创面愈合瘢痕塑型期微环境对hUC-MSCs-Exos生物学效应的影响研究

发布时间：2021-06-13 17:20

　　目的:探讨人脐带间充质干细胞（Human umbilical cord mesenchymal stromal cells,hUC-MSCs）经小鼠瘢痕皮肤组织匀浆刺激后分泌的外泌体是否对创面愈合过程的效应细胞成纤维细胞具有生物学效应并调节瘢痕重塑过程。方法:（1）瘢痕塑型期微环境刺激的人脐带间充质干细胞外泌体的提取及鉴定:取创面上皮化完成的小鼠瘢痕组织,运用物理研磨及高速离心获得瘢痕组织匀浆（Scar tissue homogenate,STH）。STH刺激人脐带间充质干细胞（Human umbilical cord mesenchymal stromal cells,hUC-MSCs）,利用Total Exosome Isolation试剂盒分离提取瘢痕组织匀浆刺激的人脐带间充质干细胞外泌体（STH-hUC-MSCsExos）,经Western-blot、Nanosight、电镜分析技术鉴定。（2）STH-hUC-MSCsExos对皮肤成纤维细胞增殖、迁移及分泌创面愈合相关因子能力的影响:瘢痕组织匀浆分别设立高（100ug/m L）、中（50ug/m L）、低（30ug/m L）浓... 

【文章来源】：遵义医科大学贵州省

【文章页数】：68 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

hUC-MSCs的形态学观察（×40）

遵义医科大学硕士学位论文王旗22求（图3）。电镜结果显示Tra-Exos形态清晰呈典型的杯口状，具有双层膜结构（图4A）；30000倍视野下形态更清晰（图4B）；STH-hUC-MSCs-Exos可见典型的双层膜状外泌体，但含有较多杂蛋白，视野不清晰（图4C），在30000倍视图下可见外泌体轮廓（图4D）。图2蛋白印迹检测各组外泌体特殊标记蛋白表达情况图3NTA检测Tra-Exos、STH-hUC-MSCs-Exos粒径大小图4电镜检测Tra-Exos、STH-hUC-MSCs-Exos形态注：4A、4BTra-Exos的形态；4C、4DSTH-hUC-MSCs-Exos的形态

遵义医科大学硕士学位论文王旗22求（图3）。电镜结果显示Tra-Exos形态清晰呈典型的杯口状，具有双层膜结构（图4A）；30000倍视野下形态更清晰（图4B）；STH-hUC-MSCs-Exos可见典型的双层膜状外泌体，但含有较多杂蛋白，视野不清晰（图4C），在30000倍视图下可见外泌体轮廓（图4D）。图2蛋白印迹检测各组外泌体特殊标记蛋白表达情况图3NTA检测Tra-Exos、STH-hUC-MSCs-Exos粒径大小图4电镜检测Tra-Exos、STH-hUC-MSCs-Exos形态注：4A、4BTra-Exos的形态；4C、4DSTH-hUC-MSCs-Exos的形态

【参考文献】：
期刊论文
[1]Role of inflammatory response in liver diseases: Therapeutic strategies[J]. José A Del Campo,Paloma Gallego,Lourdes Grande.  World Journal of Hepatology. 2018(01)
[2]Can a fibrotic liver afford epithelial-mesenchymal transition?[J]. Stefan Munker,Yong-Le Wu,Hui-Guo Ding,Roman Liebe,Hong-Lei Weng.  World Journal of Gastroenterology. 2017(26)



本文编号：3227969