白念珠菌CaCDC50基因的功能研究
发布时间：2021-07-10 07:24
白念珠菌是人类最常见的条件性真菌病原体,也是人类临床医学中最常见的条件致病真菌。翻转酶又称磷脂转位蛋白,该酶转运磷脂酰丝氨酸（PS）和磷脂酰乙醇胺（PE）从细胞膜系统的一侧转移到另一侧,该酶在酿酒酵母膜系统中起着维持磷脂不对称分布的作用并参与酿酒酵母囊泡介导的运输。Cdc50是翻转酶的一个非催化亚基,在酿酒酵母中ScCDC50对其生命活动有着重要的影响。本论文通过生物信息学方法在白念珠菌基因组数据库中鉴定了白念珠菌中含有与ScCDC50具有序列相似性的基因CaCDC50,目前对CaCDC50的功能尚不清楚。本论文采用同源重组原理进行基因敲除,构建白念珠菌CaCDC50纯合子突变株,通过药物压力表型试验、细胞壁成分测定试验、荧光染色试验和毒力试验等方法研究了CaCDC50的缺失对白念珠菌的抗真菌药物敏感性、阳离子耐受性、细胞壁完整性、液泡形态、菌丝发育和毒力等方面的影响,从而研究CaCDC50的功能。本论文得出以下研究结果:1、CaCDC50回补了酿酒酵母ScCDC50缺失株的表型;2、缺失CaCDC50后导致白念珠菌对唑类、特比萘芬（Teb）和卡泊芬净（CSF）等抗真菌药物及十二烷基磺...
【文章来源】：淮北师范大学安徽省
【文章页数】：57 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
白念珠菌的三种细胞形态[15]
白念珠菌CaCDC50基因的功能研究41.4白念珠菌细胞壁1.4.1细胞壁结构与组分白念珠菌细胞与环境或宿主之间首先接触的结构是细胞壁，它与病原体的附着密切相关并携带大量重要的抗原因子，对白念珠菌的致病性发挥重要的作用[36]。白念珠菌细胞壁的组分中糖类占90%，蛋白占10%，还含有少量的脂类[36]。白念珠菌细胞壁结构如图1-2所示，其中糖类主要有三种成分[37]：包括占细胞壁糖类40%的甘露聚糖，占细胞壁糖类60%的β-葡聚糖（包括β-1,3葡聚糖和β-1,6葡聚糖两种类型）和占细胞壁糖类3%的几丁质。细胞壁是一种具有外层和内层的层状结构。内层主要由几丁质和β-葡聚糖聚合物组成，能够起到细胞骨架作用。外层由高度糖基化的甘露聚糖蛋白组成，它在细胞与宿主表面识别、黏附中起着重要作用[38]。图1-2白念珠菌细胞壁的结构及其在免疫激活中的作用[37]Figure1-2TransmissionelectronmicrographoftheC.albicanscellwallandacartoonshowingthearrangementofthemajorcomponentsandtheroleofthosecomponentsinimmuneactivationandsuppression[37]1.4.2细胞壁完整性途径（CWI）准确快速的感受外界环境变化和刺激并做出适当的应答是生物体活细胞的基本特征之一。MAPK信号转导途径是细胞对外界环境和其他刺激做出适当应答的重要信号转导途径，在真核生物细胞中中高度保守[39]。在白念珠菌细胞中目前发现至少存在三个MAPK级联系统，他们分别由Mkc1、Hog1和Cek1/2三种MAPK蛋白激酶控制，分别调控细胞壁完整性（Cellwallintegrity,CWI）、高渗透压甘油形成（Highosmolarityglycerol,HOG）、菌丝生长和细胞交配（mating）等过程[40]。
白念珠菌CaCDC50基因的功能研究5当白念珠菌的细胞壁受到压力或产生缺陷时，就会激活细胞的细胞壁完整性途径（CWI）[41]。Mkc1和Cek1是细胞壁完整性途径下游的两个蛋白激酶，其中Mkc1介导细胞壁完整性途径在白念珠菌应答细胞壁缺陷和胁迫时被激活[42-46]，而Cek1参与白念珠菌菌丝侵入性生长、细胞壁的重构和毒力的维持等方面[47-48]。因此由Mkc1和Cek1介导的细胞壁完整性途径（CWI）对白念珠菌应答细胞壁缺陷和胁迫等方面起重要的作用（图1-3）[41,49]。图1-3有丝分裂原蛋白激酶信号转导途径在细胞壁压力应答中的作用[49]Figure1-3MAPKpathwaysinC.albicansandtheirrolesincellwallformation[49]1.5CDC50在新生隐球菌和酿酒酵母中的研究翻转酶(P4-ATP酶)又称磷脂转位蛋白，是一类大家族的磷脂转运酶(Flippases)。P4-ATP酶参与新生隐球菌的毒力因子输出过程已经得到了很好的研究[50-52]。该酶转运磷脂酰丝氨酸（PS）和磷脂酰乙醇胺（PE）从细胞膜系统一侧转移到另一侧，与生物膜磷脂不对称的产生密切相关[53]。此外，各种模型系统的研究表明P4-ATP酶在生物膜形成过程中起着多种重要的作用，除了它们在建立和维持质膜不对称方面的作用外，P4-ATP酶还与囊泡介导的蛋白在外细胞和内源性途径中的转运有关[54]。Cdc50是翻转酶的一个非催化亚基，已有研究表明该酶在新生隐球菌膜系统中维持磷脂不对称分布，并在囊泡介导的转运
【参考文献】：
博士论文
[1]白念珠菌质膜蛋白CaRch1对细胞质内钙离子稳态和耐药调控功能的机理研究[D]. 徐大勇.江南大学 2016
本文编号：3275469
【文章来源】：淮北师范大学安徽省
【文章页数】：57 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
白念珠菌的三种细胞形态[15]
白念珠菌CaCDC50基因的功能研究41.4白念珠菌细胞壁1.4.1细胞壁结构与组分白念珠菌细胞与环境或宿主之间首先接触的结构是细胞壁，它与病原体的附着密切相关并携带大量重要的抗原因子，对白念珠菌的致病性发挥重要的作用[36]。白念珠菌细胞壁的组分中糖类占90%，蛋白占10%，还含有少量的脂类[36]。白念珠菌细胞壁结构如图1-2所示，其中糖类主要有三种成分[37]：包括占细胞壁糖类40%的甘露聚糖，占细胞壁糖类60%的β-葡聚糖（包括β-1,3葡聚糖和β-1,6葡聚糖两种类型）和占细胞壁糖类3%的几丁质。细胞壁是一种具有外层和内层的层状结构。内层主要由几丁质和β-葡聚糖聚合物组成，能够起到细胞骨架作用。外层由高度糖基化的甘露聚糖蛋白组成，它在细胞与宿主表面识别、黏附中起着重要作用[38]。图1-2白念珠菌细胞壁的结构及其在免疫激活中的作用[37]Figure1-2TransmissionelectronmicrographoftheC.albicanscellwallandacartoonshowingthearrangementofthemajorcomponentsandtheroleofthosecomponentsinimmuneactivationandsuppression[37]1.4.2细胞壁完整性途径（CWI）准确快速的感受外界环境变化和刺激并做出适当的应答是生物体活细胞的基本特征之一。MAPK信号转导途径是细胞对外界环境和其他刺激做出适当应答的重要信号转导途径，在真核生物细胞中中高度保守[39]。在白念珠菌细胞中目前发现至少存在三个MAPK级联系统，他们分别由Mkc1、Hog1和Cek1/2三种MAPK蛋白激酶控制，分别调控细胞壁完整性（Cellwallintegrity,CWI）、高渗透压甘油形成（Highosmolarityglycerol,HOG）、菌丝生长和细胞交配（mating）等过程[40]。
白念珠菌CaCDC50基因的功能研究5当白念珠菌的细胞壁受到压力或产生缺陷时，就会激活细胞的细胞壁完整性途径（CWI）[41]。Mkc1和Cek1是细胞壁完整性途径下游的两个蛋白激酶，其中Mkc1介导细胞壁完整性途径在白念珠菌应答细胞壁缺陷和胁迫时被激活[42-46]，而Cek1参与白念珠菌菌丝侵入性生长、细胞壁的重构和毒力的维持等方面[47-48]。因此由Mkc1和Cek1介导的细胞壁完整性途径（CWI）对白念珠菌应答细胞壁缺陷和胁迫等方面起重要的作用（图1-3）[41,49]。图1-3有丝分裂原蛋白激酶信号转导途径在细胞壁压力应答中的作用[49]Figure1-3MAPKpathwaysinC.albicansandtheirrolesincellwallformation[49]1.5CDC50在新生隐球菌和酿酒酵母中的研究翻转酶(P4-ATP酶)又称磷脂转位蛋白，是一类大家族的磷脂转运酶(Flippases)。P4-ATP酶参与新生隐球菌的毒力因子输出过程已经得到了很好的研究[50-52]。该酶转运磷脂酰丝氨酸（PS）和磷脂酰乙醇胺（PE）从细胞膜系统一侧转移到另一侧，与生物膜磷脂不对称的产生密切相关[53]。此外，各种模型系统的研究表明P4-ATP酶在生物膜形成过程中起着多种重要的作用，除了它们在建立和维持质膜不对称方面的作用外，P4-ATP酶还与囊泡介导的蛋白在外细胞和内源性途径中的转运有关[54]。Cdc50是翻转酶的一个非催化亚基，已有研究表明该酶在新生隐球菌膜系统中维持磷脂不对称分布，并在囊泡介导的转运
【参考文献】：
博士论文
[1]白念珠菌质膜蛋白CaRch1对细胞质内钙离子稳态和耐药调控功能的机理研究[D]. 徐大勇.江南大学 2016
本文编号：3275469
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