莲子心黄酮结构分析及其降血糖活性研究

发布时间：2017-05-23 08:30

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【摘要】：莲子心(Lotus plumule)是睡莲科水生草本植物莲(Nelumbo nucifera Gaertn)成熟种子中的胚根和干燥幼叶,作为一种重要中草药,莲子心具有广泛的药理作用,极具研究价值。福建建宁素有“建莲之乡”的美誉,是莲子心的主要产地之一。本课题以建宁莲子心为原料,研究莲子心总黄酮的提取、分离纯化、降血糖作用及其降糖活性组分的初步鉴定,为莲子心总黄酮降血糖的构效关系研究奠定基础,为进一步的开发利用提供理论依据及技术支持。(1)运用硝酸铝显色法结合紫外-可见光分光光度计,以芦丁为对照品,对莲子心中黄酮含量进行测定,并进一步探讨该法的测定结果。研究表明该方法直观快速、简便可行,且有良好的准确性及稳定性,为探讨莲子心总黄酮的最佳提取和纯化工艺的指标控制提供了快速有效的评价方法。(2)微波-超声波协同辅助法提取莲子心总黄酮的最佳工艺参数研究。通过对溶剂浓度、料液比、微波功率、超声功率、提取时间以及超声/间隔时间等因素进行单因素试验,并在此基础上结合响应面法优化分析,确定最佳工艺条件。结果表明,该工艺最优参数为：乙醇浓度70%,料液比1：40,微波功率355 W,超声功率423 W,提取时间15 min,超声/间隔时间1/0。(3)以高脂喂养及腹腔注射合链脲佐菌素(STZ)诱导的Ⅱ型糖尿病实验小鼠动物模型,研究莲子心总黄酮对血糖的影响。结果表明,莲子心总黄酮可明显降低小鼠的血糖水平,并提高糖耐受量和胰岛素水平,此外,莲子心总黄酮还具有调节血脂水平的作用。(4)在比较三种不同规格聚酰胺树脂对莲子心总黄酮的吸附-解吸效果的基础上,选取目数为60-80聚酰胺树脂纯化莲子心总黄酮,并确定其最优纯化工艺条件。最佳纯化工艺参数为,上样浓度2.085 mg/mL,上样量10 mL,上样流速1 mL/min,水用量40 mL,洗脱剂50%乙醇,洗脱剂用量50 mL,洗脱流速1 mL/min。即可达到理想的纯化莲子心总黄酮的效果。(5)依次用石油醚、乙酸乙酯以及正丁醇溶剂萃取莲子心总黄酮,以α-葡萄糖苷酶活性抑制作用为指标,筛选莲子心总黄酮降糖萃取组份,结果显示,莲子心总黄酮的乙酸乙酯相萃取组份对α-葡萄糖苷酶活性抑制能力最高,为莲子心总黄酮的降糖主要活性成分来源。(6)采用化学检识方法及HPLC法,对莲子心总黄酮的中具有降糖活性的乙酸乙酯相组分,进行初步结构分析鉴定,乙酸乙酯相中可能含有二氢黄酮、5-羟基黄酮或2-羟基查耳酮和橙酮等黄酮类物质；且含有芦丁物质,测定其含量为77.74mg/g。
【关键词】：莲子心 黄酮类化合物 降血糖 纯化 分析鉴定
【学位授予单位】：福建农林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R284;R285.5
【目录】：

• 摘要9-11
• Abstract11-13
• 第一章 文章综述13-29
• 1 引言13
• 2 莲子心概述13-14
• 3 莲子心研究进展14-17
• 3.1 莲子心的生物活性成分14-16
• 3.2 莲子心药理作用16-17
• 4 黄酮类化合物的研究现状17-27
• 4.1 黄酮类物质的提取方法18-21
• 4.2 黄酮类化合物的分离纯化21-24
• 4.3 黄酮类物质分析鉴定24-26
• 4.4. 黄酮化合物的生理活性26-27
• 5 本研究的目的意义和主要内容27-29
• 5.1 研究的目的及意义27-28
• 5.2 研究的主要内容28-29
• 第二章 莲子心中总黄酮含量的测定29-36
• 1 材料与方法29-32
• 1.1 实验试剂与仪器29
• 1.2 实验材料29-30
• 1.3 实验方法30-32
• 2 结果与分析32-35
• 2.1 波长的选择32
• 2.2 绘制芦丁标准曲线32-33
• 2.3 重现性考察33
• 2.4 加样回收率试验33-34
• 2.5 显色稳定性考察34-35
• 3 小结与讨论35-36
• 第三章 微波-超声波协同辅助法提取莲子心黄酮工艺研究36-49
• 1 材料与方法36-38
• 1.1 实验试剂与仪器36-37
• 1.2 实验材料37
• 1.3 实验方法37-38
• 1.4 数据分析38
• 2 结果与分析38-48
• 2.1 乙醇浓度对莲子心黄酮提取率的影响38-39
• 2.2 料液比对莲子心黄酮提取率的影响39-40
• 2.3 微波功率对莲子心黄酮提取率的影响40
• 2.4 超声波功率对莲子心黄酮提取率的影响40-41
• 2.5 提取时间对莲子心总黄酮提取率的影响41-42
• 2.6 超声/间隔时间对莲子心总黄酮提取率的影响42-43
• 2.7 微波-超声波法辅助提取莲子心黄酮的最优工艺确定43-48
• 3 小结与讨论48-49
• 第四章 莲子心黄酮对糖尿病模型小鼠的降血糖作用49-60
• 1 材料与方法49-53
• 1.1 实验试剂与仪器49-50
• 1.2 实验材料50
• 1.3 实验方法50-53
• 2 结果与分析53-59
• 2.1 临床症状观察53-54
• 2.2 莲子心黄酮对糖尿病模型小鼠体重的影响54-55
• 2.3 莲子心黄酮对糖尿病模型小鼠血糖的影响55-56
• 2.4 莲子心总黄酮对糖尿病模型小鼠糖耐量及血糖曲线下面积影响56-57
• 2.5 连于心总黄酮对糖尿病模型小鼠血清甘油三酯和总胆固醇影响57-58
• 2.6 莲子心总黄酮对糖尿病模型小鼠血清胰岛素水平和敏感指数的影响58-59
• 3 小结与讨论59-60
• 第五章 莲子心总黄酮的纯化及工艺研究60-73
• 1 材料与方法60-65
• 1.1 实验试剂与仪器60-61
• 1.2 实验材料61
• 1.3 实验方法61-65
• 2 结果与分析65-72
• 2.1 聚酰胺树脂的静态吸附-解吸考察结果65-66
• 2.2 聚酰胺静态吸附动力学曲线66-67
• 2.3 聚酰胺树脂对莲子心总黄酮的吸附一解吸工艺条件研究67-72
• 2.4 聚酰胺纯化后莲子心总黄酮纯度72
• 3 小结与讨论72-73
• 第六章 莲子心总黄酮的萃取纯化及其降糖活性组份筛选73-78
• 1 材料与方法73-76
• 1.1 实验试剂与仪器73-74
• 1.2 实验材料74
• 1.3 实验方法74-76
• 2 结果与分析76-77
• 3 小结与讨论77-78
• 第七章 莲子心总黄酮降糖活性组份的初步分析鉴定78-85
• 1 材料与方法78-81
• 1.1 实验试剂与仪器78-79
• 1.2 实验材料79
• 1.3 实验方法79-81
• 2 结果与分析81-83
• 2.1 化学检识结果81-82
• 2.2 HPLC分析结果82-83
• 3 小结与讨论83-85
• 第八章 全文结论与展望85-87
• 1 全文结论85
• 2 本论文的创新之处85-86
• 3 展望86-87
• 参考文献87-94
• 致谢94

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