过表达oTLR4转基因绵羊的生物安全评估

发布时间：2017-11-13 01:24

  本文关键词：过表达oTLR4转基因绵羊的生物安全评估

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【摘要】：转基因动物在生命科学、生物医药、环保、农业等方面有着广阔的应用前景,且转基因动物技术发展越来越快。过表达oTLR4(ovine toll-like receptor4,oTLR4)转基因绵羊表现出良好的抗病潜力,但只有通过安全评价后,才可能更好地应用于广大人民群众的生产和生活中。 本研究以课题组先前成功获得的过表达oTLR4转基因公羊所扩繁的F1代群体为研究对象,通过PCR和Southem Blot方法,共鉴定出过表达转基因绵羊111只,阳性率为28.7%(111/387只)。通过RT'-PCR发现,在单个核细胞中oTLR4mRNA表达量为非转基因的2.5倍。测定了6月龄的转基因绵羊和非转基因绵羊的血液生理和肌肉的成分,观察了心脏、肝脏、肾脏、肌肉、睾丸和卵巢的组织学变化。结果显示,血液生理指标之间没有差异,器官切片的HE染色没有病理性变化,且在肌肉主要成分上,过表达oTLR4转基因绵羊肉与非转基因绵羊肉相似,这表明所获得过表达oTLR4Z转基因绵羊体质良好、发育正常。 在过表达oTLR44转基因羊肉90天喂养Sprague-Dawley大鼠的亚慢性毒理评价研究中,实验共分七组,包括经济型饲料组,3.75%、7.5%和15%非转基因羊肉三个添加量组,3.75%、7.5%、15%过表达oTLR4转基因羊肉三个添加量组。每周对各组大鼠体重进行称量,在第45天和第90天进行血液生理和血液生化检测,在实验末期通过屠宰对大鼠的大脑、心、肝、脾、肺、胸腺、肾上腺、卵巢和睾丸等主要脏器进行称重,计算脏器系数；对经济型饲料组、15%非转基因羊肉组和15%过表达oTLR4转基因羊肉组的大鼠的大脑、甲状腺、胸腺、心、肝、脾、肾腺、肾、肺、睾丸、附睾、卵巢、子宫进行组织切片观察。结果显示,在第45天时,在所测的22项大鼠血液指标中：雌性大鼠,CHO、RBC、Ca、P、Mg在组间有差异；雄性大鼠,MPV、ALT、AST、 ALP、CREA、CHO、Cl在组间有差异,但这些数值都在正常的范围内；在第90天时,在所测的22项大鼠血液指标中：雌性大鼠,W,C、LY、NE、MPV、MCH在组间有差异;雄性大鼠,WBC、LY、MO、PLT、MPV、HB、HCT、MCH、Ca、Cl在组间有差异,但这些数值都在正常的生理范围内。各组大鼠的体重生长曲线一致,在各组间没有差异；各组的组织切片观察显示,各脏器发育良好。在90天大鼠的饲喂实验中,没有发现过表达oTLR4转基因羊肉对大鼠的生长发育不利的影响,说明过表达4oTLR4转基因羊肉作为食品是安全的。这对以后的来自其它的转基因动物产品的安全性提供了宝贵的依据。
【学位授予单位】：中国农业大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：S826

【参考文献】

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本文编号：1178500