MiR-200b在大鼠角膜新生血管形成中的作用及其机制研究

发布时间：2021-09-03 13:10

　　目的研究microRNA-200b（miR-200b）在大鼠角膜新生血管（corneal neovascularization,CNV）形成过程中的作用,初步探讨相关机制。方法1.选取40只雌性SD大鼠,采用缝线法构建单眼CNV动物模型（实验组）,另一眼不做处理（正常组）,造模后第4、7、14、21天于裂隙灯下观察角膜新生血管生长情况,RT-PCR（Real-time Quantitative Polymerase Chain Reaction）检测造模后不同时间点各组大鼠角膜组织中miR-200b以及VEGF mRNA的表达。HE染色（Hematoxylin-eosin staining）观察角膜组织的结构及炎症细胞的浸润。2.将miR-200b模拟物（miR-200b mimic）、miR-200b抑制物（miR-200b inhibitor）及其各自的阴性对照（Scramble）利用脂质体技术转染人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells,HUVECs）,RT-PCR验证转染效率。3.分别运用CCK-8、划痕实验、transwe... 

【文章来源】：重庆医科大学重庆市

【文章页数】：40 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

缝线法构建大鼠CNV模型

重庆医科大学硕士研究生学位论文172.2RT-PCR检测MiR-200b及VEGF的表达取正常和缝线后第4、7、14、21天角膜组织行RT-PCR检测miR-200b/VEGF的表达，结果显示缝线后第4、7、14、21天角膜组织中miR-200b表达降低，而VEGF表达升高，差异有统计学意义(P<0.01，）（图2）。图2RT-PCR检测缝线后各时间点miR-200b及VEGFmRNA的表达Figure2TheexpressionofmiR-200bandVEGFmRNAwasdetectedbyRT-PCRatvarioustimepointsaftersuture*P<0.05，**P<0.01，***P<0.0012.3HE染色检测角膜组织形态学及炎性细胞浸润情况HE染色结果显示，正常对照组（0天）角膜组织排列整齐，无炎性细胞浸润，造模后第4、7、14、21天可见角膜组织排列紊乱，不规则。炎症细胞浸润个数在造模后第4天(123.0±14.491)、7天(170.75±29.056)、14天(223.5±26.147)、21天（76.67±11.72），与正常组相比差异存在统计学意义（P<0.05，图3）。图3HE染色检测角膜组织形态学及炎性细胞浸润情况Figure3HEstainingdetectcornealmorphologyandinflammatorycellinfiltration

重庆医科大学硕士研究生学位论文172.2RT-PCR检测MiR-200b及VEGF的表达取正常和缝线后第4、7、14、21天角膜组织行RT-PCR检测miR-200b/VEGF的表达，结果显示缝线后第4、7、14、21天角膜组织中miR-200b表达降低，而VEGF表达升高，差异有统计学意义(P<0.01，）（图2）。图2RT-PCR检测缝线后各时间点miR-200b及VEGFmRNA的表达Figure2TheexpressionofmiR-200bandVEGFmRNAwasdetectedbyRT-PCRatvarioustimepointsaftersuture*P<0.05，**P<0.01，***P<0.0012.3HE染色检测角膜组织形态学及炎性细胞浸润情况HE染色结果显示，正常对照组（0天）角膜组织排列整齐，无炎性细胞浸润，造模后第4、7、14、21天可见角膜组织排列紊乱，不规则。炎症细胞浸润个数在造模后第4天(123.0±14.491)、7天(170.75±29.056)、14天(223.5±26.147)、21天（76.67±11.72），与正常组相比差异存在统计学意义（P<0.05，图3）。图3HE染色检测角膜组织形态学及炎性细胞浸润情况Figure3HEstainingdetectcornealmorphologyandinflammatorycellinfiltration

【参考文献】：
期刊论文
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博士论文
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本文编号：3381171