改良大鼠缺血缺氧创面模型的实验研究
发布时间：2022-01-21 16:48
目的:针对慢性创面发生机制的研究已成为临床研究的热点之一,局部组织的缺血缺氧为大多数慢性创面的这一共同特点被众多学者普遍接受;目前在动物体表人为进行皮瓣的设计和切取,改变创面的局部血供模式,已经被证实是制备缺血缺氧创面动物模型的经典且有效方法。本研究对目前广泛采用的“大鼠背双蒂皮瓣模型”进行改良,力求探索一种更为突出的缺血缺氧特征,且制备方法更加简便的大鼠缺血缺氧创面模型,为基于动物模型的研究提供多一种选择。方法:通过对SD雄鼠采用传统背侧矩形双蒂皮瓣法建立缺血缺氧创面模型,并完全离断皮瓣浅筋膜层和由深筋膜层之间所有垂直发出的血管穿支,并根据实验不同特性随机分为4组:A组,经典单个创面且创基浅筋膜保留组;B组,经典单个创面且创基浅筋膜去除组;C组,改良三创面(C头、C中、C尾)创基浅筋膜保留组;D组,改良三创面(D头、D中、D尾)创基浅筋膜去除组。观察各组创面愈合情况;通过HE和Masson染色进行组织形态学研究,以及免疫组织化学法对创面中HIF-1α、C...
【文章来源】：遵义医科大学贵州省
【文章页数】：49 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
大鼠背部皮瓣血供.a.c.示胸背动脉，b.示顶支，d,g,示肋间后动脉，e,f,示旋髂深动脉，这些血管进入鼠背部后在深筋膜与浅筋膜间交汇形成毛细血管网
遵义医科大学硕士学位论文刘梅君12旋髂深动脉、双侧胸背动脉发出的顶支在浅筋膜层内的形成的链状链接，以及各穿支发出的深入真皮下形成的终末毛细血管网（图2）。图2：动物模型的制备A.离断皮瓣下方深筋膜层与浅筋膜层间的所有穿支，B.完全抬高皮瓣，持针器夹持为深筋膜。上述操作完成后随机将所有实验大鼠分为4组，每组8只：A组，经典单个全层皮肤缺损创面浅筋膜保留组，即于皮瓣正中央去除全层皮肤组织，形成直径为1cm圆形创面，保留创面基底浅筋膜；B组，经典单个全层皮肤缺损创面浅筋膜去除组，即于皮瓣正中央去除全层皮肤组织，形成直径为1cm圆形创面，同时去除创面基底浅筋膜；C组，改良三个全层皮肤缺损创面浅筋膜保留组，即在A组的操作基础上，头尾两端，距创面边缘2cm分别等距离再形成两个同样大小全层皮肤缺损创面，即形成3个相同直径为1cm圆形创面，均保留创面基底浅筋膜，从大鼠头端至尾端分别命名为，C头、C中、C尾组；D组，改良三创面全层皮肤缺损创面浅筋膜去除组，在C组的基础上完成3个直径为1cm圆形创面后，均去除各个创面基底浅筋膜，从大鼠头端至尾端分别命名为D头、D中、D尾组。各组模型制备完成后，双蒂皮瓣长轴边缘各等间距，予以4-0丝线全层间断缝合固定（图3），再次消毒后医用纱布覆盖，做好明显区分标记。建模完成后为防止大鼠相互搔抓、撕咬，从而对实验结果产生影响，故所有实验大鼠均予以单笼相同条件下独立饲养。
遵义医科大学硕士学位论文刘梅君13图3：四组模型建立完成，依次为A、B、C、D四组，图C各创面由上至下依次标记为C头、C中、C尾组，图D各创面由上至下依次标记为D头、D中、D尾组。1.4.2创面愈合情况观察及评估实验大鼠模型制备完成后，从术后第1、5、9、13、17、21天观察创面愈合情况，并使用直角伤口尺放置于创缘进行拍照记录。实验采取双盲设计，故由课题组未参与动物模型制备的人员测量创面并记录，使用ImageJ软件计算剩余未愈合创面面积，计算比较不同组别创面愈合率及其愈合快慢趋势。持续观察直至所有创面均完成愈合，并详细记录所有创面愈合所需要的时间（单位/天）。1.4.3缺血缺氧创面组织取材考虑到各组模型多创面愈合时间先后顺序不同，分别于术后A组所有创面完全愈合时（T1）、B组创面完全愈合时（T2）以及C组所有创面中出现愈合创面时（T3）三个特定时间点，在圆形创面于大鼠长轴平行的3点及9点钟方向，距离创缘5mm为顶点，楔形切取涵盖已愈合创面区域内的组织块（图4），生理盐水反复冲洗，滤纸吸干后，4%中性甲醛内固定48h后进行石蜡包埋，切片机切片，全程做好标记。
【参考文献】：
期刊论文
[1]不同类型瘢痕中HIF-1α的表达及其炎性因子的相关性分析[J]. 张明子,王晨羽,管恩玲,陈志雄,龙飞,俞楠泽,斯楼斌,黄久佐,龙笑,王晓军. 中国美容整形外科杂志. 2017(06)
[2]大鼠背部穿支体区间choke血管变化规律初探[J]. 胡斯旺,庄跃宏,崔怀瑞,黄美贤,唐茂林,徐达传. 中国临床解剖学杂志. 2014(05)
[3]医学科学研究中实验动物的选择和应用[J]. 施新猷. 上海实验动物科学. 1984(01)
本文编号：3600625
【文章来源】：遵义医科大学贵州省
【文章页数】：49 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
大鼠背部皮瓣血供.a.c.示胸背动脉，b.示顶支，d,g,示肋间后动脉，e,f,示旋髂深动脉，这些血管进入鼠背部后在深筋膜与浅筋膜间交汇形成毛细血管网
遵义医科大学硕士学位论文刘梅君12旋髂深动脉、双侧胸背动脉发出的顶支在浅筋膜层内的形成的链状链接，以及各穿支发出的深入真皮下形成的终末毛细血管网（图2）。图2：动物模型的制备A.离断皮瓣下方深筋膜层与浅筋膜层间的所有穿支，B.完全抬高皮瓣，持针器夹持为深筋膜。上述操作完成后随机将所有实验大鼠分为4组，每组8只：A组，经典单个全层皮肤缺损创面浅筋膜保留组，即于皮瓣正中央去除全层皮肤组织，形成直径为1cm圆形创面，保留创面基底浅筋膜；B组，经典单个全层皮肤缺损创面浅筋膜去除组，即于皮瓣正中央去除全层皮肤组织，形成直径为1cm圆形创面，同时去除创面基底浅筋膜；C组，改良三个全层皮肤缺损创面浅筋膜保留组，即在A组的操作基础上，头尾两端，距创面边缘2cm分别等距离再形成两个同样大小全层皮肤缺损创面，即形成3个相同直径为1cm圆形创面，均保留创面基底浅筋膜，从大鼠头端至尾端分别命名为，C头、C中、C尾组；D组，改良三创面全层皮肤缺损创面浅筋膜去除组，在C组的基础上完成3个直径为1cm圆形创面后，均去除各个创面基底浅筋膜，从大鼠头端至尾端分别命名为D头、D中、D尾组。各组模型制备完成后，双蒂皮瓣长轴边缘各等间距，予以4-0丝线全层间断缝合固定（图3），再次消毒后医用纱布覆盖，做好明显区分标记。建模完成后为防止大鼠相互搔抓、撕咬，从而对实验结果产生影响，故所有实验大鼠均予以单笼相同条件下独立饲养。
遵义医科大学硕士学位论文刘梅君13图3：四组模型建立完成，依次为A、B、C、D四组，图C各创面由上至下依次标记为C头、C中、C尾组，图D各创面由上至下依次标记为D头、D中、D尾组。1.4.2创面愈合情况观察及评估实验大鼠模型制备完成后，从术后第1、5、9、13、17、21天观察创面愈合情况，并使用直角伤口尺放置于创缘进行拍照记录。实验采取双盲设计，故由课题组未参与动物模型制备的人员测量创面并记录，使用ImageJ软件计算剩余未愈合创面面积，计算比较不同组别创面愈合率及其愈合快慢趋势。持续观察直至所有创面均完成愈合，并详细记录所有创面愈合所需要的时间（单位/天）。1.4.3缺血缺氧创面组织取材考虑到各组模型多创面愈合时间先后顺序不同，分别于术后A组所有创面完全愈合时（T1）、B组创面完全愈合时（T2）以及C组所有创面中出现愈合创面时（T3）三个特定时间点，在圆形创面于大鼠长轴平行的3点及9点钟方向，距离创缘5mm为顶点，楔形切取涵盖已愈合创面区域内的组织块（图4），生理盐水反复冲洗，滤纸吸干后，4%中性甲醛内固定48h后进行石蜡包埋，切片机切片，全程做好标记。
【参考文献】：
期刊论文
[1]不同类型瘢痕中HIF-1α的表达及其炎性因子的相关性分析[J]. 张明子,王晨羽,管恩玲,陈志雄,龙飞,俞楠泽,斯楼斌,黄久佐,龙笑,王晓军. 中国美容整形外科杂志. 2017(06)
[2]大鼠背部穿支体区间choke血管变化规律初探[J]. 胡斯旺,庄跃宏,崔怀瑞,黄美贤,唐茂林,徐达传. 中国临床解剖学杂志. 2014(05)
[3]医学科学研究中实验动物的选择和应用[J]. 施新猷. 上海实验动物科学. 1984(01)
本文编号：3600625
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