清达颗粒通过调控p38MAPK/Nrf2/HO-1通路减轻脂多糖诱导的小胶质细胞氧化应激反应

发布时间：2023-01-03 19:24

　　目的研究清达颗粒（QDG）对脂多糖（LPS）诱导活化的BV-2小胶质细胞抗氧化作用,并探讨其对p38MAPK/Nrf2/HO-1抗氧化信号转导通路活化是否存在影响。方法1体外培育BV-2小胶质细胞,采用LPS（1μg/mL）诱导氧化应激模型,MTT法确定合适的QDG干预浓度范围,在此浓度范围内不对细胞造成毒性,以及二者联合使用时合适的干预浓度范围。之后将实验分为五组,分别为对照组,LPS组,LPS+QDG组,LPS+QDG组设置31.25,62.5,125μg/mL 3个浓度。2.检测各组细胞中一氧化氮（NO）及活性氧（ROS）的荧光强度,细胞上清液中丙二醛（MDA）的含量以及细胞上清液中超氧化物歧化酶（SOD）以及谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的活力。3.Elisa法检测各组细胞上清液中TNF-α的浓度。4.Western Blot法检测p38MAPK（p38）、磷酸化p38MAPK（p-p38）、转录因子Nrf2、细胞核内Nrf2、血红素加氧酶-1（HO-1）的蛋白表达情况以及p38MAP激酶抑制剂（LY2228820）与QDG联合干预下LPS诱导的BV-2细胞中HO-1蛋白的... 

【文章页数】：60 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
Abstract
中英文缩略词表
引言
实验材料与方法
    1 实验细胞
    2 实验药物、试剂耗材、工具及仪器
        2.1 实验药物
        2.2 实验试剂与耗材
        2.3 实验仪器及工具
    3 实验方法
        3.1 药品制备
        3.2 细胞制备
        3.3 MTT检测
        3.4 ROS含量测定
        3.5 NO表达水平检测
        3.6 MDA含量测定
        3.7 SOD活力测定
        3.8 GSH-Px活力测定
        3.9 ELISA法检测TNF-α浓度
        3.10 Western blot法检测蛋白表达
    4 统计学方法
实验结果
    1 清达颗粒及脂多糖对BV-2 细胞活力的影响
        1.1 不同浓度清达颗粒对BV-2 细胞活力的影响
        1.2 清达颗粒对LPS诱导的BV-2 细胞活力的影响
    2 清达颗粒对LPS干预的BV-2 细胞中氧化应激指标及炎症因子的影响
        2.1 清达颗粒对LPS干预的BV-2 细胞中ROS含量检测
        2.2 清达颗粒对LPS干预的BV-2 细胞中NO含量检测
        2.3 清达颗粒对LPS干预的BV-2 细胞中MDA含量检测
        2.4 清达颗粒对LPS干预的BV-2 细胞上清液中SOD活力检测
        2.5 清达颗粒对LPS干预的BV-2 细胞上清液中GSH-Px活力检测
        2.6 清达颗粒对LPS干预的BV-2 细胞上清液中TNF-α浓度检测
    3 Western blot检测蛋白表达
        3.1 清达颗粒对LPS干预的BV-2 细胞的p38、p-p38 蛋白表达的影响
        3.2 清达颗粒对LPS干预的BV-2 细胞的Nrf2、细胞核内Nrf2 蛋白表达的影响
        3.3 清达颗粒对LPS干预的BV-2 细胞的HO-1 蛋白表达的影响
        3.4 p38 抑制剂作用下清达颗粒干预LPS诱导的BV-2 细胞HO-1 蛋白表达的影响
讨论
结论
参考文献
文献综述
    参考文献
致谢
作者简历


【参考文献】：
期刊论文
[1]小胶质细胞在脑出血中的作用研究进展[J]. 马宏宇,敖杨坤,李翯,赵瑞.  中国脑血管病杂志. 2020(02)
[2]脂多糖通过TLR4-MyD88信号通路诱导BV2小胶质细胞激活模型的建立[J]. 王俊力,邵卫,杨运,罗卫东,张忠文,梅俊华,陈国华.  华中科技大学学报(医学版). 2020(01)
[3]小胶质细胞与缺血性脑卒中研究进展[J]. 潘赫男,李俐涛.  脑与神经疾病杂志. 2020(01)
[4]高血压患者自我管理模式研究新进展[J]. 林黎君,黄丽华.  护理与康复. 2019(08)
[5]清达颗粒对AngⅡ诱导的高血压小鼠肾脏损害的干预研究[J]. 杨美玲,周雪玲,彭美中,卢妍,彭军,陈友琴,Thomas Joseph SFERRA,褚剑锋.  中医药通报. 2019(02)
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[7]《中国心血管病报告2018》概要[J]. 胡盛寿,高润霖,刘力生,朱曼璐,王文,王拥军,吴兆苏,李惠君,顾东风,杨跃进,郑哲,陈伟伟.  中国循环杂志. 2019(03)
[8]高血压心脏局部炎症反应与清达颗粒干预实验研究[J]. 王怀,包丽亚,周雪玲,贾贝贝,叶任之,张铃,蔡巧燕,彭军,褚剑锋.  中西医结合心脑血管病杂志. 2019(02)
[9]清达颗粒对自发性高血压大鼠心脏超声指标及病理学形态的影响[J]. 包丽亚,王怀,周雪玲,贾贝贝,叶任之,张铃,蔡巧燕,彭军,褚剑锋.  中西医结合心脑血管病杂志. 2019(01)
[10]内皮细胞氧化应激相关信号通路的研究进展[J]. 贾懿卜,杨爽.  中国循证心血管医学杂志. 2018(12)

硕士论文
[1]天麻素在脂多糖诱导PC12细胞炎症中的保护作用研究[D]. 卢志杰.昆明医科大学 2013
[2]天麻素对脂多糖诱导PC12细胞氧化应激保护作用的研究[D]. 王艳.昆明医科大学 2012



本文编号：3727448