人脱细胞羊膜对牙周膜干细胞生物学功能及成骨分化能力的影响研究
发布时间：2021-11-18 13:46
目的:体外实验探索人脱细胞羊膜对牙周膜干细胞生物学功能及成骨分化能力的影响方法:本实验采用组织块改良培养法分离和培养牙周膜干细胞,通过流式细胞术鉴定牙周膜干细胞,机械/酶消化法制备脱细胞羊膜基质,HE染色、免疫组化鉴定脱细胞情况和主要组分;倒置显微镜观察以及扫描电镜观察脱细胞羊膜表面结构,评价脱细胞羊膜基质作为细胞传递载体的潜力。利用脱细胞羊膜基质负载牙周膜干细胞,将其分为脱细胞羊膜基质组和TCP组（细胞培养板组）通过,Annexin V-FITC/PI细胞凋亡率检测、CCK8、细胞粘附、Transwell迁移实验检测脱细胞羊膜对牙周膜干细胞生物学功能的影响,通过设置TCP（-）（细胞培养板未诱导组）、TCP（O）（细胞培养板诱导液组）、HAAM（-）（脱细胞羊膜未诱导组）、HAAM（O）（脱细胞羊膜诱导液组）,采用7、14、21天ALP染色、21天茜素红染色以及对7、14天ALP活性及21天茜素红染色半定量,利用RT-PCR、WB检测7、14、21天成骨相关蛋白COL1A1、ALP、OPN,以观察不同组别的成骨分化情况。结果:牙周膜干细胞分离和提取及脱细胞羊膜基质的制备成功。经检测脱...
【文章来源】：遵义医科大学贵州省
【文章页数】：82 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
牙周膜干细胞原代，1代，3代培养情况（A:原代B:P1C:P3;标尺100μm）
遵义医科大学硕士学位论文丰奇昊16图2.流式细胞仪鉴定牙周膜干细胞Figure2.Identificationofperiodontalligamentstemcellsbyflowcytometry2.2脱细胞羊膜的制备与鉴定2.2.1机械/酶消化法制备羊膜宏观视野下正常人羊膜见图3A，为白色或淡黄色半透明膜。经过机械/酶消化法脱细胞处理后的脱细胞羊膜见图3B，为质地菲薄，白色或无色的半透明膜。图3.宏观视野下正常人羊膜脱细胞处理前后对比（A:正常人羊膜B：脱细胞羊膜）Figure3.Comparisonofnon-acellularandacellularhumanamnion（A:humanamnioticmembraneB:Acellularamnioticmembrane）
遵义医科大学硕士学位论文丰奇昊16图2.流式细胞仪鉴定牙周膜干细胞Figure2.Identificationofperiodontalligamentstemcellsbyflowcytometry2.2脱细胞羊膜的制备与鉴定2.2.1机械/酶消化法制备羊膜宏观视野下正常人羊膜见图3A，为白色或淡黄色半透明膜。经过机械/酶消化法脱细胞处理后的脱细胞羊膜见图3B，为质地菲薄，白色或无色的半透明膜。图3.宏观视野下正常人羊膜脱细胞处理前后对比（A:正常人羊膜B：脱细胞羊膜）Figure3.Comparisonofnon-acellularandacellularhumanamnion（A:humanamnioticmembraneB:Acellularamnioticmembrane）
【参考文献】：
期刊论文
[1]人脱细胞羊膜在构建组织工程支架中的应用及研究方向[J]. 杨继滨,熊华章,李豫皖,刘毅. 中国组织工程研究. 2017(25)
[2]细胞外基质材料在骨组织工程中的研究进展[J]. 张迟,李梅,赵基源. 中国生物医学工程学报. 2017(01)
[3]去细胞人羊膜基质的制备及免疫原性[J]. 路欣,袁洁,郭昕悦,李卫红,尚宏伟,张立新,黄晓武,张海燕. 解剖学报. 2016(04)
[4]Characterization of the osteogenic potential of mesenchymal stem cells from human periodontal ligament based on cell surface markers[J]. Ruth Alvarez,Hye-Lim Lee,Cun-Yu Wang,Christine Hong. International Journal of Oral Science. 2015(04)
[5]牙周膜干细胞培养及鉴定方法的研究进展[J]. 王冠华. 医学理论与实践. 2014(07)
[6]人间充质干细胞表面标记分子的研究进展[J]. 李秋晨,肖苒. 组织工程与重建外科杂志. 2013(04)
[7]脱细胞技术及其在组织工程中的应用研究进展[J]. 赵宇,于淼,柏树令. 中国修复重建外科杂志. 2013(08)
[8]牙周组织工程研究新进展[J]. 孙路,王永兰. 牙体牙髓牙周病学杂志. 2012(03)
[9]新型牙周再生细胞传递载体的体外建立[J]. 刘琪,Victor Marino,Mark Bartold. 华西口腔医学杂志. 2006(01)
博士论文
[1]间充质干细胞在牙周组织/骨再生中作用的实验研究[D]. 王芳.山东大学 2011
硕士论文
[1]PLA/nHAp/HAAM复合支架的制备及性能研究[D]. 闫新宇.大连理工大学 2017
本文编号：3503007
【文章来源】：遵义医科大学贵州省
【文章页数】：82 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
牙周膜干细胞原代，1代，3代培养情况（A:原代B:P1C:P3;标尺100μm）
遵义医科大学硕士学位论文丰奇昊16图2.流式细胞仪鉴定牙周膜干细胞Figure2.Identificationofperiodontalligamentstemcellsbyflowcytometry2.2脱细胞羊膜的制备与鉴定2.2.1机械/酶消化法制备羊膜宏观视野下正常人羊膜见图3A，为白色或淡黄色半透明膜。经过机械/酶消化法脱细胞处理后的脱细胞羊膜见图3B，为质地菲薄，白色或无色的半透明膜。图3.宏观视野下正常人羊膜脱细胞处理前后对比（A:正常人羊膜B：脱细胞羊膜）Figure3.Comparisonofnon-acellularandacellularhumanamnion（A:humanamnioticmembraneB:Acellularamnioticmembrane）
遵义医科大学硕士学位论文丰奇昊16图2.流式细胞仪鉴定牙周膜干细胞Figure2.Identificationofperiodontalligamentstemcellsbyflowcytometry2.2脱细胞羊膜的制备与鉴定2.2.1机械/酶消化法制备羊膜宏观视野下正常人羊膜见图3A，为白色或淡黄色半透明膜。经过机械/酶消化法脱细胞处理后的脱细胞羊膜见图3B，为质地菲薄，白色或无色的半透明膜。图3.宏观视野下正常人羊膜脱细胞处理前后对比（A:正常人羊膜B：脱细胞羊膜）Figure3.Comparisonofnon-acellularandacellularhumanamnion（A:humanamnioticmembraneB:Acellularamnioticmembrane）
【参考文献】：
期刊论文
[1]人脱细胞羊膜在构建组织工程支架中的应用及研究方向[J]. 杨继滨,熊华章,李豫皖,刘毅. 中国组织工程研究. 2017(25)
[2]细胞外基质材料在骨组织工程中的研究进展[J]. 张迟,李梅,赵基源. 中国生物医学工程学报. 2017(01)
[3]去细胞人羊膜基质的制备及免疫原性[J]. 路欣,袁洁,郭昕悦,李卫红,尚宏伟,张立新,黄晓武,张海燕. 解剖学报. 2016(04)
[4]Characterization of the osteogenic potential of mesenchymal stem cells from human periodontal ligament based on cell surface markers[J]. Ruth Alvarez,Hye-Lim Lee,Cun-Yu Wang,Christine Hong. International Journal of Oral Science. 2015(04)
[5]牙周膜干细胞培养及鉴定方法的研究进展[J]. 王冠华. 医学理论与实践. 2014(07)
[6]人间充质干细胞表面标记分子的研究进展[J]. 李秋晨,肖苒. 组织工程与重建外科杂志. 2013(04)
[7]脱细胞技术及其在组织工程中的应用研究进展[J]. 赵宇,于淼,柏树令. 中国修复重建外科杂志. 2013(08)
[8]牙周组织工程研究新进展[J]. 孙路,王永兰. 牙体牙髓牙周病学杂志. 2012(03)
[9]新型牙周再生细胞传递载体的体外建立[J]. 刘琪,Victor Marino,Mark Bartold. 华西口腔医学杂志. 2006(01)
博士论文
[1]间充质干细胞在牙周组织/骨再生中作用的实验研究[D]. 王芳.山东大学 2011
硕士论文
[1]PLA/nHAp/HAAM复合支架的制备及性能研究[D]. 闫新宇.大连理工大学 2017
本文编号：3503007
本文链接：https://www.wllwen.com/shoufeilunwen/mpalunwen/3503007.html
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