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灯盏花素改善胰岛素抵抗作用机制网络药理学分析及实验验证

发布时间:2022-12-11 03:02
  目的:运用网络药理学方法建立灯盏花素改善胰岛素抵抗的“活性成分-靶点-疾病”网络,明确靶点相应的生物功能和信号通路,对灯盏花素抗胰岛素抵抗的作用机制进行科学阐释,筛选可用于其质量评价的功能靶标并进行验证,为后续的研究及其临床应用奠定实验基础。方法:通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)结合文献挖掘确定灯盏花素的主要活性成分,多个数据库联用检索和筛选活性成分对应靶点,构建“活性成分-靶点-疾病”交互网络,并通过SystemsDock web site对其进行对接验证,利用生物学信息注释数据库(DAVID)结合ClueGO插件对靶点生物功能及涉及的通路进行关联分析。基于网络分析结果,我们成功建立了HepG2细胞胰岛素抵抗模型,采用葡萄糖氧化酶法(GOD-POD)检测灯盏花素对细胞葡萄糖消耗量的影响;油红O染色观察细胞形态及胞内脂滴形成情况;以细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测细胞活性;通过qRTPCR和Western blot法观察经灯盏花素处理后胰岛素抵抗HepG2细胞中PTP1B、AKT以及p-AKT的表达变化。结果:经数据库检索及文献查证,灯盏花素主要活性成分为灯盏乙素,... 

【文章页数】:62 页

【学位级别】:硕士

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前言
第一部分 基于网络药理学的灯盏花素改善胰岛素抵抗作用机制分析
    1 资料与方法
        1.1 软件与数据库
        1.2 化学成分的获取与活性成分的确定
        1.3 活性成分作用靶点的获取
        1.4 胰岛素抵抗相关作用靶点的筛选
        1.5 网络构建与分析
        1.6 分子对接验证
        1.7 生物功能和通路富集分析
    2 结果
        2.1 灯盏花素活性成分和靶点筛选
        2.2 网络构建与可视化分析
        2.3 分子对接结果
        2.4 生物功能与通路分析
    3 讨论
        3.1 中药与网络药理学结合研究的可行性
        3.2 灯盏花素改善胰岛素抵抗作用机制网络药理学分析
第二部分 灯盏花素对HepG2 细胞胰岛素抵抗模型作用及机制初探
    1 材料与方法
        1.1 材料
        1.2 实验方法
    2 结果
        2.1 HepG2 细胞胰岛素抵抗模型的建立
        2.2 灯盏花素对各组细胞增殖的影响
        2.3 灯盏花素对IR-HepG2 细胞葡萄糖消耗的影响
        2.4 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)
        2.5 Western blot
    3 讨论
        3.1 IR-HepG2 细胞模型的建立
        3.2 灯盏花素对IR-HepG2 细胞葡萄糖消耗的影响
        3.3 灯盏花素对IR-HepG2 细胞模型相关蛋白和基因表达的影响
    4 结论
参考文献
综述
    参考文献
致谢
个人简介


【参考文献】:
期刊论文
[1]虫草头孢提取物Fr.8组分对HepG-2胰岛素抵抗的改善作用[J]. 韩一凤,耿燕,孟照敏,杜妍,许泓瑜,史劲松,许正宏.  食品与生物技术学报. 2019(03)
[2]毛蕊异黄酮葡萄糖苷与葛根素及其配伍对胰岛素抵抗脂肪细胞氧化应激的影响[J]. 刘丽,宋囡,李军,刘倩,范颖.  辽宁中医杂志. 2019(01)
[3]三叶糖脂清DPP-4抑制成分筛选及其调控JNK/AKT信号通路改善胰岛素抵抗的机制研究[J]. 石蔚华,赵筱萍,陈晓玲.  浙江中医药大学学报. 2019(01)
[4]黄秋葵醇提物对2型糖尿病小鼠胰岛素抵抗的影响[J]. 吴勇梅,韦玉燕,梁韬.  实用药物与临床. 2018(12)
[5]玉米须水煎液对Ⅱ型糖尿病大鼠胰岛素抵抗的影响[J]. 吴晨曦,董文婷,霍金海,王伟明.  中药药理与临床. 2018(06)
[6]橄榄苦苷对胰岛素抵抗HepG2肝细胞胰岛素信号传导的影响[J]. 杨双,徐继璞.  中国实验方剂学杂志. 2018(20)
[7]虫草素预防肥胖及通过ADORA1介导GH3细胞中泌乳素分泌研究[J]. 李燕,徐红月,李树林,王雪艳,唐旭东,于录.  中国畜牧兽医. 2018(05)
[8]HepG2胰岛素抵抗细胞模型的诱导及其在生物活性评价中的应用[J]. 宋皓,牛庆川,李玉萍.  天然产物研究与开发. 2018(08)
[9]苦瓜水提物和醇提物对HepG2细胞胰岛素抵抗的调节作用[J]. 祝莹,罗远平,白娟,张易,肖香,董英.  现代食品科技. 2018(05)
[10]基于网络药理学养阴清肺口服液对肺损伤的保护作用及机制研究[J]. 潘国凤,罗然,吕文英,沈建武,成龙.  中药药理与临床. 2018(01)

博士论文
[1]TNF-α诱导肝细胞胰岛素抵抗的机制研究:NADPH氧化酶3源性活性氧的作用[D]. 李兰芳.中国协和医科大学 2010



本文编号:3718015

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