鞣花酸对人胰腺癌PANC-1细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制的实验研究

发布时间：2017-05-15 13:01

  本文关键词：鞣花酸对人胰腺癌PANC-1细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制的实验研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的：观察鞣花酸对人胰腺癌PANC-1细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制,为鞣花酸的临床应用提供实验依据。方法：(1)体外培养人胰腺癌PANC-1细胞24h后,加入终浓度为0 μ g/ml(阴性对照组)、2 μ g/ml、4 μ g/ml、6 μ g/ml、8μ g/ml的鞣花酸作用于细胞24h、48h、72h后,倒置显微镜观察各加药组细胞形态的变化,MTT法测定不同浓度组鞣花酸对细胞增殖的影响。(2)体外培养人胰腺癌PANC-1细胞24h后,加入终浓度为0 μ g/ml(阴性对照组)、2μ g/ml、4 μ g/ml、6 μ g/ml的鞣花酸作用于细胞24h、48h、72h后:①Hoechst33258荧光染色法观察不同浓度组鞣花酸对细胞凋亡的形态学影响。②Annexin V-FITC/PI 双染法检测各浓度组鞣花酸对细胞凋亡率的影响。③PI法检测各浓度组鞣花酸对细胞周期的影响。④Western blot法检测不同浓度组鞣花酸对细胞COX-2和NF-κB (p65)蛋白表达的影响。结果：(1)倒置显微镜下观察：随着鞣花酸药物浓度的增加和作用时间的延长,PANC-1细胞变圆、皱缩、碎裂,培养板中脱落细胞逐渐增多,贴壁细胞逐渐减少。MTT法结果显示：鞣花酸对PANC-1细胞的增殖抑制作用随着药物浓度的增加和作用时间的延长而逐渐增强,差异均有统计学意义(P0.05)。(2)①Hoechst33258荧光染色法结果显示：随着鞣花酸药物浓度的增加和作用时间的延长,PANC-1细胞的数量逐渐减少,且核固缩、破裂的细胞,即凋亡细胞的数量逐渐增多,差异均有统计学意义(P0.05)。②Annexin V-FITC/PI双染法结果显示：鞣花酸可显著地促进PANC-1细胞凋亡,且呈明显的时间和浓度依赖趋势,差异均有统计学意义(P0.05)。③PI法结果显示：鞣花酸可诱导PANC-1细胞发生G1期阻滞,且呈明显的时间和浓度依赖趋势,差异均有统计学意义(P0.05)。④Western blot法结果显示：加药组细胞COX-2、NF-κB (p65)的蛋白表达与阴性对照组比较明显降低,且药物浓度越高、作用时间越长,蛋白表达越低。结论：鞣花酸在体外对人胰腺癌PANC-1细胞有显著的抑制增殖和促进凋亡作用,且呈明显的时间和浓度依赖关系,其作用机制可能与鞣花酸可阻滞细胞周期、下调COX-2、 NF-κB的蛋白表达有关。
【关键词】：鞣花酸 胰腺癌 细胞增殖 细胞凋亡 作用机制
【学位授予单位】：东南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R285
【目录】：

• 中文摘要4-6
• 英文摘要6-8
• 缩略词表8-10
• 前言10-12
• 综述12-20
• 参考文献16-20
• 1 材料20-22
• 2 方法22-31
• 3 结果31-46
• 4 讨论46-49
• 5 结论49-50
• 6 总结与展望50-51
• 参考文献51-55
• 致谢55-57
• 个人简介57

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本文编号：367810