重组尿酸酶基因工程菌在高尿酸血症大鼠模型中的应用

发布时间：2022-01-20 19:47

　　正常情况下人体内的尿酸维持在动态平衡中,当平衡被打破时,体内尿酸逐渐累积最终发展为高尿酸血症。目前,高尿酸血症的主要治疗方法是使用黄嘌呤氧化酶抑制剂来减少尿酸的产生。但是,在伴随其有效的降尿酸作用的同时还会引发较多不良事件。对于体内异常积累的尿酸除了可减少其来源还可以通过增加其排泄来治疗。因此,成功治疗高尿酸血症的关键之一是增加体内尿酸的排泄。目的:在小组前期实验基础上,将已经构建好的表达尿酸酶的基因工程菌应用于高尿酸血症大鼠模型上,分析工程菌对高尿酸血症大鼠模型中尿酸水平降低的影响及该重组菌的实际应用价值和意义。方法:随机分为5组的实验大鼠均为雄性SPF级SD大鼠,每组10只,共50只。分别为重组尿酸酶大肠杆菌基因工程菌羧甲基纤维素钠溶液灌胃组（E36eu组）、空载体大肠杆菌工程菌羧甲基纤维素钠溶液灌胃组（E36e组）、大肠杆菌羧甲基纤维素钠溶液灌胃组（E组）、羧甲基纤维素钠溶液灌胃组（NS组）、空白对照组（Con组）,其中前4组采用5%果糖水联合注射氧嗪酸钾来构建高尿酸血症模型,Con组为空白对照组。实验进行八周,前四周构建高尿酸血症模型,从第五周开始应用工程菌。每天测量每组大鼠的... 

【文章来源】：重庆医科大学重庆市

【文章页数】：56 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

各组大鼠嗜酸性粒细胞计数（400×）

重庆医科大学硕士研究生学位论文30图2.2各组大鼠小肠组织病理学分析（100×）Figure2.2Histologicalanalysisofintestinaltissueinrats(100×)A:E36eu组;B:E36e组;C:E组;D:NS组;E:Con组2.8各组大鼠肠道内容物分析各组大鼠的小肠肠道内容物经过高通量测序后，通过生物信息学分析肠道内容物，包括OTU聚类分析、Alpha多样性分析、Beta多样性分析以及物种分析。2.8.1OTU聚类分析和Alpha多样性分析图2.3所示是大鼠肠道内容物OTU聚类分析和Alpha多样性分析的结果。结果显示，趋于平滑的稀释曲线表示测序的数据量较合理，并且样品中的大多数微生物可被覆盖。依据图2.3E（Goods_coverage）可知，测序结果可以代表样品的真实情况。由图2.3A、B、C、D（Observed_species、Chao1、Shannon、Simpson）可知，Con和NS组大鼠的肠道内容物的物种丰富度和均匀度相对较高。

重庆医科大学硕士研究生学位论文31图2.3大鼠肠道内容物OTU聚类分析和Alpha多样性分析Figure2.3OTUclusteranalysisandAlphadiversityanalysisoftheintestinalcontentsinratsA:Chao1指数;B:Observed_species指数;C:Shannon指数;D:Simpson指数;E:Goods_coverage指数2.8.2Beta多样性分析和物种分析大鼠肠道内容物Beta多样性分析和物种分析的结果如图2.4、图2.5、图2.6所示。Beta多样性分析和物种分析的结果表明，E36eu组肠道内容物和Con组肠道内容物之间的物种多样性存在差异（图2.4）。根据菌群水平的聚类分析，每组的肠道菌群主要由厚壁菌门、放线菌门、拟杆菌门、变形菌门、梭杆菌门组成（图2.5A和图2.6A）。Con组的肠道内容物和NS组的肠道内容物菌落组成相似，而Con组肠道内容物和E36eu组肠道内容物的菌落组成不同。根据属水平聚类分析，每组肠道内容物菌落的组成和丰度都不同（图2.5B和图2.6B）。以上实验结果表明，工程菌成功在模型大鼠肠道定植，并对小肠肠道菌群结构及物种多样性产生影响。

【参考文献】：
期刊论文
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硕士论文
[1]重组尿酸酶基因工程菌的构建与表达及应用模型的筛选[D]. 李琴.重庆医科大学 2018



本文编号：3599416