TO901317促进GF诱导人骨髓间充质干细胞向多巴胺能神经元分化对帕金森病作用观察
发布时间：2021-11-19 21:38
目的:1.探讨肝X受体（Liver X receptors,LXRs）激动剂TO901317促进GF诱导人骨髓间充质干细胞（human bone marrow derived mesenchymal stem cells,hBMSCs）向多巴胺能神经元（Dopaminergic neurons,DA）分化的方案。2.观察TO901317联合GF诱导hBMSCs分化的多巴胺能神经元体外功能。3.初步探讨TO901317促进GF诱导hBMSCs向多巴胺能神经元分化的机制。4.观察TO901317联合GF诱导分化的多巴胺能神经元对6-OHDA致SD大鼠帕金森病的治疗作用。方法:1.确定TO901317促进GF诱导hBMSCs向多巴胺能神经元分化的浓度、加入时间和诱导分化时程。（1）确定TO901317促进GF诱导hBMSCs向多巴胺能神经元分化的浓度。根据加入TO901317的浓度（0.125、0.25、0.5、1、2mM）,将h MBSCs分为五个组。各组均联合生长因子（growth factors,GF）诱导hBMSCs分化为多巴胺能神经元。联合诱导培养hBMSCs分化12天后,采用免疫...
【文章来源】：重庆医科大学重庆市
【文章页数】：74 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
倒置显微镜下观察hBMSCs形态（200×）
重庆医科大学硕士研究生学位论文研究获得重庆市科技局社会事业与民生保障科技创新专项资助（No.cstc2017shms-zdyfX0053）28导时间的延长，各组细胞生存率逐渐下降（图2）。结果表明GF会促进细胞的生长，而TO901317对hBMSCs的细胞增殖没有影响，但是LXR激动剂TO901317对hBMSCs的诱导分化是否有作用将于进一步的实验结果中体现。图2LXR激动剂TO901317对细胞存活率的影响Fig.2EffectsofliverXreceptoragonistonthecellviabilityofculturedhBMSCs.DifferentconcentrationsofTO901317weresupplementedintothemediumtoexaminetheeffectofTO901317ontheviabilityofhBMSCs.(A)Culturefor3days.(B)Culturefor6days.(C)Culturefor9days.(D)Culturefor12days.Datawereexpressedasmean±SD(n=6).*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001,comparedwithcontrolgroup.2.3TO901317联合GF诱导hBMSCs分化的时程0.5μMTO901317联合GF处理hBMSCs，分别在联合诱导的第3天、6天、9天、12天采用免疫荧光检测Tuj1、TH表达。统计各组细胞分化率。结果显示，相比于3天、9天和12天组，0.5μMTO901317联合GF诱导6天的细胞分化率可达到90%（图3A和B）。并且随着TO901317处理hBMSCs时间的延长，诱
重庆医科大学硕士研究生学位论文研究获得重庆市科技局社会事业与民生保障科技创新专项资助（No.cstc2017shms-zdyfX0053）31图30.5μMLXR激动剂TO901317联合GF诱导不同时间段，Tuj1和TH的表达Fig.3DeterminethetimeforinductionperiodofLXRagonist.(A)TheexpressionsofTuj1andTHwereshowedineachgroup.(B)CountingTH+cellsbetweengroups.Dataareexpressedasmean±SD(n=6).**P<0.01,comparedtoGFgroup,respectively.(C)Morphologicalchangesofcellsduringdifferentinductionperiods.(D)ExpressionofTHwasdetectedbyWesternblotting(n=6).***P<0.001,comparedtotheGFgroup.*P<0.05,@@P<0.01,comparedtoControlgroup(E)Bright-fieldimagesofhBMSCsindifferentgroups.2.4TO901317促进GF诱导hBMSCs分化浓度筛选LXR+GF组在加入GF的前提下，分别加入0.125μM、0.25μM、0.5μM、1μM、2μM的LXR激动剂TO901317，对hBMSCs诱导12天。免疫荧光检测Tuj1、TH。结果显示，随着TO901317处理hBMSCs浓度的增大，TH阳性细胞率呈现出先上升后下降的趋势，TH阳性细胞率在0.5μM的TO901317的处理下达到高峰（图4）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]帕金森病的诊断和治疗进展[J]. 贺志明,黄月明. 邵阳学院学报(自然科学版). 2019(06)
[2]帕金森病大鼠模型的建立及其行为学评价的实验研究[J]. 谭磊琦,刘亚松,沈富春,张慧民,任梦,刘长青,郭俣. 齐齐哈尔医学院学报. 2017(18)
[3]中药诱导骨髓间充质干细胞向神经样细胞分化的研究进展[J]. 李盛华,郭平德,王文晶. 中国骨伤. 2010(03)
[4]Differentiation of Mesenchymal Stem Cells Into Dopaminergic Neuron-like Cells in vitro[J]. LI GUO*,2, FEI YIN#,2, HONG-QI MENG*, LING LING*, TA-NA HU-HE*, PENG LI*, CHUN-XIA ZHANG*, SHUN YU?, DE-SHENG DUAN#, AND HONG-XUE FAN*,3 *Department of Toxicology, School of Public Health, Jilin University, Changchun, Jilin 130021, China; Department of # Orthopaedics, China-Japan Union Hospital, Jilin University, Changchun, Jilin 130031, China; Beijing Institute ? of Geriatrics, Xuanwu Hospital of Capital University of Medical Sciences, Beijing 100053, China. Biomedical and Environmental Sciences. 2005(01)
本文编号：3505918
【文章来源】：重庆医科大学重庆市
【文章页数】：74 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
倒置显微镜下观察hBMSCs形态（200×）
重庆医科大学硕士研究生学位论文研究获得重庆市科技局社会事业与民生保障科技创新专项资助（No.cstc2017shms-zdyfX0053）28导时间的延长，各组细胞生存率逐渐下降（图2）。结果表明GF会促进细胞的生长，而TO901317对hBMSCs的细胞增殖没有影响，但是LXR激动剂TO901317对hBMSCs的诱导分化是否有作用将于进一步的实验结果中体现。图2LXR激动剂TO901317对细胞存活率的影响Fig.2EffectsofliverXreceptoragonistonthecellviabilityofculturedhBMSCs.DifferentconcentrationsofTO901317weresupplementedintothemediumtoexaminetheeffectofTO901317ontheviabilityofhBMSCs.(A)Culturefor3days.(B)Culturefor6days.(C)Culturefor9days.(D)Culturefor12days.Datawereexpressedasmean±SD(n=6).*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001,comparedwithcontrolgroup.2.3TO901317联合GF诱导hBMSCs分化的时程0.5μMTO901317联合GF处理hBMSCs，分别在联合诱导的第3天、6天、9天、12天采用免疫荧光检测Tuj1、TH表达。统计各组细胞分化率。结果显示，相比于3天、9天和12天组，0.5μMTO901317联合GF诱导6天的细胞分化率可达到90%（图3A和B）。并且随着TO901317处理hBMSCs时间的延长，诱
重庆医科大学硕士研究生学位论文研究获得重庆市科技局社会事业与民生保障科技创新专项资助（No.cstc2017shms-zdyfX0053）31图30.5μMLXR激动剂TO901317联合GF诱导不同时间段，Tuj1和TH的表达Fig.3DeterminethetimeforinductionperiodofLXRagonist.(A)TheexpressionsofTuj1andTHwereshowedineachgroup.(B)CountingTH+cellsbetweengroups.Dataareexpressedasmean±SD(n=6).**P<0.01,comparedtoGFgroup,respectively.(C)Morphologicalchangesofcellsduringdifferentinductionperiods.(D)ExpressionofTHwasdetectedbyWesternblotting(n=6).***P<0.001,comparedtotheGFgroup.*P<0.05,@@P<0.01,comparedtoControlgroup(E)Bright-fieldimagesofhBMSCsindifferentgroups.2.4TO901317促进GF诱导hBMSCs分化浓度筛选LXR+GF组在加入GF的前提下，分别加入0.125μM、0.25μM、0.5μM、1μM、2μM的LXR激动剂TO901317，对hBMSCs诱导12天。免疫荧光检测Tuj1、TH。结果显示，随着TO901317处理hBMSCs浓度的增大，TH阳性细胞率呈现出先上升后下降的趋势，TH阳性细胞率在0.5μM的TO901317的处理下达到高峰（图4）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]帕金森病的诊断和治疗进展[J]. 贺志明,黄月明. 邵阳学院学报(自然科学版). 2019(06)
[2]帕金森病大鼠模型的建立及其行为学评价的实验研究[J]. 谭磊琦,刘亚松,沈富春,张慧民,任梦,刘长青,郭俣. 齐齐哈尔医学院学报. 2017(18)
[3]中药诱导骨髓间充质干细胞向神经样细胞分化的研究进展[J]. 李盛华,郭平德,王文晶. 中国骨伤. 2010(03)
[4]Differentiation of Mesenchymal Stem Cells Into Dopaminergic Neuron-like Cells in vitro[J]. LI GUO*,2, FEI YIN#,2, HONG-QI MENG*, LING LING*, TA-NA HU-HE*, PENG LI*, CHUN-XIA ZHANG*, SHUN YU?, DE-SHENG DUAN#, AND HONG-XUE FAN*,3 *Department of Toxicology, School of Public Health, Jilin University, Changchun, Jilin 130021, China; Department of # Orthopaedics, China-Japan Union Hospital, Jilin University, Changchun, Jilin 130031, China; Beijing Institute ? of Geriatrics, Xuanwu Hospital of Capital University of Medical Sciences, Beijing 100053, China. Biomedical and Environmental Sciences. 2005(01)
本文编号：3505918
本文链接：https://www.wllwen.com/shoufeilunwen/mpalunwen/3505918.html
最近更新
教材专著
