放疗联合IDO抑制剂对荷肺癌小鼠的抑瘤作用研究

发布时间：2021-12-29 18:58

　　目的:1.观察放疗联合吲哚胺-2,3-双加氧酶（IDO）抑制剂1-甲基色氨酸（1MT）对荷肺癌小鼠的抑瘤效应。2.观察放疗联合1MT治疗对荷瘤小鼠免疫抑制分子IDO的抑制作用。3.探讨放疗联合1MT治疗对荷瘤小鼠抗原提呈细胞树突状细胞（DCs）成熟分化、调节性T细胞分化、CD8+T细胞活化,T细胞耗竭受体（PD-1、TIM3、BTLA）的影响。方法:1.C57BL/C小鼠皮下接种Lewis肺癌（LLC）细胞悬液建立小鼠荷瘤模型后,随机分为4组:对照组（CON组）、1MT组、放疗组（RT组）、联合组（1MT+RT组）,分别给予每日两次生理盐水,或1MT 400mg/kg灌胃,RT组和1MT+RT组在接瘤第13天单次给与荷瘤小鼠10Gy x射线照射肿瘤表面,联合组同时给予1MT治疗。每日观察并测量肿瘤大小绘制肿瘤生长曲线;接瘤第28天处死小鼠,剥离肿瘤组织并称重。2.取部分肿瘤组织制备病理切片进行HE染色观察,免疫组织化学染色法观察各组中Ki-67的表达情况。3.RT-qPCR检测各组小鼠肿瘤组织中IDO、PD-1、TIM3、BTLA基因表达水平。4.流式细胞分析仪分别检测各组小鼠脾脏中D... 

【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校

【文章页数】：48 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

小鼠放疗实物图（采取单次10Gy的分割模式）

放疗联合IDO抑制剂治疗小鼠肺癌A.第28天处死小鼠剥离肿瘤实物图；B.肿瘤组织HE染色(×400)；C.肿瘤生长曲线；D.离体肿瘤的重量；n=5，*P＜0.05，**P＜0.01

第3章结果18ABCD图3.3IDO、PD-1、TIM3、BTLA表达水平A.以分组为横坐标，IDO的相对表达量为纵坐标；B.以分组为横坐标，PD-1的相对表达量为纵坐标；C.以分组为横坐标，TIM3的相对表达量为纵坐标；D.以分组为横坐标，BTLA的相对表达量为纵坐标；n=5，**P＜0.01。3.3联合治疗对荷肺癌小鼠脾脏CD4+CD25+Foxp3+Tregs、CD8+INF-γ+T细胞表达的影响Tregs细胞可以抑制抗肿瘤效应细胞如NK细胞、CD8+或CD4+T细胞的功能，抑制Tregs细胞可使效应细胞增多[37]。我们收集荷肺癌小鼠脾脏细胞，与细胞表面抗小鼠荧光抗体FITC-CD4，APC-CD25孵育30min，然后经过固定，透膜处理后，再与胞内抗小鼠荧光抗体PE-FoxP3孵育30min，流式细胞仪检测荷肺癌小鼠脾脏淋巴细胞中CD4+CD25+Foxp3+Tregs细胞的比例，我们先圈出CD4+T细胞群，再显示其中CD25+Foxp3+细胞，即为CD4+CD25+Foxp3+Tregs。各组Tregs分别是：CON组（2.58±0.05）%、RT组（1.32±0.1）%、1MT组（1.02±0.1）%、1MT+RT组（0.64±0.07）%。结果显示：与CON组相比，

【参考文献】：
期刊论文
[1]肿瘤免疫治疗中免疫检查点阻断剂的研究进展[J]. 王雪蕾,冯辉.  免疫学杂志. 2016(06)
[2]树突状细胞对调节性T细胞的调控作用[J]. 刘文婷,姜广水.  国际免疫学杂志. 2012 (03)



本文编号：3556692