和田黑鸡和三黄鸡FABP基因多态性与IMF含量相关性研究

发布时间：2017-12-08 07:21

  本文关键词：和田黑鸡和三黄鸡FABP基因多态性与IMF含量相关性研究

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【摘要】：2010年,和田黑鸡被列入《国家畜禽遗传资源保护名录》。和田黑鸡生命力强,抗逆抗病性强,高温耐受力强,适应性强,耐寒能力突出,成活率高,肉质鲜美,风味独特,是一种优质的蛋肉兼用地方品种。由于缺乏系统的育种指导,导致品种优良特性日渐退化。肌内脂肪(IMF)含量主要影响肌肉的风味、嫩度和多汁性,而脂肪型脂肪酸结合蛋白(A-FABP)和心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)基因是影响IMF沉积最重要的两个基因。本研究拟检测两种基因的多态性并与IMF进行关联分析,以期获得有价值的多态位点,指导育种工作；同时分析两种基因mRNA表达量与IMF含量相关性,为研究IMF的调控奠定基础。因此,本研究按照国家标准GB/T 14772-2008采用索氏抽提法对三黄鸡和和田黑鸡心肌、胸肌和腿肌中IMF含量进行测定,结果显示,在三黄鸡和和田黑鸡心肌、胸肌和腿肌中,都是以心肌中IMF含量最高,且与胸肌和腿肌中IMF含量差异均极显著；IMF在和田黑鸡心肌、胸肌和腿肌中的含量均显著高于三黄鸡。用PCR的方法扩增得到了和田黑鸡A-FABP和H-FABP基因CDs序列,结果显示,和田黑鸡A-FABP和H-FABP基因CDs分别编码132和133个氨基酸。用PCR-SSCP的方法对三黄鸡和和田黑鸡A-FABP和H-FABP基因外显子多态性进行分析,结果显示,在三黄鸡和和田黑鸡A-FABP基因第一外显子均检测到一个C51T突变位点,与IMF含量关联分析显示,该位点可以作为选育胸肌中高IMF含量和田黑鸡的遗传标记；在三黄鸡和和田黑鸡H-FABP基因第外二显子均检测到G939A, G982A和C1014T三个突变位点,与IMF含量关联分析显示,G982A也可以作为选育胸肌中高IMF含量和田黑鸡的遗传标记。用实时荧光定量PCR的方法对三黄鸡和和田黑鸡A-FABP和H-FABP基因mRNA表达量进行了检测,结果显示,和田黑鸡心肌、胸肌和腿肌中A-FABP基因mRNA表达量均高于三黄鸡,但显著性差异仅在腿肌中表现出来,三黄鸡和和田黑鸡腿肌中A-FABP基因mRNA表达量均极显著地高于心肌和胸肌,三黄鸡与和田黑鸡胸肌和腿肌中A-FABP基因mRNA表达量与IMF含量呈显著的正相关；三黄鸡心肌中H-FABP基因mRNA表达量极显著地高于和田黑鸡,在胸肌中低于和田黑鸡,在腿肌中显著地高于和田黑鸡；三黄鸡心肌中H-FABP基因mRNA表达量显著地高于胸肌和腿肌,腿肌中H-FABP基因mRNA表达量也显著地高于胸肌；三黄鸡心肌和胸肌中H-FABP基因mRNA表达量与IMF含量呈显著负相关,和田黑鸡心肌,胸肌和腿肌H-FABP基因mRNA表达量与IMF含量呈显著的负相关。用Western blot的方法对三黄鸡和和田黑鸡心肌、胸肌和腿肌中H-FABP蛋白表达量进行了检测,结果显示,三黄鸡心肌中H-FABP蛋白表达量高于和田黑鸡,胸肌中H-FABP蛋白表达量低于和田黑鸡,腿肌中H-FABP蛋白表达量高于和田黑鸡,但未显示出显著性差异。用免疫组化的方法对三黄鸡和和田黑鸡心肌、胸肌和腿肌中H-FABP蛋白表达进行了检测,结果显示,H-FABP蛋白在三黄鸡和和田黑鸡三种组织的细胞浆中表达。A-FABP基因的C51T和H-FABP基因的G982A两个位点都可以作为选育胸肌中高IMF含量和田黑鸡的遗传标记；A-FABP和H-FABP基因mRNA表达量与IMF含量在和田黑鸡胸肌和腿肌中分别呈显著的正相关和负相关。
【学位授予单位】：中国农业大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：S831

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