猪肝羧酸酯酶调控β-内酰胺类药物疗效及炎症反应的机制研究

发布时间：2024-06-14 22:27

　　哺乳动物羧酸酯酶属于丝氨酸水解酶家族,广泛分布于机体的组织器官与免疫细胞中,可高活力水解含有酯键、硫酯键、酰胺键的内/外源性化合物,在体内的药物活化与代谢、信号转导、炎症反应、营养物质吸收、胆固醇稳态等过程中扮演重要角色。猪肝羧酸酯酶(PLE)是哺乳动物羧酸酯酶家族中最复杂的成员,包含多种同工酶,其水解具有高度的立体选择性和手性选择特性。受PLE高度水解活性及人和小鼠羧酸酯酶在药物代谢及炎症反应中发挥重要作用的启发,推测PLE很可能凭借高度的水解活性,介入机体药物代谢和炎症反应中,扮演药物代谢酶及炎症反应调控者的角色。本论文结合体外模型和仔猪体内炎症模型进行了系列试验,主要研究方法与结果如下:1. PLE高效水解AMO和AMP并降低其抑菌效果首先,LC-MS/MS检测发现原核功能性表达PLE1和PLE6可高活力水解AMO、AMP,分别生成阿莫西林噻唑酸和氨苄西林噻唑酸。PLE1水解AMO和AMP活力高达25.94 U/mg、8.34 U/mg,PLE6水解AMO和AMP活力分别为25.32U/mg、10.44 U/mg。PLE1和PLE6水解AMO的Vmax相近,而PLE1水解AMP的...

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【部分图文】：

图1-1CES水解底物四面中间体形成机制（SatohandHosokawa2006）

华中农业大学2020届博士研究生学位论文19系统，该催化结构域在不同亚型同工酶的序列中高度保守，决定CES水解底物具有选择性，只能水解含有特定化学键的底物。另外，Bencharit等发现hCE1蛋白具有相当大的催化活性腔（体积约13003），除了催化三联体氨基酸残基外，主要是疏水....

图1-2内质网腔侧CES-UGP互作与细胞内CES-MRP2互作模式图

华中农业大学2020届博士研究生学位论文21图1-2内质网腔侧CES-UGP互作与细胞内CES-MRP2互作模式图（SatohandHosokawa2006）Fig.1-2Carboxylesterase-UGTinteractionintheluminalsidesofERme....

图1-3羧酸酯酶参与体内胆固醇酯代谢（RedinboandPotter2005）

猪肝羧酸酯酶调控β-内酰胺类药物疗效及炎症反应的机制研究22酯酶1（hCE1）能够表现出胆固醇酯水解酶活性（CEH）和酰基辅酶A-胆固醇酰基转移酶活性（ACTA），消除细胞内多余的胆固醇酯，防止巨噬细胞和单核细胞转化为泡沫细胞，从而阻止动脉粥样硬化疾病的发生（图1-3），CES可....

图1-5PLE1基因序列示意图

因的间隔序列，黄色表示未知基因序列，橘色方框代表猪CH242部分基因序列，红色和黑色箭头表示PLE基因上游720bp反向互补序列（Zhouetal2016）。Fig.1-4SchematicdiagramofPLEsgenesequencesonpigchromosome6.Re....

本文编号：3994513