α7nACh受体调控对七氟烷麻醉后衰老模型大鼠海马及认知功能的影响
发布时间：2021-09-28 05:10
目的:本实验以D-半乳糖致衰老模型大鼠为研究对象,对比七氟烷吸入麻醉后衰老大鼠神经行为学、海马体积以及海马神经元细胞超微结构的改变,并进一步评价?7烟碱型乙酰胆碱受体（?7nAChR）激动剂及拮抗剂干预后的效应。旨在探索衰老大鼠七氟烷麻醉后,中枢?7nAChR调控对大鼠海马结构及认知功能改变的作用,从而为术后认知功能障碍（POCD）寻求更方便可靠的临床诊断依据。方法:本研究采用SPF级健康雄性4月龄SD大鼠72只,所有大鼠经颈背部皮下注射10%的D-半乳糖0.125 g/kg.d,连续6周,参照文献[1,2]构建衰老大鼠模型。建模后将大鼠随机分为4组:对照组（n=18）、七氟烷组（n=18）、?7nAChR激动剂组（n=18）、?7nAChR拮抗剂组（n=18）。对照组吸入运载气体（1 L/min O2+1 L/min air）6 h;七氟烷组吸入3.2%七氟烷+运载气体6 h;α7nAChR激动剂组单次腹腔注射?7nAChR激动剂（PNU-282987）5 mg/kg,24 h后处理同七氟烷组;α7nAChR拮抗剂组单次腹腔注射?7nACh...
【文章来源】：遵义医科大学贵州省
【文章页数】：66 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
水迷宫示意图
遵义医科大学硕士学位论文林夏妃16所得的图像传入GEADW4.6后处理工作站，打开MIP系统重组图像后，预览所摄图像，若图像显示欠清，则需重新进行扫描。于冠状面颅脑图像上，手动逐层描绘颅脑及海马边界。逐层描绘完毕时，软件自动计算并显示颅脑及海马体积等指标，所有体积均测量3次取平均值以增加其可靠性。主要测量指标有：颅脑容积(Brainvolume，BV)，最大颅脑长度（Maximumbrainlength，BL），最大颅脑宽度（Maximumbrainwidth，BW）；右侧海马体积(Righthippocampalvolume，RHV)，右侧最大海马长度（Rightmaximumhippocampallength，RHL），右侧最大海马宽度（Rightmaximumhippocampalwidth，RHW）；左侧海马体积（Lefthippocampalvolume，LHV），左侧最大海马长度（Leftmaximumhippocampallength，LHL），左侧最大海马宽度（Leftmaximumhippocampalwidth，LHW）。为减少个体化差异导致的实验误差，使用颅脑容积对双侧海马、最大颅脑长度对双侧最大海马长度，最大颅脑宽度对双侧最大海马宽度进行标准化比较：LHV/BV、RHV/BV、RHL/BL、LHL/BL、RHW/BW、LHW/BW。图3大鼠大脑MRI矢状位及冠状位海马结构示意图
遵义医科大学硕士学位论文林夏妃17图a~h分别为七氟烷组某大鼠MRI图像逐层手动描绘过程，图i为系统自动计算海马体积及海马最大长度、宽度。图4MIP系统自动测量海马体积示意图1.2.2.4大鼠海马组织透射电镜样本制备(1)各亚组大鼠MRI拍摄完毕后，予2%戊巴比妥45mg/kg腹腔注射麻醉，待麻醉起效，断头、去除颅骨，暴露并取出脑组织，于冰块上快速、完整剥离海马组织，将修整后的海马组织置于3%戊二醛固定液中，于4℃冰箱中保存备用。(2)脱水：将上述海马组织进行梯度脱水（70%丙酮15min+80%丙酮15min+90%丙酮15min+100%丙酮10min），重复进行2次。(3)浸透及包埋：将海马组织放入环氧树脂包埋剂中，依次添加十二烷琥珀酸酐（硬化剂）、二乙基苯丙胺（加速剂）、苯二甲酸丁二酯（增塑剂），置于烘干箱中（45℃12h、60℃36h)，聚合硬块成包埋块。(4)切片及染色：在显微镜下将包埋块削去表面包埋剂，用超薄切片机切成厚度为40nm的切片，然后置于含有支持膜的载网上。将滴染液（醋酸铀+硝酸铅）滴于制作好的蜡板上，并将载网浮于滴染液上，染色15min。
【参考文献】：
期刊论文
[1]GLYX-13通过NR2B-ERK-CREB信号通路改善氯胺酮麻醉后幼鼠认知功能障碍[J]. 郑文婧,郄晓娟,郑文芳. 中国免疫学杂志. 2020(02)
[2]七氟烷对衰老模型大鼠认知功能及海马超微结构的影响[J]. 杨洋,吴振宇,林夏妃,张超,朱昭琼. 四川大学学报(医学版). 2019(05)
[3]西格列汀减轻STZ所致的大鼠AD样痴呆行为和脑病变[J]. 秦旭姣,周红艳,张军,杨俊婷,胡梦明,祁金顺. 神经解剖学杂志. 2018(06)
[4]光遗传学技术在中枢神经系统疾病中的应用进展[J]. 林夏妃,朱昭琼. 遵义医学院学报. 2018(05)
[5]右美托咪定可能通过SIRT1信号通路减轻老龄大鼠的术后认知功能障碍[J]. 方四通,陈勇,姚鹏,李依玲,杨玉军,徐国海. 南方医科大学学报. 2018(09)
[6]七氟烷对大鼠近期空间回忆能力、海马APOE、Aβ表达的影响[J]. 徐珊,朱昭琼,王义,唐春春,张超. 中国现代医学杂志. 2018(05)
[7]Optogenetics and its application in neural degeneration and regeneration[J]. Josue D.Ordaz,Wei Wu,Xiao-Ming Xu. Neural Regeneration Research. 2017(08)
[8]大鼠学习记忆能力及其海马内TNF-α、IL-6含量的增龄性改变[J]. 金海,陈晨,张明辉,吴芹,石京山,金凤. 遵义医学院学报. 2017(03)
[9]七氟烷对大鼠海马Tau蛋白基因的调控作用及其对认知的影响[J]. 许凌懿,谢笛,朱宇航,朱昭琼. 遵义医学院学报. 2017(02)
[10]D-半乳糖诱导细胞衰老模型的线粒体能量代谢功能研究[J]. 曹建明,郝东杰,陈华乐,尉骁,侯渊博,叶薇. 中华老年医学杂志. 2017 (02)
博士论文
[1]7 Tesla磁共振功能成像对癫痫大鼠脑损伤的长期跟踪研究[D]. 汤翔宇.华中科技大学 2012
本文编号：3411307
【文章来源】：遵义医科大学贵州省
【文章页数】：66 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
水迷宫示意图
遵义医科大学硕士学位论文林夏妃16所得的图像传入GEADW4.6后处理工作站，打开MIP系统重组图像后，预览所摄图像，若图像显示欠清，则需重新进行扫描。于冠状面颅脑图像上，手动逐层描绘颅脑及海马边界。逐层描绘完毕时，软件自动计算并显示颅脑及海马体积等指标，所有体积均测量3次取平均值以增加其可靠性。主要测量指标有：颅脑容积(Brainvolume，BV)，最大颅脑长度（Maximumbrainlength，BL），最大颅脑宽度（Maximumbrainwidth，BW）；右侧海马体积(Righthippocampalvolume，RHV)，右侧最大海马长度（Rightmaximumhippocampallength，RHL），右侧最大海马宽度（Rightmaximumhippocampalwidth，RHW）；左侧海马体积（Lefthippocampalvolume，LHV），左侧最大海马长度（Leftmaximumhippocampallength，LHL），左侧最大海马宽度（Leftmaximumhippocampalwidth，LHW）。为减少个体化差异导致的实验误差，使用颅脑容积对双侧海马、最大颅脑长度对双侧最大海马长度，最大颅脑宽度对双侧最大海马宽度进行标准化比较：LHV/BV、RHV/BV、RHL/BL、LHL/BL、RHW/BW、LHW/BW。图3大鼠大脑MRI矢状位及冠状位海马结构示意图
遵义医科大学硕士学位论文林夏妃17图a~h分别为七氟烷组某大鼠MRI图像逐层手动描绘过程，图i为系统自动计算海马体积及海马最大长度、宽度。图4MIP系统自动测量海马体积示意图1.2.2.4大鼠海马组织透射电镜样本制备(1)各亚组大鼠MRI拍摄完毕后，予2%戊巴比妥45mg/kg腹腔注射麻醉，待麻醉起效，断头、去除颅骨，暴露并取出脑组织，于冰块上快速、完整剥离海马组织，将修整后的海马组织置于3%戊二醛固定液中，于4℃冰箱中保存备用。(2)脱水：将上述海马组织进行梯度脱水（70%丙酮15min+80%丙酮15min+90%丙酮15min+100%丙酮10min），重复进行2次。(3)浸透及包埋：将海马组织放入环氧树脂包埋剂中，依次添加十二烷琥珀酸酐（硬化剂）、二乙基苯丙胺（加速剂）、苯二甲酸丁二酯（增塑剂），置于烘干箱中（45℃12h、60℃36h)，聚合硬块成包埋块。(4)切片及染色：在显微镜下将包埋块削去表面包埋剂，用超薄切片机切成厚度为40nm的切片，然后置于含有支持膜的载网上。将滴染液（醋酸铀+硝酸铅）滴于制作好的蜡板上，并将载网浮于滴染液上，染色15min。
【参考文献】：
期刊论文
[1]GLYX-13通过NR2B-ERK-CREB信号通路改善氯胺酮麻醉后幼鼠认知功能障碍[J]. 郑文婧,郄晓娟,郑文芳. 中国免疫学杂志. 2020(02)
[2]七氟烷对衰老模型大鼠认知功能及海马超微结构的影响[J]. 杨洋,吴振宇,林夏妃,张超,朱昭琼. 四川大学学报(医学版). 2019(05)
[3]西格列汀减轻STZ所致的大鼠AD样痴呆行为和脑病变[J]. 秦旭姣,周红艳,张军,杨俊婷,胡梦明,祁金顺. 神经解剖学杂志. 2018(06)
[4]光遗传学技术在中枢神经系统疾病中的应用进展[J]. 林夏妃,朱昭琼. 遵义医学院学报. 2018(05)
[5]右美托咪定可能通过SIRT1信号通路减轻老龄大鼠的术后认知功能障碍[J]. 方四通,陈勇,姚鹏,李依玲,杨玉军,徐国海. 南方医科大学学报. 2018(09)
[6]七氟烷对大鼠近期空间回忆能力、海马APOE、Aβ表达的影响[J]. 徐珊,朱昭琼,王义,唐春春,张超. 中国现代医学杂志. 2018(05)
[7]Optogenetics and its application in neural degeneration and regeneration[J]. Josue D.Ordaz,Wei Wu,Xiao-Ming Xu. Neural Regeneration Research. 2017(08)
[8]大鼠学习记忆能力及其海马内TNF-α、IL-6含量的增龄性改变[J]. 金海,陈晨,张明辉,吴芹,石京山,金凤. 遵义医学院学报. 2017(03)
[9]七氟烷对大鼠海马Tau蛋白基因的调控作用及其对认知的影响[J]. 许凌懿,谢笛,朱宇航,朱昭琼. 遵义医学院学报. 2017(02)
[10]D-半乳糖诱导细胞衰老模型的线粒体能量代谢功能研究[J]. 曹建明,郝东杰,陈华乐,尉骁,侯渊博,叶薇. 中华老年医学杂志. 2017 (02)
博士论文
[1]7 Tesla磁共振功能成像对癫痫大鼠脑损伤的长期跟踪研究[D]. 汤翔宇.华中科技大学 2012
本文编号：3411307
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