IL-37b通过IL-1R8通路减轻颞下颌关节炎症

发布时间：2024-04-24 01:49

　　目的:最近,有研究报道IL-37是炎症的天然抑制剂,在多个组织中表达并调节炎性进展。本研究旨在探究IL-37在颞下颌关节炎症中的抗炎作用及其分子机制。方法:首先使用ELISA和免疫组化染色(IHC)染色检测人颞下颌关节中IL-37的表达。其次在体外实验中,用人IL-37b蛋白预处理人颞下颌关节软骨细胞后,用IL-1β刺激诱导炎症,用qPCR和Wester n blot手段检测炎症相关因子表达。并将siRNA-IL-1R8转染到软骨细胞中,qPCR检测相关炎症因子,Western blot检测其信号通路。最后,在SD大鼠中建立颞下颌关节盘穿孔的炎症模型,将人重组IL-37b蛋白用于SD大鼠颞下颌关节。通过Micro CT,IHC,qPCR,番红固绿以及TRAP染色用于验证治疗效果。结果:IL-37在人颞下颌关节的滑膜,关节盘及其关节软骨中有所表达。其次,颞下颌关节滑膜炎患者的滑液中IL-37的表达高于骨关节炎和不可复性盘前移位的患者。在体外的细胞实验中,IL-37b亚型在人颞下颌关节软骨细胞中高度表达,并抑制促炎因子IL-6,IL-8以及基质金属蛋白酶(MMP1,MMP3,MMP9,MM...

【文章页数】：69 页

【学位级别】：硕士

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中文摘要
英文摘要
前言
第一章 IL-37在颞下颌关节软骨、滑膜、关节盘、滑液中的表达的研究
    1 材料
        1.1 实验对象
        1.2 实验试剂
        1.3 主要仪器设备
    2 实验方法
        2.1 石蜡切片制备
        2.2 免疫组化(IHC)染色
        2.3 Elisa实验
        2.4 统计分析
    3 结果
        3.1 IL-37在颞下颌关节组织中表达
        3.2 IL-37蛋白在颞下颌关节滑液中的表达
    4 讨论
第二章 IL-37b在软骨细胞中的抑炎作用及其机制探究
    1 材料
        1.1 实验试剂
        1.2 主要仪器设备
        1.3 部分试剂的配置
    2 实验方法
        2.1 人颞下颌关节软骨细胞的培养
        2.2 细胞传代/细胞冻存
        2.3 细胞复苏
        2.4 琼脂糖凝胶电泳
        2.5 IL-37b抑制IL-1β诱导的人颞下颌关节软骨细胞炎症
        2.6 siRNA-IL-1R8 转染技术
        2.7 实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)
        2.8 western blot
        2.9 免疫荧光染色
        2.10 统计分析
    3 结果
        3.1 IL-37亚型在颞下颌关节软骨细胞中的表达
        3.2 IL-37b抑制炎症作用的浓度筛选
        3.3 IL-37b抑制IL-1β诱导的炎症因子的基因表达
        3.4 IL-37b抑制IL-1β诱导的基质金属蛋白酶的蛋白表达
        3.5 IL-37b抑制炎症因子的表达需要IL-1R8 参与
        3.6 IL-37b抑制软骨细胞NF-?B核转移
        3.7 IL-37b抑制MAPK通路磷酸化表达
    4 讨论
第三章 IL-37b在关节盘穿孔模型中对关节软骨以及软骨下骨的作用
    1 材料
        1.1 实验对象
        1.2 主要实验试剂
        1.3 主要仪器设备
    2 实验方法
        2.1 关节盘穿孔模型的制备
        2.2 颞下颌关节标本制备
        2.3 番红固绿染色
        2.4 荧光定量PCR(qPCR)
        2.5 Micro-CT
        2.6 Trap染色检测大鼠TMJ软骨下骨破骨细胞的表达
        2.7 统计分析
    3 结果
        3.1 颞下颌关节建模模式图
        3.2 表观结果
        3.3 番红固绿染色结果
        3.4 荧光定量PCR检测结果
        3.5 免疫组化(IHC)染色结果
        3.6 MICRO-CT定量分析结果
        3.7 Trap染色结果
    4 讨论
总结
参考文献
文献综述
    参考文献
致谢
攻读硕士期间发表的学术论文



本文编号：3963051