水通道蛋白-5在不同机械通气时间致大鼠急性肺损伤中表达的研究
发布时间：2021-08-25 03:16
目的:1.建立不同机械通气时间致大鼠急性肺损伤（Acute Lung Injury,ALI）模型,观察肺组织水肿及损伤程度。2.评估水通道蛋白-5（Aquaporin-5,AQP5）在各组肺组织中的表达,分析水通道蛋白-5与肺系数之间的关系,探讨AQP5在机械通气致大鼠ALI中的作用。3.探讨ALI中释放的炎症因子TNF-a、IL-6对AQP5的表达是否有影响。方法:将30只SD大鼠,按照机械通气时间（hour Mechanical Ventilation,h MV）不同完全随机分为5组,即对照组、0.5h MV组、1h MV组、1.5h MV组和2h MV组,每组6只。观察指标:通过肺组织大体标本图、肺系数、HE染色,以观察肺组织水肿及损伤程度;通过免疫组化,采用病理切片染色评分法,以评估各组肺组织中AQP5表达量;采用Spearman相关性分析法分析AQP5表达量与肺系数之间的关系;采用RT-PCR法分别检测肺组织中TNF-am RNA、IL-6m RNA的表达。结果:随着机械通气时间延长,肺组织水肿及损伤逐渐加重;肺组织中TNF-a m RNA、IL-6 m RNA的表达均增加,...
【文章来源】：山西医科大学山西省
【文章页数】：38 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
各组大鼠肺组织大体标本注：图a大鼠肺组织，体积正常，表面光滑，色泽粉嫩，质软；与图a比较，图b大鼠肺组织，
山西医科大学硕士学位论文8注：a表示与对照组相比P<0.01,b表示与0.5hMV组相比P<0.01,c表示与1hMV组相比P<0.01,d表示与1.5hMV组相比P<0.01。2.3肺组织病理切片HE染色如图2所示，图a肺泡腔大小正常，形态规整，肺泡壁完整、无炎性细胞浸润，肺间质无水肿；与图a比较，图b～图e中箭头所指可见不同程度肺泡壁破裂、肺大泡形成，肺泡腔内有红细胞及粉红色水肿液渗出，肺间质水肿、炎性细胞浸润，形成典型ALI病理形态学特征，表明机械通气致大鼠ALI建模成功。对照组0.5hMV组1hMV组1.5hMV组2hMV组图2各组大鼠肺组织切片HE染色（光镜×100）注：图a中肺组织，肺泡腔大小正常，形态规整，肺泡壁完整、无炎性细胞浸润，肺间质无水肿；与图a比较，图b中肺泡腔形态较规整，有少量肺大泡形成，腔内有少量红细胞及粉红色水肿液渗出，肺泡壁较完整，少量炎性细胞浸润，肺间质稍水肿；图c中肺泡腔破裂融合形成肺大泡，腔内红细胞及粉红色水肿液渗出，部分肺泡壁塌陷，大量炎性细胞浸润，肺间质明显水肿；图d中大量肺大泡形成，腔内较多红细胞及粉红色水肿液渗出，肺泡壁破裂、塌陷，大量炎性细胞浸润，肺间质明显水肿；图e中肺泡腔结构破坏严重，腔内大量红细胞及粉红色水肿液渗出，肺泡壁断裂，肺间质明显水肿及炎性细胞浸润。2.4肺组织病理切片免疫组化染色如图3所示，图a中AQP5染色均匀一致、呈棕褐色；与图a比较，图b～图e图中箭头所指可见AQP5出现染色不均匀，染色呈现棕黄色、浅黄色，表达量逐渐减少甚至无。表明随着机械通气对肺组织中AQP5表达量减少有显著影响。
山西医科大学硕士学位论文9对照组0.5hMV组1hMV组1.5hMV组2hMV组图3各组大鼠肺组织大体标本（光镜×100）注：图a肺组织中，AQP5染色均匀一致、呈棕褐色；与图a比较，图b肺组织中AQP5染色不均匀，部分呈棕黄色，表达量未见明显减少；图c肺组织中AQP5染色呈浅黄色，表达量减少；图d肺组织中AQP5染色呈浅黄色，表达量明显减少；图e肺组织中AQP5染色呈浅黄色或无色，表达量极少甚至无。2.5肺组织病理切片免疫组化AQP5染色评分如表2所示，对照组肺组织染色强度评分和阳性细胞占比评分分别为2.8+0.11、3.8+0.13。与对照组相比，随着机械通气时间延长，各组评分均降低，且组间比较，P<0.01，差异有统计学意义。1hMV组和1.5hMV组染色强度评分为1.4+0.26、1.3+0.18，阳性细胞占比评分2.4+0.16、2.2+0.19，各自进行组间比较，P>0.05，差异无统计学意义。表明机械通气对肺组织中AQP5表达减少有影响。表2各组肺组织免疫组化AQP5染色评分比较(分，sx)分组对照组0.5hMV组1hMV组1.5hMV组2hMV组例数66666染色强度评分2.8+0.112.5+0.13a1.4+0.26ab1.3+0.18ab0.4+0.22abcd阳性细胞占比评分3.8+0.133.6+0.18a2.4+0.16ab2.2+0.19ab0.7+0.27abcd注：a表示与对照组相比P<0.01,b表示与0.5hMV组相比P<0.01,c表示与1hMV组相比P<0.01,d表示与1.5hMV组相比P<0.01。2.6肺系数与免疫组化染色评分相关性分析肺系数与AQP5染色强度评分之间相关性分析结果显示，r=-0.925，P<0.01，表示两者之间显著负相关；肺系数与AQP5染色阳性细胞占比评分之间相关性分析结果显示，r=-0.951，P<0.01，表示两者之间呈显著负相关。
本文编号：3361280
【文章来源】：山西医科大学山西省
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【学位级别】：硕士
【部分图文】：
各组大鼠肺组织大体标本注：图a大鼠肺组织，体积正常，表面光滑，色泽粉嫩，质软；与图a比较，图b大鼠肺组织，
山西医科大学硕士学位论文8注：a表示与对照组相比P<0.01,b表示与0.5hMV组相比P<0.01,c表示与1hMV组相比P<0.01,d表示与1.5hMV组相比P<0.01。2.3肺组织病理切片HE染色如图2所示，图a肺泡腔大小正常，形态规整，肺泡壁完整、无炎性细胞浸润，肺间质无水肿；与图a比较，图b～图e中箭头所指可见不同程度肺泡壁破裂、肺大泡形成，肺泡腔内有红细胞及粉红色水肿液渗出，肺间质水肿、炎性细胞浸润，形成典型ALI病理形态学特征，表明机械通气致大鼠ALI建模成功。对照组0.5hMV组1hMV组1.5hMV组2hMV组图2各组大鼠肺组织切片HE染色（光镜×100）注：图a中肺组织，肺泡腔大小正常，形态规整，肺泡壁完整、无炎性细胞浸润，肺间质无水肿；与图a比较，图b中肺泡腔形态较规整，有少量肺大泡形成，腔内有少量红细胞及粉红色水肿液渗出，肺泡壁较完整，少量炎性细胞浸润，肺间质稍水肿；图c中肺泡腔破裂融合形成肺大泡，腔内红细胞及粉红色水肿液渗出，部分肺泡壁塌陷，大量炎性细胞浸润，肺间质明显水肿；图d中大量肺大泡形成，腔内较多红细胞及粉红色水肿液渗出，肺泡壁破裂、塌陷，大量炎性细胞浸润，肺间质明显水肿；图e中肺泡腔结构破坏严重，腔内大量红细胞及粉红色水肿液渗出，肺泡壁断裂，肺间质明显水肿及炎性细胞浸润。2.4肺组织病理切片免疫组化染色如图3所示，图a中AQP5染色均匀一致、呈棕褐色；与图a比较，图b～图e图中箭头所指可见AQP5出现染色不均匀，染色呈现棕黄色、浅黄色，表达量逐渐减少甚至无。表明随着机械通气对肺组织中AQP5表达量减少有显著影响。
山西医科大学硕士学位论文9对照组0.5hMV组1hMV组1.5hMV组2hMV组图3各组大鼠肺组织大体标本（光镜×100）注：图a肺组织中，AQP5染色均匀一致、呈棕褐色；与图a比较，图b肺组织中AQP5染色不均匀，部分呈棕黄色，表达量未见明显减少；图c肺组织中AQP5染色呈浅黄色，表达量减少；图d肺组织中AQP5染色呈浅黄色，表达量明显减少；图e肺组织中AQP5染色呈浅黄色或无色，表达量极少甚至无。2.5肺组织病理切片免疫组化AQP5染色评分如表2所示，对照组肺组织染色强度评分和阳性细胞占比评分分别为2.8+0.11、3.8+0.13。与对照组相比，随着机械通气时间延长，各组评分均降低，且组间比较，P<0.01，差异有统计学意义。1hMV组和1.5hMV组染色强度评分为1.4+0.26、1.3+0.18，阳性细胞占比评分2.4+0.16、2.2+0.19，各自进行组间比较，P>0.05，差异无统计学意义。表明机械通气对肺组织中AQP5表达减少有影响。表2各组肺组织免疫组化AQP5染色评分比较(分，sx)分组对照组0.5hMV组1hMV组1.5hMV组2hMV组例数66666染色强度评分2.8+0.112.5+0.13a1.4+0.26ab1.3+0.18ab0.4+0.22abcd阳性细胞占比评分3.8+0.133.6+0.18a2.4+0.16ab2.2+0.19ab0.7+0.27abcd注：a表示与对照组相比P<0.01,b表示与0.5hMV组相比P<0.01,c表示与1hMV组相比P<0.01,d表示与1.5hMV组相比P<0.01。2.6肺系数与免疫组化染色评分相关性分析肺系数与AQP5染色强度评分之间相关性分析结果显示，r=-0.925，P<0.01，表示两者之间显著负相关；肺系数与AQP5染色阳性细胞占比评分之间相关性分析结果显示，r=-0.951，P<0.01，表示两者之间呈显著负相关。
本文编号：3361280
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