CXCR1/2拮抗剂G31P对糖尿病肾病小鼠肾损伤的作用研究
发布时间：2021-08-03 03:42
目的:糖尿病肾病（DN）是由糖尿病（DM）患者高血糖引发的一种微血管病变,是DM最严重的并发症之一。随着对DN研究的不断深入,人们发现炎症在DN的发生和发展中起着至关重要的作用。CXCL8与其趋化因子受体（CXCR1/2）结合,招募中性粒细胞浸润,进而引发炎症反应。CXCL8（3-72）K11R/G31P（以下简称G31P）,作为CXCR1/2受体拮抗剂,可与CXCL8竞争性结合CXCR1/2受体,从而抑制CXCL8的生物学活性,发挥其抗炎作用。本实验通过建立DM小鼠模型,来探讨G31P对DN肾损伤的抑制作用。方法:1体内实验1.1建立DM小鼠模型并分组:实验选取6周龄的C57BL/6J雄性小鼠,通过高脂饮食（HFD）联合链脲佐菌素（STZ）腹腔注射的方法,建立DM小鼠模型。根据研究内容将实验分成以下四组:正常对照组（以下简称Cntl组）、Cntl+G31P组、DM组和DM+G31P组。其中,Cntl+G31P组和DM+G31P组给予小鼠皮下注射G31P,剂量为0.5 mg/kg,两天一次,而Cntl组和DM组注射相同体积的生理盐水,治疗周期为1个月。1.2动物组织样本采集:治疗期间,...
【文章来源】：大连医科大学辽宁省
【文章页数】：63 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
中文摘要
英文摘要
（一）前言
（二）材料和方法
1.实验材料
1.1 主要试剂和材料
1.2 试验仪器和设备
1.3 细胞株
1.4 动物
1.5 其它材料和试剂
2.实验方法
2.1 体内实验
2.1.1 建立DM小鼠模型并分组
2.1.2 动物组织样本采集
2.1.3 肾脏组织病理学检测
2.1.4 免疫组织化学染色
2.1.5 肾脏超微结构检测
2.1.6 血肌酐和尿素氮检测
2.1.7 酶联免疫吸附实验
2.1.8 Real-time PCR
2.1.9 Western blotting
2.2 体外实验
2.2.1 细胞培养
2.2.2 CCK-8 实验
2.2.3 Real-time PCR
2.2.4 Western blotting
3.统计学分析
（三）结果
1.体内实验
1.1 G31P对DM小鼠肾脏具有保护作用
1.1.1 G31P改善DM引起的肾脏肥大
1.1.2 G31P减少DM小鼠的饮水量和尿量
1.1.3 G31P降低DM小鼠BUN、Ccr和UACR的水平
1.1.4 G31P改善DM小鼠肾脏组织病理结构异常
1.1.5 G31P上调DM小鼠Nephrin和Podocin表达水平
1.2 G31P抑制DM小鼠肾脏组织炎症反应
1.2.1 G31P降低DM小鼠炎症相关因子的表达
1.2.2 G31P降低DM小鼠肾脏组织NF-κB的表达
1.2.3 G31P抑制肾脏组织中性粒细胞和巨噬细胞的浸润
1.2.4 G31P抑制DM小鼠CXCL8、CXCR1和CXCR2的表达
1.2.5 G31P抑制ERK1/2 和JAK2/STAT3信号通路的激活
1.3 G31P改善DM小鼠肾脏组织的纤维化
1.3.1 G31P减少DM小鼠肾脏组织内糖原的表达
1.3.2 G31P减少DM小鼠肾脏组织中胶原的沉积
1.3.3 G31P降低DM小鼠肾脏组织胶原IV的表达
1.3.4 G31P降低DM小鼠TGF-β 和CTGF的表达
2.体外实验
2.1 适当剂量的G31P对HRMCs无细胞毒性
2.2 G31P抑制高糖诱导的系膜细胞促炎因子的表达
2.3 G31P抑制高糖诱导的系膜细胞TGF-β 和CTGF的表达
2.4 G31P抑制ERK1/2 和JAK2/STAT3信号通路的激活
（四）讨论
（五）结论
（六）参考文献
综述
参考文献
致谢
本文编号：3318854
【文章来源】：大连医科大学辽宁省
【文章页数】：63 页
【学位级别】：硕士
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中文摘要
英文摘要
（一）前言
（二）材料和方法
1.实验材料
1.1 主要试剂和材料
1.2 试验仪器和设备
1.3 细胞株
1.4 动物
1.5 其它材料和试剂
2.实验方法
2.1 体内实验
2.1.1 建立DM小鼠模型并分组
2.1.2 动物组织样本采集
2.1.3 肾脏组织病理学检测
2.1.4 免疫组织化学染色
2.1.5 肾脏超微结构检测
2.1.6 血肌酐和尿素氮检测
2.1.7 酶联免疫吸附实验
2.1.8 Real-time PCR
2.1.9 Western blotting
2.2 体外实验
2.2.1 细胞培养
2.2.2 CCK-8 实验
2.2.3 Real-time PCR
2.2.4 Western blotting
3.统计学分析
（三）结果
1.体内实验
1.1 G31P对DM小鼠肾脏具有保护作用
1.1.1 G31P改善DM引起的肾脏肥大
1.1.2 G31P减少DM小鼠的饮水量和尿量
1.1.3 G31P降低DM小鼠BUN、Ccr和UACR的水平
1.1.4 G31P改善DM小鼠肾脏组织病理结构异常
1.1.5 G31P上调DM小鼠Nephrin和Podocin表达水平
1.2 G31P抑制DM小鼠肾脏组织炎症反应
1.2.1 G31P降低DM小鼠炎症相关因子的表达
1.2.2 G31P降低DM小鼠肾脏组织NF-κB的表达
1.2.3 G31P抑制肾脏组织中性粒细胞和巨噬细胞的浸润
1.2.4 G31P抑制DM小鼠CXCL8、CXCR1和CXCR2的表达
1.2.5 G31P抑制ERK1/2 和JAK2/STAT3信号通路的激活
1.3 G31P改善DM小鼠肾脏组织的纤维化
1.3.1 G31P减少DM小鼠肾脏组织内糖原的表达
1.3.2 G31P减少DM小鼠肾脏组织中胶原的沉积
1.3.3 G31P降低DM小鼠肾脏组织胶原IV的表达
1.3.4 G31P降低DM小鼠TGF-β 和CTGF的表达
2.体外实验
2.1 适当剂量的G31P对HRMCs无细胞毒性
2.2 G31P抑制高糖诱导的系膜细胞促炎因子的表达
2.3 G31P抑制高糖诱导的系膜细胞TGF-β 和CTGF的表达
2.4 G31P抑制ERK1/2 和JAK2/STAT3信号通路的激活
（四）讨论
（五）结论
（六）参考文献
综述
参考文献
致谢
本文编号：3318854
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