沙棘叶结合态多酚中抗肿瘤活性成分的分离纯化及成分分析

发布时间：2022-07-08 14:39

　　结肠癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一。根据2018年的最新数据,结肠癌的发病率位居世界第三位,死亡率居第二位。治疗结肠癌的传统方法主要是手术结合术后化疗。其易复发,毒性大,副作用大是癌症患者死亡的最大原因。天然产物因其具有无毒无副作用,对于肿瘤的治疗具有显著效果。因此,包括多酚,白藜芦醇,青蒿素等在内的,从植物中提取的天然产物已成为人们关注的热点。沙棘,又称为醋柳,为胡颓子科沙棘属多年生落叶灌木或小乔木,主要分布在欧亚大陆的广大地区,在我国主要分布于华北、西北、西南等地。沙棘是非常珍贵的药食同源植物,于1977年首次被列入《中华人民共和国药典》。《中医大辞典》记载沙棘果具有活血散瘀,补脾健胃,生津止渴,清热止泻之功效。研究显示,沙棘的果实、叶和种子中均含有丰富的营养物质和生物活性成分,如多种维生素、氨基酸、不饱和脂肪酸、黄酮类、微量元素和5-羟色胺等。特别是沙棘及沙棘叶中富含的多酚类化合物具有抗氧化、抗炎、抗菌及抗肿瘤等医药功能,对多种慢性病具有良好的预防作用。植物多酚作为自然界中大量存在的物质,非常易得,更难得的是无毒无害,具有抗菌抗炎,抗病毒,降压降脂,预防糖尿病,心脑血管疾病等多种... 

【文章页数】：70 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
ABSTRACT
第一章 文献综述
    1 沙棘的分布及开发现状
    2 植物多酚
        2.1 植物多酚的生理功能
            2.1.1 抗氧化作用
            2.1.2 抗菌消炎,抗病毒
            2.1.3 预防心脑血管疾病
            2.1.4 抗癌作用
        2.2 植物多酚的提取方法
            2.2.1 溶剂浸提法
            2.2.2 超声辅助提取
            2.2.3 微波辅助提取法
            2.2.4 双水相萃取法
            2.2.5 超临界流体萃取技术
        2.3 植物多酚的分离纯化
    3 沙棘叶多酚研究现状
    4 植物多酚调控肿瘤糖代谢重塑的研究现状
    5 研究思路
第二章 沙棘叶自由态多酚的提取及活性比较
    1 引言
    2 实验材料与方法
        2.1 材料与试剂
        2.2 细胞培养
        2.3 试剂
        2.4 主要实验仪器
        2.5 主要试剂的配制
        2.6 实验方法
            2.6.1 沙棘叶自由态多酚的提取
            2.6.2 沙棘叶多酚,黄酮及缩合单宁含量的测定
            2.6.3 沙棘叶自由态多酚对结肠癌细胞活力的初步鉴定
            2.6.4 数据的统计学分析
    3 结果
        3.1 不同溶剂提取的沙棘叶中总多酚、黄酮、缩合单宁的含量
        3.2 不同溶剂提取的沙棘叶自由态多酚对HCT-116 细胞的增殖抑制作用
    4 讨论
    5 小结
第三章 沙棘叶结合态多酚的提取及活性比较
    1 引言
    2 实验材料与方法
        2.1 材料与试剂
        2.2 细胞培养
        2.3 试剂
        2.4 主要实验仪器
        2.5 主要试剂的配制
        2.6 实验方法
            2.6.1 沙棘叶结合态多酚的提取
            2.6.2 沙棘叶结合态多酚,黄酮及缩合单宁含量的测定
            2.6.3 沙棘叶结合态多酚对结肠癌细胞活力的初步鉴定
            2.6.4 数据的统计学分析
    3 结果
        3.1 不同提取方法对沙棘叶结合态多酚含量的影响
        3.2 沙棘叶结合态多酚对HCT-116 细胞的增殖抑制作用
    4 讨论
    5 小结
第四章 沙棘叶多酚大孔树脂的分离纯化
    1 引言
    2 实验材料与方法
        2.1 材料与试剂
        2.2 主要实验仪器
        2.3 试验方法
            2.3.1 树脂预处理
            2.3.2 不同大孔树脂吸附试验
            2.3.3 不同大孔树脂解吸试验
            2.3.4 沙棘叶多酚的组分鉴定
    3 结果与分析
        3.1 树脂的确定
        3.2 沙棘叶结合态多酚抗肿瘤活性成分的纯化
        3.3 高效液相色谱对活性成分进行鉴定
            3.3.1 五种沙棘叶自由态多酚成分鉴定结果
            3.3.2 酸解法和碱解法结合态多酚成分鉴定结果
            3.3.3 不同乙醇浓度洗脱的大孔树脂纯化的沙棘叶结合态多酚的成分鉴定结果
    4 讨论
    5 小结
第五章 沙棘叶多酚对肿瘤糖代谢的调控作用
    1 引言
    2 实验材料与方法
        2.1 细胞株
        2.2 主要仪器及试剂配制
            2.2.1 主要仪器
            2.2.2 主要试剂及配制
        2.3 细胞培养
        2.4 丙酮酸含量测定
        2.5 乳酸含量测定
        2.6 ATP水平测定
        2.7 总蛋白提取
        2.8 SDS-PAGE
        2.9 统计学分析
    3 实验结果
        3.1 沙棘叶结合态多酚对HCT-116 细胞乳酸生成量的影响
        3.2 沙棘叶结合态多酚对HCT-116 细胞ATP生成量的影响
        3.3 沙棘叶结合态多酚对细胞HCT-116 丙酮酸活性的影响
        3.4 沙棘叶结合态多酚对HCT-116 细胞表达的影响
    4 小结
总结与展望
参考文献
攻读学位期间取得的研究成果
致谢
个人简历及联系方式


【参考文献】：
期刊论文
[1]沙棘果生物活性成分及其功能的研究进展[J]. 董诗婷,陈云,高群玉.  中国酿造. 2020(02)
[2]沙棘植物资源分布与营养学应用综述[J]. 卢顺光,卢健,温秀凤.  中国水土保持. 2019(07)
[3]构建山西省沙棘产业技术创新战略联盟的思考[J]. 陈春.  林业经济. 2018(10)
[4]沙棘籽提取物抑菌能力的研究及其生物活性成分分析[J]. 扎格乐,边鑫,赵莉,徐敏,王娜娜,霍贵成.  中国酿造. 2016(08)
[5]山西沙棘资源及生境初步分析[J]. 侯霄,卫罡,李晓艳,尤利霞,李宋玲,郑津英.  国际沙棘研究与开发. 2014(04)
[6]沙棘的研究开发评述及其重要意义[J]. 刘勇,廉永善,王颖莉,李旻辉,肖培根.  中国中药杂志. 2014(09)
[7]植物源多酚类化合物活性研究进展及其应用[J]. 庞道睿,刘凡,廖森泰,孙远明.  广东农业科学. 2013(04)
[8]昆明市小学生龋病与饮食情况的关系调查分析[J]. 杜琳玲,冯娟,田为毅,王晓洁,欧阳欣.  昆明医科大学学报. 2012(11)
[9]昆明市区12岁儿童龋病调查及影响因素分析[J]. 欧阳欣,朱瑾,冯娟,田为毅,杜琳玲.  昆明医科大学学报. 2012(07)
[10]丙酮酸激酶前mRNA可变剪接的调控在肿瘤代谢中的作用和意义[J]. 许佳佳,连文昌,李招发.  生物技术通讯. 2012(01)

博士论文
[1]黄参茎叶多酚组分分析及生物活性研究[D]. 马婷婷.陕西师范大学 2017
[2]玫瑰花渣中多酚的超声辅助提取制备、组分分析及其生物活性研究[D]. 张娟梅.南京农业大学 2014
[3]荔枝果肉多酚的分离鉴定及其调节脂质代谢作用机制[D]. 苏东晓.华中农业大学 2014
[4]石榴叶多酚的提取富集工艺及其药理作用研究[D]. 王彩云.北京林业大学 2013
[5]沙棘籽原花色素的研究[D]. 樊金玲.江南大学 2006

硕士论文
[1]蓝莓叶多酚分离纯化、结构及抗氧化活性的研究[D]. 冯进.南京农业大学 2013
[2]沙棘有效成分动态变化研究[D]. 李晓花.吉林农业大学 2003



本文编号：3657209