miR-130b通过PI3K/Akt信号通路靶向调控PTEN在乳腺癌多药耐药中的研究

发布时间：2022-04-23 18:10

　　目的:通过研究mi R-130b和PTEN在乳腺癌组织及细胞株中的差异表达,阐明miR-130b靶向PTEN通过PI3K/Akt信号通路调控乳腺癌多药耐药性及增殖的功能机制,为乳腺癌治疗提供新的策略。方法:（1）通过qRT–PCR检测miR-130b和PTEN在乳腺癌组织（乳腺癌组织和癌旁正常组织）及细胞株（人乳腺癌细胞株MCF-7和人乳腺癌耐阿霉素细胞株MCF-7/ADR）中的差异表达。（2）特异性上调MCF-7细胞中的mi R-130b、下调MCF-7/ADR中的miR-130b,采用real-time PCR、Western Blot、免疫荧光技术检测过表达、干扰前后MCF-7、MCF-7/ADR细胞中PTEN的表达情况。（3）采用生物信息学技术及双荧光素酶报告实验验证miR-130b与PTEN的靶向关系。（4）采用CCK8、克隆形成、流式细胞技术、免疫荧光、体内成瘤及免疫组化技术验证miR-130b过表达及干扰后,乳腺癌细胞在体内、外对药物敏感性及增殖的变化。（5）特异性上调MCF-7中miR-130b和PTEN,下调MCF-7/ADR中的miR-130b和PTEN,检测共转染... 

【文章页数】：49 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
英文摘要
前言
材料和方法
    1. 实验材料
        1.1 实验对象
        1.2 主要试剂
        1.3 主要仪器
    2. 实验方法
        2.1 患者标本
        2.2 细胞培养
        2.3 Real-time PCR
        2.4 免疫印迹分析
        2.5 PTEN和miR-130b的过表达、干扰
        2.6 双荧光素酶报告实验
        2.7 CCK8实验
        2.8 克隆形成实验
        2.9 凋亡实验
        2.10 免疫荧光染色分析
        2.11 体内成瘤实验
        2.12 免疫组化分析
        2.13 统计分析
结果
    1. miR-130b在人乳腺癌组织及细胞中的差异表达
    2. PTEN是miR-130b的直接靶基因，且与miR-130b的表达呈负相关
    3. 过表达miR-130b促进MCF-7 细胞体内外耐药和增殖
    4. 下调miR-130b诱导MCF-7/ADR细胞体内外药敏性及抑制增殖
    5. 过表达miR-130b通过PTEN-PI3K/Akt信号通路促进MCF-7 细胞耐药和增殖
    6.下调miR-130b通过PTEN-PI3K/Akt信号通路抑制MCF-7/ADR细胞耐药和增殖
讨论
结论
参考文献
综述
    参考文献
攻读学位期间发表文章情况
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]Regulation of multidrug resistance by microRNAs in anti-cancer therapy[J]. Xin An,Cesar Sarmiento,Tao Tan,Hua Zhu.  Acta Pharmaceutica Sinica B. 2017(01)
[2]Onco-microRNA miR-130b promoting cell growth in children APL by targeting PTEN[J]. Xiang-Cui Gong,Yuan-Qin Xu,Yan Jiang,Hui Guan,Hua-Lin Liu.  Asian Pacific Journal of Tropical Medicine. 2016(03)



本文编号：3647715