食管鳞癌中PI3K/AKT/mTOR信号通路与LSD1相互调控作用研究

发布时间：2024-11-02 11:17

　　目的1.探讨食管鳞癌中PI3K/AKT/m TOR信号通路对LSD1的调控作用。2.探讨食管鳞癌中LSD1对mTOR信号通路的调控作用。方法1.用PI3K/AKT/m TOR信号通路抑制剂(LY294002、RAD001和PP242)作用于食管鳞癌细胞ECa109,CCK-8法检测三种药物对食管鳞癌细胞增殖的影响。2.分别用LY294002、RAD001和PP242处理食管鳞癌细胞ECa109,Western blot检测PI3K/AKT/m TOR信号通路相关蛋白Raptor、Rictor、p-AKT(Ser473)、p-p70S6K及LSD1和组蛋白H3K4me2的表达情况。3.CCK-8法检测PI3K抑制剂LY294002分别与不同浓度RAD001和PP242联合应用对食管鳞癌细胞增殖的影响,并计算联用指数CI以判定联用效果。4.嘌呤霉素筛选出稳定转染Rictor-sh RNA的ECa109细胞,CCK-8法检测转染Rictor-sh RNA后PI3K/AKT/m TOR信号通路抑制剂(LY294002、RAD001和PP242)对ECa109细胞增殖影响的变化。5.Western...

【文章页数】：79 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
英文符号说明
前言
    1 食管鳞癌
    2 PI3K/AKT/m TOR 信号通路
    3 组蛋白修饰
    4 LSD1与肿瘤
    5 本文研究内容
    6 本研究的创新之处
第一章 食管鳞癌中PI3K/AKT/mTOR信号通路对LSD1的调控作用研究
    引言
    1 材料与方法
        1.1 实验材料
            1.1.1 实验设备
            1.1.2 实验试剂
            1.1.3 试剂配制
            1.1.4 细胞株
        1.2 实验方法
            1.2.1 细胞培养
            1.2.2 细胞增殖抑制实验
            1.2.3 Western blot实验
            1.2.4 统计学分析
    2 结果
        2.1 LY294002和RAD001对食管鳞癌细胞ECa109增殖的影响
        2.2 RAD001单用及与LY294002联用对食管鳞癌细胞ECa109的增殖抑制作用
        2.3 LY294002对食管鳞癌ECa109细胞中相关蛋白表达的影响
        2.4 RAD001对食管鳞癌ECa109细胞中相关蛋白表达的影响
    3 讨论
    小结
第二章 食管鳞癌中mTORC2对LSD1的调控作用研究
    第一节 mTORC2功能的探讨
        引言
        1 材料与方法
            1.1 实验材料
                1.1.1 实验设备
                1.1.2 实验试剂
                1.1.3 试剂配制
            1.2 实验方法
                1.2.1 细胞培养
                1.2.2 细胞转染
                1.2.3 荧光显微镜下观察和照相
                1.2.4 筛选稳定表达的细胞株
                1.2.5 CCK-8
        2 结果
            2.1 Rictor-shRNA质粒转染ECa109细胞的效率观察
            2.2 shRNA下调Rictor表达后PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制剂对ECa109细胞增殖影响的变化
        3 讨论
        小结
    第二节 探讨抑制m TORC2对LSD1的调控作用
        引言
        1 材料与方法
            1.1 实验材料
                1.1.1 实验设备
                1.1.2 实验试剂
                1.1.3 试剂配制
            1.2 实验方法
                1.2.1 CCK-8
        2 结果
            2.1 PP242对食管鳞癌ECa109细胞增殖的影响
            2.2 PP242对食管鳞癌ECa109细胞中相关蛋白的表达影响
            2.3 Rictor-shRNA对食管鳞癌细胞ECa109中Rictor及LSD1蛋白表达的影响
        3 讨论
        小结
第三章 食管鳞癌中LSD1对mTOR信号通路的调控作用研究
    引言
    1 材料与方法
        1.1 实验试剂
        1.2 试剂配制
        1.3 实验方法
            1.3.1 LSD1-siRNA转染食管鳞癌细胞ECa109
            1.3.2 LSD1-shRNA转染食管鳞癌细胞ECa109
            1.3.3 荧光显微镜下观察和照相
    2 结果
        2.1 LSD1-siRNA干扰LSD1表达后对ECa109中mTOR通路相关蛋白表达的影响
        2.2 LSD1-shRNA转染食管鳞癌细胞ECa109的效率观察
        2.3 shRNA干扰ECa109细胞中LSD1的表达后对mTOR通路相关蛋白表达的影响
        2.4 新合成的LSD1抑制剂244对ECa109中mTOR通路相关蛋白表达的影响
        2.5 TCP抑制LSD1的活性对ECa109中LSD1及mTOR通路相关蛋白表达的影响
    3 讨论
    小结
结论
参考文献
综述：组蛋白赖氨酸去甲基酶LSD1的生物学功能及靶向LSD1治疗的研究进展
    参考文献
个人简历
致谢



本文编号：4009508