Omentin-1对H 2 O 2 诱导的PC12细胞损伤的影响及机制研究
发布时间：2022-02-22 14:50
背景:缺血性脑损伤是由于局部脑组织血供受阻,导致不可逆性的神经功能缺损甚至死亡的疾病。在全世界,它是成人第一大致残原因和第二大致死原因。国内外学者每年都投入了大量的人力和物力来研究其防治及改善预后的方法,但及时有效的防治及预后的方法仍然有限。脑缺血缺氧可引起氧化应激（OS）,OS可破坏细胞膜、蛋白质及DNA,Caspase-3被激活,从而促进神经元细胞凋亡,并参与缺血性脑损伤的发病机制中。因此,预防氧化应激诱导的神经元细胞凋亡是治疗缺血性脑损伤的重要策略。Omentin-1是一种新发现的脂肪因子,很多研究发现循环omentin-1在各种疾病的病理生理过程中发挥重要调控作用,并具有抗炎、抗氧化、抗凋亡等作用。Omentin-1可能成为判断急性缺血性脑卒中的风险及严重程度的生物指标,近来体内研究发现omentin-1不仅能够抑制缺血后心肌细胞凋亡,还能抑制缺血后神经元细胞的凋亡。但是omentin-1对缺血性脑损伤中氧化应激诱导凋亡的影响尚不清楚,因此本研究探讨了omentin-1对H2O2诱导的PC12细胞氧化应激损伤的影响。将为本课题的下一步...
【文章来源】：延安大学陕西省
【文章页数】：54 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
引言
第一章 实验材料
2.1 主要细胞
2.2 主要试剂
2.3 主要仪器
2.4 主要试剂的配制
第二章 实验方法
3.1 PC12细胞培养
3.1.1 PC12细胞的复苏
3.1.2 细胞换液
3.1.3 细胞传代
3.1.4 细胞冻存
3.2 细胞计数法
3.2.1 细胞计数
3.2.2 计算公式
3.3 过氧化氢损伤PC12细胞模型的构建
3.3.1 CCK-8的实验原理
3.3.2 实验步骤
3.4 CCK-8法检测不同浓度梯度omentin-1对PC12细胞生存的影响
3.5 不同浓度omentin-1预处理1 h对过氧化氢H_2O_2诱导PC12细胞损伤后的影响
3.5.1 CCK-8法检测各组细胞活力
3.5.2 TUNEL法检测各组细胞凋亡情况
3.6 活性氧ROS的检测
3.7 提取各组细胞总蛋白
3.8 Western blotting 法检测各组Bcl-2、Caspase-3、Bax蛋白的表达水平
3.8.1 实验原理
3.8.2 实验步骤
3.9 统计学处理
第三章 结果
4.1 H_2O_2损伤PC12细胞模型的建立
4.1.1 过氧化氢对PC12细胞形态的影响
4.1.2 不同浓度H_2O_2对PC12细胞存活率的影响
4.2 不同浓度omentin-1预处理对H_2O_2诱导PC12细胞损伤后细胞活力的影响
4.2.1 不同浓度omentin-1预处理对H_2O_2诱导PC12细胞损伤后细胞形态的变化
4.2.2 不同浓度omentin-1处理不同时间对PC12的细胞的细胞毒性作用
4.2.3 CCK-8法检测不同浓度omentin-1预处理对H_2O_2损伤的PC12细胞生存的影响
4.2.4 TUNEL法检测不同浓度omentin-1预处理对H_2O_2损伤PC12细胞凋亡的影响
4.4 各组细胞活性氧ROS的检测
4.5 Omentin-1处理后各组Bcl-2、Caspase-3、Bax凋亡相关蛋白的表达量
4.5.1 Omentin-1 对 H_2O_2 损伤 PC12 细胞后 Bcl-2、Caspase-3、Bax 凋亡相关蛋白的表达。
4.5.2 Omentin-1对PC12细胞Bcl-2、Caspase-3、Bax凋亡相关蛋白表达的影响
第四章 讨论
第五章 结论
参考文献
文献综述
参考文献
致谢
攻读硕士学位期间的研究成果
【参考文献】：
期刊论文
[1]用奥拉西坦注射液联合丹红注射液对老年脑梗死患者进行治疗的效果[J]. 英信华. 当代医药论丛. 2019(02)
[2]脂肪因子omentin-1与多囊卵巢综合征的相关性[J]. 刘聪,李丽玮,韩研,董丽霞,殷秀荣. 生殖医学杂志. 2018(11)
[3]阿尔茨海默病与氧化应激的研究进展[J]. 方威,胡国章,刘乃杰. 中国老年学杂志. 2017(20)
[4]网膜素改善氧化应激对人动脉血管平滑肌细胞Ⅰ、Ⅳ型胶原表达的抑制作用[J]. 郑辉,刘慧娟,葛焕琦,张春风,胡睿,李雪粉. 中国动脉硬化杂志. 2016(02)
[5]常见缺血性卒中发病机制和病理学特点[J]. 卢德宏,付永娟. 中国现代神经疾病杂志. 2015(02)
[6]丙酮酸对过氧化氢诱发PC12细胞损伤的保护作用[J]. 安丽荣,郭艳芹,金连弘,傅松斌. 中国老年学杂志. 2009(13)
[7]缺氧缺血性脑损伤的发病机制研究进展[J]. 谢集建. 国外医学.妇幼保健分册. 2002(01)
本文编号：3639668
【文章来源】：延安大学陕西省
【文章页数】：54 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
引言
第一章 实验材料
2.1 主要细胞
2.2 主要试剂
2.3 主要仪器
2.4 主要试剂的配制
第二章 实验方法
3.1 PC12细胞培养
3.1.1 PC12细胞的复苏
3.1.2 细胞换液
3.1.3 细胞传代
3.1.4 细胞冻存
3.2 细胞计数法
3.2.1 细胞计数
3.2.2 计算公式
3.3 过氧化氢损伤PC12细胞模型的构建
3.3.1 CCK-8的实验原理
3.3.2 实验步骤
3.4 CCK-8法检测不同浓度梯度omentin-1对PC12细胞生存的影响
3.5 不同浓度omentin-1预处理1 h对过氧化氢H_2O_2诱导PC12细胞损伤后的影响
3.5.1 CCK-8法检测各组细胞活力
3.5.2 TUNEL法检测各组细胞凋亡情况
3.6 活性氧ROS的检测
3.7 提取各组细胞总蛋白
3.8 Western blotting 法检测各组Bcl-2、Caspase-3、Bax蛋白的表达水平
3.8.1 实验原理
3.8.2 实验步骤
3.9 统计学处理
第三章 结果
4.1 H_2O_2损伤PC12细胞模型的建立
4.1.1 过氧化氢对PC12细胞形态的影响
4.1.2 不同浓度H_2O_2对PC12细胞存活率的影响
4.2 不同浓度omentin-1预处理对H_2O_2诱导PC12细胞损伤后细胞活力的影响
4.2.1 不同浓度omentin-1预处理对H_2O_2诱导PC12细胞损伤后细胞形态的变化
4.2.2 不同浓度omentin-1处理不同时间对PC12的细胞的细胞毒性作用
4.2.3 CCK-8法检测不同浓度omentin-1预处理对H_2O_2损伤的PC12细胞生存的影响
4.2.4 TUNEL法检测不同浓度omentin-1预处理对H_2O_2损伤PC12细胞凋亡的影响
4.4 各组细胞活性氧ROS的检测
4.5 Omentin-1处理后各组Bcl-2、Caspase-3、Bax凋亡相关蛋白的表达量
4.5.1 Omentin-1 对 H_2O_2 损伤 PC12 细胞后 Bcl-2、Caspase-3、Bax 凋亡相关蛋白的表达。
4.5.2 Omentin-1对PC12细胞Bcl-2、Caspase-3、Bax凋亡相关蛋白表达的影响
第四章 讨论
第五章 结论
参考文献
文献综述
参考文献
致谢
攻读硕士学位期间的研究成果
【参考文献】：
期刊论文
[1]用奥拉西坦注射液联合丹红注射液对老年脑梗死患者进行治疗的效果[J]. 英信华. 当代医药论丛. 2019(02)
[2]脂肪因子omentin-1与多囊卵巢综合征的相关性[J]. 刘聪,李丽玮,韩研,董丽霞,殷秀荣. 生殖医学杂志. 2018(11)
[3]阿尔茨海默病与氧化应激的研究进展[J]. 方威,胡国章,刘乃杰. 中国老年学杂志. 2017(20)
[4]网膜素改善氧化应激对人动脉血管平滑肌细胞Ⅰ、Ⅳ型胶原表达的抑制作用[J]. 郑辉,刘慧娟,葛焕琦,张春风,胡睿,李雪粉. 中国动脉硬化杂志. 2016(02)
[5]常见缺血性卒中发病机制和病理学特点[J]. 卢德宏,付永娟. 中国现代神经疾病杂志. 2015(02)
[6]丙酮酸对过氧化氢诱发PC12细胞损伤的保护作用[J]. 安丽荣,郭艳芹,金连弘,傅松斌. 中国老年学杂志. 2009(13)
[7]缺氧缺血性脑损伤的发病机制研究进展[J]. 谢集建. 国外医学.妇幼保健分册. 2002(01)
本文编号：3639668
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