抗成人T细胞白血病的药物筛选及其机制研究

发布时间：2021-10-28 13:58

　　背景成人T细胞白血病（Adult T-cell leukemia/lymphoma,ATL）是由人类T细胞白血病病毒I型（Human T-lymphotropic virus 1,HTLV-1）引起的外周T淋巴细胞恶性肿瘤,与其他侵袭性的非霍奇金淋巴瘤相比,预后较差。虽然有骨髓移植、免疫治疗等治疗手段,但治疗成本高。传统的化疗也有局限性,引起严重的并发症。因此寻找有针对性、低毒高效的治疗药物已成为目前研究的重要方向。目的本研究旨在筛选可抑制ATL细胞的活性成分,探究其抑制ATL细胞体外增殖的影响及可能的分子机制,为临床上ATL的预防和治疗研究提供理论和实验基础,对于开发新的药物靶点有广阔的前景。方法首先采用CCK-8法从不同的中药和萘酰亚胺类衍生物中筛选出可抑制ATL细胞增殖的活性成分;Hoechst33258荧光染色观察细胞凋亡的形态学变化。其次通过流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期分布的变化;透射电子显微镜观察细胞的超微结构;Western blot检测细胞中Bax、Bcl-2、Caspase-3等相关蛋白表达的变化;采用Pan-caspase抑制剂与药物共同作用,检测细胞凋亡变化。... 

【文章来源】：华侨大学福建省

【文章页数】：96 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

穿心莲内酯对HBZ mRNA表达的影响

2f、4pq对HBZ mRNA表达的影响

由于前期实验发现穿心莲内酯能使ATL-ED和TL-om1细胞发生凋亡,但是对MT-2/MT-4作用不大,为了增强效果,常采用联合化疗方案治疗。因此想通过与三氧化二砷联用方式检测能否对不敏感的细胞起作用,由图4.3所示,通过与三氧化二砷（1 μM）联用能够促进穿心莲内酯对ATL-ED细胞的作用。穿心莲内酯处理浓度为5 μM时,ATL-ED细胞活力为（87.67±1.21）%,DMSO组细胞活力为（108.26±8.64）%。当与ATO（1 μM）联用时细胞活力为（47.80±9.13）%。细胞活力与单药组明显降低。但是还是对MT-2和MT-4细胞没有明显的影响。但是为什么会出现这样的现象呢？于是通过查阅文献得知ATL-ED和TL-om1不表达Tax,只表达HBZ,而MT-2、MT-4同时表达Tax和HBZ,因此猜想病毒编码的Tax 蛋白的出现可能影响了药物的作用。穿心莲内酯可能是特异性作用于HBZ蛋白的药物,从而影响肿瘤细胞的增殖及病毒的复制。4.3.4 穿心莲内酯对转染Tax的Jurkat细胞的影响

【参考文献】：
期刊论文
[1]HTLV-1病毒蛋白Tax和HBZ协同促进成人T细胞白血病发生的机制[J]. 王雍,王志龙,衣凯宁,张熠玲,徐玲玲,赵铁军.  病毒学报. 2019(01)
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[3]穿心莲内酯的药理活性作用[J]. 李曙光,叶再元.  中华中医药学刊. 2008(05)
[4]色胺酮的研究进展[J]. 缪珊,孙纪元,谢艳华,王剑波,王四旺.  中国药理学通报. 2008(02)
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[7]中药有效单体对肿瘤细胞诱导分化及凋亡的机制研究[J]. 花宝金.  中国中医基础医学杂志. 2002(07)
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本文编号：3462909