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血管紧张素1-7通过p53/Drp1轴对血管紧张素Ⅱ诱导的血管内皮细胞衰老的影响

发布时间:2022-01-17 19:43
  目的:Ang1-7对HUVECs内皮细胞抗衰老作用是否通过线粒体裂变途径,并进一步探讨其是否通过p53/Drp1轴介导起作用。方法:1 HUVECs内皮细胞培养、传代、种板,6孔板中细胞密度达80%以上时,根据实验方案加入AngⅡ建立内皮细胞衰老模型;2实验分组:经过前期大量预实验及查阅文献,确定AngⅡ、Ang1-7最适浓度均为1μmol/L,具体分组情况如下:第一部分:检测Ang1-7是否可减轻AngⅡ诱导的内皮细胞衰老(1)Control组;(2)Ang1-7组:1μmol/L的Ang1-7的完全培养液作用细胞48h;(3)AngⅡ组:1μmol/L的AngⅡ的完全培养液作用细胞48h;(4)AngⅡ+Ang1-7组:先用1μmol/L Ang1-7干预30分钟,然后加入含有1μmol/L Ang II完全培养基培养48h。检查各组衰老情况:观察并计数各组中SA-β-Gal阳性细胞,线粒体活性氧试剂盒检测细胞内总ROS的水平,Western blotting检测衰老蛋白(p53、Drp1)的表达量。第二部分:检测Ang1-7是否是通过p53/Drp1轴引起细胞内ROS增多,导致内... 

【文章来源】:山西医科大学山西省

【文章页数】:47 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

血管紧张素1-7通过p53/Drp1轴对血管紧张素Ⅱ诱导的血管内皮细胞衰老的影响


Ang1-7对细胞衰老的影响

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山西医科大学硕士学位论文14图1-2表示Ang1-7对抗AngⅡ引起的HUVEC中ROS过度生成(n=3)。分析示:与Control组相比,AngⅡ组细胞ROS生成明显增多(P<0.001);Ang1-7组ROS生成无明显意义(P>0.05);与AngⅡ组相比,Ang1-7预处理组ROS生成减少(P<0.001)。猜想,Ang1-7可能是通过影响线粒体功能,使细胞内ROS生成减少。图1-2Ang1-7对细胞内ROS水平的影响注:A图是ROS荧光图(200×);B图是各组细胞ROS荧光强度统计图(n=3),与Control组比较,aP>0.05,bP<0.001;与AngⅡ组比较,cP<0.0012.1.3Westernblotting检测衰老相关蛋白p53和Drp1蛋白的表达量图1-3表示Ang1-7抑制AngⅡ诱导的HUVEC中p53、Drp1蛋白表达(n=5),统计学分析示:与Control组相比,AngⅡ组细胞p53、Drp1蛋白相对表达量明显增多(P<0.001),Ang1-7组蛋白相对表达量无明显统计学意义(P>0.05);与AngⅡ组相比,Ang1-7预处理组上述蛋白相对表达量降低(P<0.001)。可以分析出AngI-7可抑制AngⅡ诱导的p53和Drp1蛋白的表达,猜想AngI-7可能是通过p53/Drp1轴来减轻AngⅡ诱导的内皮细胞的衰老。

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Ang1-7对衰老相关蛋白p53、Drp1表达的影响

【参考文献】:
期刊论文
[1]血管紧张素(1-7)/Mas受体轴通过调控ATP敏感性钾通道对抗高糖引起的人脐静脉内皮细胞损伤[J]. 梁伟杰,陈君,余盛龙,陈美姬,林佳琼,吴文.  中国动脉硬化杂志. 2017(10)
[2]血管紧张素(1-7)和血管紧张素Ⅱ对THP-1源性泡沫细胞胆固醇外流的影响[J]. 柴婵娟,杨慧宇,杨志明,梁斌,阎丰,武瑞,边云飞.  中国动脉硬化杂志. 2014(09)



本文编号:3595328

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