hnRNPAB调控人结直肠癌肿瘤干细胞及其机制研究

发布时间：2024-01-24 11:49

　　目的:探讨过表达hnRNPAB亚型(A2/B1)对人结直肠癌“干性”及部分恶性生物学行为的影响,并探讨其分子机制。方法:利用过表达hnRNPAB亚型(A2/B1)基因的慢病毒载体hnRNPA2/B1-GFP-LV以及阴性对照病毒NC-GFP-LV转染人结直肠癌细胞株SW480和HT29细胞,从而建立实验组(既SW480/hnRNPA2/B1、HT29/hnRNPA2/B1)与对照组(SW480-NC、HT29-NC)。将各组细胞进行作以下4个方面的检测:(1)验证两组细胞中hnRNPA2/B1过表达效果:(1)通过RT-qPCR技术检测hnRNPA2/B1 mRNA相对表达量;(2)Western blot技术检测hnRNPAB亚型(A2/B1)蛋白的表达;(2)肿瘤干细胞特性检测:(1)平板克隆形成实验检测肿瘤克隆形成能力。(2)裸鼠成瘤实验检测肿瘤体内成瘤能力。(3)流式技术检测肿瘤干细胞标志物CD133、CD44。(3)其他恶性生物学行为的检测:(1)Transwell实验检测肿瘤侵袭能力(2)划痕实验检测肿瘤迁移能力(3)CCK8法检测肿瘤增殖能力。(4)Western blo...

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【学位级别】：硕士

图1SW480转染过表达病毒组，明视野（100×）

图2HT29转染过表达病毒组，明视野（100×）

图3RT-qPCR检测两组细胞hnRNPA2/B1mRNA表达水平；与SW480-NC、HT29-NC组比较，**P<0.01

图4westernblot检测两组hnRNPA2/B1蛋白表达；与对照组组比较，**P<0.01

本文编号：3883760