血红铆钉菇化学成分分析及生物活性的研究

发布时间：2021-11-12 14:09

　　目的:基于谱效关系和成分敲出技术对血红铆钉菇抗肝癌作用的主要活性成分进行辨识;同时对血红铆钉菇中的主要活性成分进行网络药理学研究,预测其作用机制。方法:1、首先采用MTT法来考察血红铆钉菇不同极性部位对肝癌HepG2细胞的抑制作用,筛选出最佳活性部位;2、采用HPLC-DAD建立不同产地血红铆钉菇的化学指纹图谱;结合各样品的抗肝癌活性,通过SIMCA软件进行偏最小二乘法分析（PLS）,初步筛选出其中的活性成分;3、利用HPLC法敲出前期筛选的活性成分,并通过LC-ESI-MS/MS推测其可能的化学结构。采用MTT法评价其抗肝癌活性,进一步辨识血红铆钉菇中的主要活性成分;4、采用网络药理学的方法预测血红铆钉菇中主要活性成分的抗肝癌作用机制。结果:1、血红铆钉菇不同部位的对HepG2细胞的增殖均具有一定抑制作用,并且与药物作用浓度具有剂量依赖关系,同时二氯甲烷部位的IC50值明显低于其他给药组,说明了血红铆钉菇的发挥抗肝癌作用的主要活性成分集中在二氯甲烷层;2、不同产地血红铆钉菇二氯甲烷提取液对于肝癌HepG2细胞的抑制作用有较大的差异;当样品浓度改变时,对HepG2细胞的增殖抑制作用的影... 

【文章来源】：长春中医药大学吉林省

【文章页数】：63 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

甾醇类化合物结构

长春中医药大学2020届硕士学位论文101.3酚类血红铆钉菇子实体中酚类化合物有[6,8]：4-羟基苯甲醛（4-Hydroxybenzaldehyde）、4-羟基苯乙酸（(4-Hydroxyphenyl)aceticacid）、4-羟基苯乙酸甲酯（Methyl(4-hydroxyphenyl)acetate）、3-（3,4-二羟基苯基）丙烯酸（3-(3,4-Dihydroxyphenyl)-2-propenoicacid）、4-羟基苯乙酸丁酯（Butyl(4-hydroxyphenyl)acetate）、绒盖牛肝菌酸（Xerocomicacid）。图3酚类化合物结构Figure3structureofphenols2血红铆钉菇的药理作用研究进展2.1抗肿瘤作用研究表明，血红铆钉菇既具有较好的体内外抗肿瘤作用。冯建[10]从色钉菇（Chroogomphusrutilus）中分离纯化出11种化合物，活性的结果显示，5‐羟基尿嘧啶核苷对人胃癌BGC细胞的增殖有较强的抑制作用（IC50为7.92μg/mL）。李贞卓[6]从该血红铆钉菇中分离得到一种单体化合物绒盖牛肝菌酸（Xerocomicacid），发现其具有显著的抗肿瘤和增强免疫的作用，绒盖牛肝菌酸能显著抑制HepG2、Bel-7402、MCF-7、Hela的增殖（IC50为41.37±0.36μg/mL、37.09±0.69μg/mL、80.84±1.06μg/mL、68.25±0.58μg/mL），并且具有一定浓度依赖性，说明绒盖牛肝菌酸具有较为广谱的抗肿瘤效果。高琴琴[11]对绒盖牛肝菌酸的抗肿瘤作用机制进一步研究，认为其可能是与染色质转录调

长春中医药大学2020届硕士学位论文193.2量化色谱峰的确定采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004》软件，以S1血红铆钉菇二氯甲烷提取物图谱作参照，时间窗口设为0.5，釆用平均数法生成对照图谱[39]，匹配的色谱图和峰面积如图4和表4所示。通过比较10批不同产地血红铆钉菇HPLC特征图谱，可以发现其共有成分较多，但成分组成有所差异，同时各个样品中的成分含量也有所不同，因此，共筛选出13个共有峰作为研究对象。图4不同血红铆钉菇样品的HPLC指纹图谱Figure4HPLCfingerprintsofdifferentChroogomphusrutilussamples表4不同产地血红铆钉菇指纹图谱的共有峰面积Table4CommonpeakareasoffingerprintsofdifferentChroogomphusrutilussamples共有峰编号S1S2S3S4S5S6S7S8S9S10132.94624.00749.97946.75866.3443.4524.00761.69134.60420.093


本文编号：3491066