电针对阿尔茨海默症大鼠海马区P35/P25-细胞周期素依赖性蛋白激酶5-Tau蛋白磷酸化路径的影响
发布时间：2021-11-25 08:01
目的:通过对阿尔茨海默症（Alzheimer’s disease,AD）模型大鼠“百会”和双侧“肾俞”穴进行电针干预,以探寻其对AD模型大鼠认知障碍的改善情况,及其对大鼠海马区“P35/P25-细胞周期素依赖性蛋白激酶5（Cyclin-dependent Kinase 5,CDK5）-Tau蛋白磷酸化”信号转导路径的影响,从而更加深入的探讨电针防治AD的相关机制。方法:首先,按照随机数字表法将50只雄性成年Sprague-Dawley（SD）大鼠随机均分为4组,分别命名为:对照组、假手术组、模型组以及电针治疗组,每组各12只,另2只备用。然后,制作AD模型:对模型组及治疗组大鼠进行两侧海马区每侧各10μL的Aβ25-35（1 g/L）注射。假手术组于同一位置注射相同体积的生理盐水,治疗组大鼠在成功造模后针刺其“百会”和双侧“肾俞”穴并正确连接电针仪进行电针干预,1次/天,共处理10天。电针治疗结束后第二天采用Morris水迷宫对各组大鼠的学习记忆能力进行检测并统计分析;HE染色对比各组大鼠海马部位基本细胞形态的差异;免疫组织化学检测海马区P35/P25、CDK5、...
【文章来源】：重庆医科大学重庆市
【文章页数】：62 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
AD模型制作示意图
重庆医科大学硕士研究生学位论文17摸，不电针（尽可能保证仅有唯一变量，即：电针刺激）。与此同时，以上实验操作，每次固定时间和操作人员，并在每日电针干预后对各组大鼠进行称重，并观察记录每只大鼠的饮食、活动范围、毛发、针刺局部皮肤及精神状况等，作为造模与治疗效果评价的辅助观察指标。1.4.5Morris水迷宫实验实验前准备工作：首先，将所有大鼠放置到水迷宫环境中（每次进行水迷宫实验前清洁房间环境），提前适应实验环境1-2天（适应过程中保证温度湿度与饲养室中一致），再进行水迷宫测试。在直径为2m、深度为0.6m、温度范围为25±0.5℃、背景色为黑色的圆形水池内蓄水。在水池上方放置摄影装备，采用SMART行为分析软件观察并记录各组大鼠的平均逃避潜伏期（EscapeLatency，s）与搜索路径（EscapeLength，cm）（注意：在水迷宫实验进行的7日内，每日对水池进行清扫、消毒并换水，以避免气味导致的实验误差。与此同时，每次实验均必须在同一时间，由同样人员进行操作，实验过程中保持安静，避免误差。实验完成后，应尽快采用保暖措施，避免大鼠由于生病等影响实验结果）。图1.2Morris水迷宫平面图（第三象限内的小圆圈表示平台所在位置）Fig1.2Morriswatermazeplanedistributiondiagram（smallcirclesinquadrantindicatethepositionofplatform）.（1）可视平台实验：第1-2天，RWD水迷宫设备已规定水池平均分为四个固
重庆医科大学硕士研究生学位论文262结果2.1一般情况造模前各组大鼠反应灵敏，正常饮食。假手术组注入生理盐水后于对照组基本情况差异不大。模型组组大鼠虽未出现偏瘫等不良症状，但不同程度的出现反应迟钝（对外界刺激，如：声音，光线等，缺乏兴趣）、行动较缓慢、活动量和活动范围均有所减少（大多数时候喜欢蜷缩在鼠笼角落）、食欲较之前明显下降、毛发粗糙，喜睡等情况。经电针治疗后，大鼠行动更加灵活，活动范围明显扩大，饮食情况也较造模后有明显好转（基本与对照组无异）、毛发亦较前更为光滑。2.2Morris水迷宫实验2.2.1可视平台实验四组间进行比较，各组大鼠游泳姿势未见明显差异，且寻找到平台的平均逃避潜伏期（EscapeLatency，s)与搜索路径（EscapeLength，cm）均无统计学差异（P＞0.05），如图2.1所示。图2.1可视平台实验结果A：平均逃避潜伏期(s)；B：搜索路径(cm),P＞0.05。Fig.2.1Theresultsofvisualplatformexperiment.A:theescapelatencytime(s);B:theescapelength(cm),P＞0.05.
【参考文献】：
期刊论文
[1]针加灸对阿尔茨海默病大鼠海马区蛋白酪氨酸激酶-2/信号转导和转录激活因子-3信号通路的影响[J]. 刘静,杜艳军,周清莲,孙国杰. 针刺研究. 2019(02)
[2]阿尔茨海默病与β-淀粉样蛋白相关性研究现状[J]. 蔡谋善,汪萍,岳屹立. 神经解剖学杂志. 2019(01)
[3]系统心理干预在缓解阿尔茨海默病患者照顾者抑郁症状中的实践[J]. 王姝亚,金丽芬,白志仙,刘凯,高娟,吴婷婷. 中国护理管理. 2018(02)
[4]大鼠局灶性脑挫伤后Cdk5的表达变化[J]. 王正印,李如波,马诗雨,王福远,梁红霞,王汉志,郭晓冲. 中国法医学杂志. 2017(02)
[5]Tau蛋白的研究进展[J]. 张鸿日,彭静华,周洪龙,徐如祥. 中华神经创伤外科电子杂志. 2016(02)
[6]CDK5在血管性认知障碍大鼠海马中的表达[J]. 马艳茹,刘彩云,刘强. 脑与神经疾病杂志. 2015(04)
[7]Tau蛋白磷酸化在阿尔茨海默病中所处的地位[J]. 于艳红,许杰,李文彬,李红粉,温世荣. 现代生物医学进展. 2015(08)
[8]急性CO中毒迟发脑病大鼠海马中CDK5、p35及p25的表达[J]. 李勇军,刘强,赵春梅,王振海. 脑与神经疾病杂志. 2012(04)
[9]细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶5在中枢神经系统发育和神经退行性疾病中的作用[J]. 陈洁,王中峰. 生理学报. 2010(04)
[10]Aβ25～35和人参皂苷Rb1对鼠神经干细胞分化后GSK-3β、CDK-5和PP2A表达的影响[J]. 赵庆霞,鄢文海,韩雪飞,许燕,邢莹. 中国应用生理学杂志. 2010(02)
本文编号：3517726
【文章来源】：重庆医科大学重庆市
【文章页数】：62 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
AD模型制作示意图
重庆医科大学硕士研究生学位论文17摸，不电针（尽可能保证仅有唯一变量，即：电针刺激）。与此同时，以上实验操作，每次固定时间和操作人员，并在每日电针干预后对各组大鼠进行称重，并观察记录每只大鼠的饮食、活动范围、毛发、针刺局部皮肤及精神状况等，作为造模与治疗效果评价的辅助观察指标。1.4.5Morris水迷宫实验实验前准备工作：首先，将所有大鼠放置到水迷宫环境中（每次进行水迷宫实验前清洁房间环境），提前适应实验环境1-2天（适应过程中保证温度湿度与饲养室中一致），再进行水迷宫测试。在直径为2m、深度为0.6m、温度范围为25±0.5℃、背景色为黑色的圆形水池内蓄水。在水池上方放置摄影装备，采用SMART行为分析软件观察并记录各组大鼠的平均逃避潜伏期（EscapeLatency，s）与搜索路径（EscapeLength，cm）（注意：在水迷宫实验进行的7日内，每日对水池进行清扫、消毒并换水，以避免气味导致的实验误差。与此同时，每次实验均必须在同一时间，由同样人员进行操作，实验过程中保持安静，避免误差。实验完成后，应尽快采用保暖措施，避免大鼠由于生病等影响实验结果）。图1.2Morris水迷宫平面图（第三象限内的小圆圈表示平台所在位置）Fig1.2Morriswatermazeplanedistributiondiagram（smallcirclesinquadrantindicatethepositionofplatform）.（1）可视平台实验：第1-2天，RWD水迷宫设备已规定水池平均分为四个固
重庆医科大学硕士研究生学位论文262结果2.1一般情况造模前各组大鼠反应灵敏，正常饮食。假手术组注入生理盐水后于对照组基本情况差异不大。模型组组大鼠虽未出现偏瘫等不良症状，但不同程度的出现反应迟钝（对外界刺激，如：声音，光线等，缺乏兴趣）、行动较缓慢、活动量和活动范围均有所减少（大多数时候喜欢蜷缩在鼠笼角落）、食欲较之前明显下降、毛发粗糙，喜睡等情况。经电针治疗后，大鼠行动更加灵活，活动范围明显扩大，饮食情况也较造模后有明显好转（基本与对照组无异）、毛发亦较前更为光滑。2.2Morris水迷宫实验2.2.1可视平台实验四组间进行比较，各组大鼠游泳姿势未见明显差异，且寻找到平台的平均逃避潜伏期（EscapeLatency，s)与搜索路径（EscapeLength，cm）均无统计学差异（P＞0.05），如图2.1所示。图2.1可视平台实验结果A：平均逃避潜伏期(s)；B：搜索路径(cm),P＞0.05。Fig.2.1Theresultsofvisualplatformexperiment.A:theescapelatencytime(s);B:theescapelength(cm),P＞0.05.
【参考文献】：
期刊论文
[1]针加灸对阿尔茨海默病大鼠海马区蛋白酪氨酸激酶-2/信号转导和转录激活因子-3信号通路的影响[J]. 刘静,杜艳军,周清莲,孙国杰. 针刺研究. 2019(02)
[2]阿尔茨海默病与β-淀粉样蛋白相关性研究现状[J]. 蔡谋善,汪萍,岳屹立. 神经解剖学杂志. 2019(01)
[3]系统心理干预在缓解阿尔茨海默病患者照顾者抑郁症状中的实践[J]. 王姝亚,金丽芬,白志仙,刘凯,高娟,吴婷婷. 中国护理管理. 2018(02)
[4]大鼠局灶性脑挫伤后Cdk5的表达变化[J]. 王正印,李如波,马诗雨,王福远,梁红霞,王汉志,郭晓冲. 中国法医学杂志. 2017(02)
[5]Tau蛋白的研究进展[J]. 张鸿日,彭静华,周洪龙,徐如祥. 中华神经创伤外科电子杂志. 2016(02)
[6]CDK5在血管性认知障碍大鼠海马中的表达[J]. 马艳茹,刘彩云,刘强. 脑与神经疾病杂志. 2015(04)
[7]Tau蛋白磷酸化在阿尔茨海默病中所处的地位[J]. 于艳红,许杰,李文彬,李红粉,温世荣. 现代生物医学进展. 2015(08)
[8]急性CO中毒迟发脑病大鼠海马中CDK5、p35及p25的表达[J]. 李勇军,刘强,赵春梅,王振海. 脑与神经疾病杂志. 2012(04)
[9]细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶5在中枢神经系统发育和神经退行性疾病中的作用[J]. 陈洁,王中峰. 生理学报. 2010(04)
[10]Aβ25～35和人参皂苷Rb1对鼠神经干细胞分化后GSK-3β、CDK-5和PP2A表达的影响[J]. 赵庆霞,鄢文海,韩雪飞,许燕,邢莹. 中国应用生理学杂志. 2010(02)
本文编号：3517726
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