ART1通过调节gp130对IL-6诱导大肠癌细胞增殖影响及机制研究

发布时间：2021-09-15 09:44

　　研究背景及目的:大肠癌（colorectal cancer,CRC）是世界第四大常见肿瘤,致死率世界排名第二,在我国也是第四大常见肿瘤。由于发生发展过程涉及诸多因素,CRC的预防和治疗一直难以有突破性进展。估计未来10年CRC的全球负荷将增加60%。慢性炎症是现今公认的CRC的一种危险因素,它会诱发癌变并促进CRC的发生和发展。在诸多促癌的炎症因子中,IL-6起着核心作用。然而临床上抗IL-6的单抗对CRC却没有明显的效果,因此,探讨CRC中IL-6诱导大肠癌细胞增殖的相关调节因素,有利于筛选新的治疗靶点。精氨酸特异性单ADP核糖基化酶1（ART1）是炎症因子的正向调节因子,在肺泡II型上皮细胞中抑制ART1可以减少IL-6的释放。而我们之前的研究表明,ART1与CRC的多种生物学行为存在密切关系,更重要的是ART1敲低后可以减少IL-6信号通路的信号转导分子gp130启动子的磷酸化水平。然而,ART1对IL-6诱导的大肠癌肿瘤细胞生长影响及机制尚未见报道。因此,本课题拟探讨ART1是否能通过gp130对IL-6诱导大肠癌CT26细胞增殖产生影响及可能存在的机制,为CRC治疗找寻潜在的... 

【文章来源】：重庆医科大学重庆市

【文章页数】：70 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

ART1与gp130在CRC肿瘤和切缘组织中的表达（×200）

重庆医科大学硕士研究生学位论文35图2.2IL-6诱导大肠癌CT26细胞不同时间后c-myc、CyclinD1和Bcl-xl蛋白水平（*P<0.05，**P<0.01）。Figure2.2Expressionofc-myc,CyclinD1andBcl-xlinCT26cellsafterinductionwithIL-6(25ng/ml)fordifferenttime(*P<0.05，**P<0.01).3.3ART1敲低对IL-6诱导大肠癌CT26细胞增殖的影响用0、5、10、20、50、100ng/mlIL-6处理大肠癌CT26细胞WT、NC和ART1-sh三组细胞，孵育时间为48小时。WT组和NC组细胞增殖活性随着IL-6浓度的增加而增加，在20ng/ml后增殖活力无明显增加，在50ng/ml达到最大促增殖效应。WT和NC两组细胞在IL-6诱导后增殖活力无明显差异。IL-6促进ART1-sh组增殖的效应明显低于其他两个对照组（P<0.05）（图2.3）。050100100120140160WT51020CART1-shN(ng/ml)*Cellviability%

重庆医科大学硕士研究生学位论文36图2.3IL-6（0、5、10、20、50、100ng/ml）孵育48小时后，大肠癌CT26细胞WT、NC和ART1-sh细胞的增殖活性（*P<0.05）。Figure2.3CellviabilityofCT26WT,NCandART1-shcellsafterincubationwithIL-6(5,10,20,50,100ng/ml)for48hours(*P<0.05).3.4ART1敲低对IL-6诱导大肠癌CT26细胞增殖相关蛋白影响3.4.1ART1敲低组ART1蛋白水平在三组大肠癌CT26细胞中，ART1敲低组ART1蛋白水平明显低于WT和NC组（P<0.05）（图2.4）。WTNCART1-sh0.00.51.01.5*RelativeexpressionlevelofART1/β-actin图2.4大肠癌CT26细胞WT、NC和ART1-sh组中ART1蛋白水平检测（*P<0.05）。Figure2.4TheproteinlevelofART1inCT26WT,NCandART1-shcells(*P<0.05).3.4.2增殖相关蛋白水平用25ng/mlIL-6处理三组大肠癌CT26细胞，24小时后提取细胞总蛋白进行检测。如图2.5所示，在WT组和NC组中，IL-6诱导后，c-myc、CyclinD1和Bcl-xl水平明显增高。ART1-sh组在IL-6诱导后，c-my、CyclinD1和Bcl-xl的水平明显低于WT和NC组，差异具有统计学意义（P<0.05）（图2.5）。

【参考文献】：
期刊论文
[1]Clinicopathological significance of overexpression of interleukin-6 in colorectal cancer[J]. Jun Zeng,Zhong-Hua Tang,Shuang Liu,Shan-Shan Guo.  World Journal of Gastroenterology. 2017(10)
[2]ART1基因沉默对小鼠结肠癌CT26细胞转移潜能的影响及作用机制的研究[J]. 宋光林,唐怡,王娅兰,徐剑侠,熊薇.  肿瘤. 2013(06)



本文编号：3395853