灵芝菌发酵党参成分变化及其对神经母细瘤SH-SY5Y增殖和凋亡的影响

发布时间：2023-04-26 19:32

　　目的:以无柄灵芝菌液体发酵党参水提物以期产生党参中原来没有的具有抗肿瘤活性的化合物,分离该化合物,提取该菌的胞内、胞外酶验证该生物催化反应,并检测化合物对肿瘤细胞的增殖抑制活性,探索其可能的作用机制,评估该化合物的急性毒性,为研发具有抗肿瘤活性的先导化合物提供一定的实验依据。方法:采用无柄灵芝菌对党参水提物发酵7天,超高效液相色谱(UPLC)检测发酵前后党参水提物的成分变化,超高效制备液相色谱分离(Pre-UPLC)该变化组分,UPLC检测分离到的化合物纯度,利用质谱、核磁共振氢谱、核磁共振碳谱鉴定化合物的结构;发酵液离心得到的上清液作为胞外酶液,采用低温超声结合匀浆的方法提取无柄灵芝菌的胞内酶,以发酵前的化合物为底物进行生物催化;通过对催化时间,底物量,酶量的优化,得到最适的转化条件;通过细胞计数-8试剂盒(CCK-8)和噻唑蓝(MTT)法检测化合物对人神经母细胞瘤(SH-SY5Y)、人结直肠癌细胞(HCT-8)、人肺癌细胞(A549)和人胃癌细胞(SGC-7901)细胞的增殖抑制作用,筛选出半抑制浓度(IC₅₀)最低的化合物和敏感细胞系;利用流式细胞仪检测化合...

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【学位级别】：硕士

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前言
第一章 无柄灵芝菌发酵党参成分变化
    材料与方法
    结果
    讨论
    小结
第二章 无柄灵芝菌粗酶液催化5-羟甲基糠醛生成2,5-二甲醇呋喃
    材料与方法
    结果
    讨论
    小结
第三章 2,5-二甲醇呋喃对SH-SY5Y细胞增殖和凋亡影响
    材料与方法
    结果
    讨论
    小结
第四章 5-羟甲基糠醛和2,5-二甲醇呋喃的急性毒性
    材料与方法
    结果
    讨论
    小结
结论
参考文献
综述
    参考文献
附录
致谢
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本文编号：3802089