用高压尾静脉转染技术在小鼠肝脏内同时过表达AKT和c-Met质粒可建立小鼠HCC模型,且该模型具有重度脂肪化和靶点明确等特点。本研究拟采用这一新型HCC模型来研究蛇床子素通过AKT/mTORC1/FASN和Erk信号通路延缓HCC发展的作用机制,旨在为蛇床子素...
【文章来源】：湖北中医药大学湖北省
【文章页数】：76 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
蛇床子素延缓AKT/c-Met诱导小鼠肝细胞癌的发生（±,=5）
蛇床子素调控AKT/mTORC1/FASN和Erk信号通路延缓肝细胞癌发展的作用机制研究17几乎不见胞浆；AKT/c-Met-Ost-L和AKT/c-Met-Ost-H小鼠肝脏组织病变减轻，细胞结构较清晰，空泡变性减少，细胞核变孝多核细胞明显减少，肝细胞内充满少量胞浆；且AKT/c-Met-Ost-H组改善更为明显，肿瘤病变区域外可见正常组织区域。图2蛇床子素改善AKT/c-Met诱导小鼠肝组织病理学变化（比例尺=100μm）Fig2OstholeimprovesthepathologicalchangesoflivertissueinAKT/c-Met-inducedmice.(scalebar=100μm)3.3蛇床子素对AKT/c-Met诱导HCC小鼠肝脏组织和血液中肿瘤标记物的影响AFP和GPC3是HCC临床上最常用的的诊断和预后标志物。我们采用Elisa检测了各组小鼠血清中AFP蛋白的表达情况，结果如图3所示。与WT组相比，AKT/c-Met模型组AFP蛋白表达量明显升高（P<0.001）；经蛇床子素干预后AKT/c-Met诱导的小鼠血清中AFP表达量减少（P<0.05）且AKT/c-Met-Ost-H组减少更为明显（P<0.01）。接下来我们用qRT-PCR检测了肝脏组织中AFP和GPC3mRNA的表达水平。结果如图3B、C所示。与WT组相比，AKT/c-Met模型组和GPC3的mRNA表达量明显升高（P<0.05）；经蛇床子素干预后AKT/c-Met诱导的小鼠肝脏组织中AFP和GPC3的mRNA表达量明显减少
蛇床子素调控AKT/mTORC1/FASN和Erk信号通路延缓肝细胞癌发展的作用机制研究254A所示，与正常组相比，AKT/c-Met模型组肝脏组织内PCNA和Ki67蛋白表达水平明显升高；而蛇床子素干预后，AKT/c-Met-Ost-L和AKT/c-Met-Ost-H组与模型组相比，小鼠肝脏组织内上述两种增殖标记物表达水平明显降低且AKT/c-Met-Ost-H降低更明显。同时我们还用WB检测了PCNA如图4A、B、C所示，PCNA蛋白WB检测结果与免疫组化检测结果一致。为了研究蛇床子素抑制HCC增殖可能的机制，我们用WB检测了增殖相关蛋Erk的活化情况。从图4B、C可知，各组小鼠肝脏组织中总Erk表达量不变。与WT组相比，模型组p-Erk1/2表达量显著增加（P<0.001），Erk被激活；与模型组相比，蛇床子素干预后小鼠肝脏组织p-Erk1/2蛋白表达量显著降低（P<0.05），Erk活性受到抑制；AKT/c-Met-Ost-H比AKT/c-Met-Ost-L抑制效果更显著。注：##P<0.01,###P<0.001vsWT;*P<0.05,**P<0.01vsAKT/c-Met图4蛇床子素抑制AKT/c-Met诱导小鼠肝脏肿瘤增殖和Erk磷酸化
【参考文献】：
期刊论文
[1]Hepatic steatosis:A benign disease or a silent killer[J]. Abdel-Rahman,El-Zayadi. World Journal of Gastroenterology. 2008(26)
本文编号：3212295
【文章来源】：湖北中医药大学湖北省
【文章页数】：76 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
蛇床子素延缓AKT/c-Met诱导小鼠肝细胞癌的发生（±,=5）
蛇床子素调控AKT/mTORC1/FASN和Erk信号通路延缓肝细胞癌发展的作用机制研究17几乎不见胞浆；AKT/c-Met-Ost-L和AKT/c-Met-Ost-H小鼠肝脏组织病变减轻，细胞结构较清晰，空泡变性减少，细胞核变孝多核细胞明显减少，肝细胞内充满少量胞浆；且AKT/c-Met-Ost-H组改善更为明显，肿瘤病变区域外可见正常组织区域。图2蛇床子素改善AKT/c-Met诱导小鼠肝组织病理学变化（比例尺=100μm）Fig2OstholeimprovesthepathologicalchangesoflivertissueinAKT/c-Met-inducedmice.(scalebar=100μm)3.3蛇床子素对AKT/c-Met诱导HCC小鼠肝脏组织和血液中肿瘤标记物的影响AFP和GPC3是HCC临床上最常用的的诊断和预后标志物。我们采用Elisa检测了各组小鼠血清中AFP蛋白的表达情况，结果如图3所示。与WT组相比，AKT/c-Met模型组AFP蛋白表达量明显升高（P<0.001）；经蛇床子素干预后AKT/c-Met诱导的小鼠血清中AFP表达量减少（P<0.05）且AKT/c-Met-Ost-H组减少更为明显（P<0.01）。接下来我们用qRT-PCR检测了肝脏组织中AFP和GPC3mRNA的表达水平。结果如图3B、C所示。与WT组相比，AKT/c-Met模型组和GPC3的mRNA表达量明显升高（P<0.05）；经蛇床子素干预后AKT/c-Met诱导的小鼠肝脏组织中AFP和GPC3的mRNA表达量明显减少
蛇床子素调控AKT/mTORC1/FASN和Erk信号通路延缓肝细胞癌发展的作用机制研究254A所示，与正常组相比，AKT/c-Met模型组肝脏组织内PCNA和Ki67蛋白表达水平明显升高；而蛇床子素干预后，AKT/c-Met-Ost-L和AKT/c-Met-Ost-H组与模型组相比，小鼠肝脏组织内上述两种增殖标记物表达水平明显降低且AKT/c-Met-Ost-H降低更明显。同时我们还用WB检测了PCNA如图4A、B、C所示，PCNA蛋白WB检测结果与免疫组化检测结果一致。为了研究蛇床子素抑制HCC增殖可能的机制，我们用WB检测了增殖相关蛋Erk的活化情况。从图4B、C可知，各组小鼠肝脏组织中总Erk表达量不变。与WT组相比，模型组p-Erk1/2表达量显著增加（P<0.001），Erk被激活；与模型组相比，蛇床子素干预后小鼠肝脏组织p-Erk1/2蛋白表达量显著降低（P<0.05），Erk活性受到抑制；AKT/c-Met-Ost-H比AKT/c-Met-Ost-L抑制效果更显著。注：##P<0.01,###P<0.001vsWT;*P<0.05,**P<0.01vsAKT/c-Met图4蛇床子素抑制AKT/c-Met诱导小鼠肝脏肿瘤增殖和Erk磷酸化
【参考文献】：
期刊论文
[1]Hepatic steatosis:A benign disease or a silent killer[J]. Abdel-Rahman,El-Zayadi. World Journal of Gastroenterology. 2008(26)
本文编号：3212295
本文链接：https://www.wllwen.com/shoufeilunwen/mpalunwen/3212295.html
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