罗氏海盘车Asterias rollestoni标准组分的制备及其物质基础研究

发布时间：2017-05-18 09:19

  本文关键词：罗氏海盘车Asterias rollestoni标准组分的制备及其物质基础研究，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：罗氏海盘车(Asterias rollestoni),属棘皮动物门、海星纲、钳棘目海盘车科,为海洋常见大型无脊椎动物之一,始载于《本草纲目》,和胃平肝、止痛制酸的药效较为显著。为建立罗氏海盘车的标准组分库,本实验在提取溶剂上分别选用了纯水和95%乙醇作为提取溶剂,以超声波清洗仪辅助提取。将醇提浸膏分散于水中,依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取,得到溶剂分配组分；结果可知,石油醚组分、乙酸乙酯组分构成了罗氏海盘车小极性化合物的单一组分库,得到4个组分；正丁醇组分经大孔树脂,以20、40、60、80、100%五个梯度的乙醇水溶液洗脱,得到物质组成较丰富的80%、100%乙醇水洗脱组分,得到5个组分；再将80、100%组分上样于加压硅胶柱,分别得到5个组分；醇提浸膏共得到19个组分。水提浸膏以上流程得到17个组分。本论文共得到36个组分,利用高效液相色谱技术对组分库的物质组成进行了表征,构成了罗氏海盘车的标准组分库,为寻找特征化合物、鉴定结构、探究活性打下基础。实验对各组分进行TLC检测,选取具有特征显色点的组分进行物质基础研究。研究发现,大孔树脂柱分离得到的60%组分经正相硅胶、MCI凝胶、反相硅胶、凝胶柱层析后,得在TLC上呈单一显色点的样品S4,其比移值为0.66,HPLC检测结果显示其组成单一、纯度较高。大孔树脂柱分离得到的80%组分经正相硅胶、反相硅胶、凝胶柱层析等柱分离和半制备HPLC分离鉴定了两个生物碱类化合物：(3R,6S)-3,6-二((1H-吲哚-3-基)甲基)-2,5-哌嗪二酮(1)和N-(2-(1H-吲哚-3-基)乙基)-2-苯乙胺(2)；化合物1和化合物2均为首次从罗氏海盘车中分离得到,化合物2为新的天然产物,本实验首次提供了其核磁数据。以上3种化合物经体外抗肿瘤活性检测,其结果：化合物1对MGC803细胞具有一定的抑制活性；S4对6种肿瘤细胞具有较强的抑制活性,具有深入研究的价值。综上所述,本论文通过超声提取、溶剂分配、柱分离等方法首次建立了构建罗氏海盘车的系统标准组分库,并对其化学组成进行了HPLC表征；以构建的组分库为基础,得到一个化学组成较简单的样品S4,S4具有较广谱抗肿瘤的活性。分离鉴定了两个生物碱类化合物；作为来源丰富、易于得到、生物活性广泛的海洋生物,罗氏海盘车具有较大的药用价值,深入研究其物质基础意义重大。
【关键词】：罗氏海盘车 组分库 高效液相色谱 抗肿瘤
【学位授予单位】：中国海洋大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R284
【目录】：

• 摘要5-7
• Abstract7-12
• 第一章 前言12-29
• 1.1 罗氏海盘车简介13-16
• 1.1.1 罗氏海盘车的形态特征13-14
• 1.1.2 生活习性14
• 1.1.3 主要危害14-15
• 1.1.4 营养分析15-16
• 1.2 生物活性及潜在应用价值16-24
• 1.2.1 抗肿瘤活性16-19
• 1.2.2 抗菌、抗病毒活性19-21
• 1.2.3 其它生物活性21-22
• 1.2.4 毒性22-23
• 1.2.5 在食品行业的应用价值23-24
• 1.3 标准组分库研究概况24-26
• 1.3.1 中药指纹图谱研究概况25-26
• 1.3.2 制备中药标准组分的流程26
• 1.4 中药物质基础研究概况26-27
• 1.5 本课题研究的目的和意义27
• 1.6 本课题的总体研究思路27-29
• 第二章 标准组分的制备及其HPLC表征29-52
• 2.1 标准组分的制备29-33
• 2.1.1 提取组分的制备29-30
• 2.1.2 溶剂分配组分的制备30-31
• 2.1.3 大孔树脂柱分离组分的制备31-32
• 2.1.4 硅胶柱分离标准组分的制备32-33
• 2.2 标准组分的HPLC表征33-50
• 2.2.1 仪器与试剂33-34
• 2.2.2 色谱条件的优化34-35
• 2.2.3 标准组分HPLC分析35
• 2.2.4 HPLC结果35-50
• 2.3 小结50-52
• 第三章 标准组分的物质基础研究52-65
• 3.1 标准组分ZC-7的纯化52-54
• 3.1.1 试剂与仪器52
• 3.1.2 组分的柱分离52-53
• 3.1.3 HPLC分析53-54
• 3.2 标准组分ZC-8的纯化54-56
• 3.2.1 仪器与试剂54
• 3.2.2 组分的柱分离54-55
• 3.2.3 HPLC半制备55-56
• 3.2.4 两种生物碱的结构鉴定56
• 3.3 纯化样品体外抗肿瘤活性和抗菌活性的研究56-58
• 3.3.1 体外抗肿瘤活性测定56-57
• 3.3.2 样品S4抑菌活性的测定57-58
• 3.4 实验结果与讨论58-65
• 3.4.1 标准组分ZC-7的纯化58-59
• 3.4.2 标准组分ZC-8的纯化59-62
• 3.4.3 体外抗肿瘤活性和抗菌活性结果62-63
• 3.4.4 讨论63-65
• 总结65-66
• 参考文献66-71
• 附录71-78
• 致谢78-79
• 个人简历79

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