苦参露对脂多糖诱导大鼠小肠炎症的保护作用及其机制研究
本文关键词:苦参露对脂多糖诱导大鼠小肠炎症的保护作用及其机制研究
【摘要】:中药苦参是豆科植物Sophora flavescensAit.的干燥根,气寒味苦,具有清热燥湿的作用,在中医临床中多用于治疗肠炎、痢疾等疾患。药露,是将药物进行蒸馏获得的水状液体,作为一种传统的中药剂型,其种类繁多,盛行于清代。本研究以水蒸气蒸馏法对苦参饮片进行蒸馏,制得苦参露(KSL),通过动物模型和细胞模型探究其药理学活性,评估其对脂多糖(LPS)诱导的大鼠小肠炎症的保护作用并阐释其可能的作用机制。试验方法:动物试验:将Sprague-Dawley大鼠随机分为四组,即Control组、LPS组、LPS+H20组、LPS+KSL组,每组六只。LPS+H20组及LPS+KSL组每日分别接受80mL蒸馏水或等量KSL超声雾化吸入;Contral组及LPS组则每日被置于雾化箱内,不进行雾化。以上操作均为每日一次,每次30分钟,连续五日。之后,Control组接受生理盐水腹腔注射,剩余组则接受10mg/kg LPS悬浊液腹腔注射。腹腔注射后7h,将大鼠断头处死,采集血液及小肠组织样本。通过腹腔注射后体重变化率、血清炎症因子水平、血细胞计数及小肠组织炎症相关蛋白的表达情况等指标评估苦参露对脂多糖诱导的大鼠小肠炎症的保护作用。细胞试验:以大鼠小肠上皮隐窝细胞(IEC-6)及大鼠小肠微血管内皮细胞(RIMVEC)作为模型细胞,以不同剂量的苦参露和LPS先后作用于细胞,通过ELISA法和Western Blot法测定其上清中炎症因子的含量及细胞中炎症相关通路蛋白的表达情况。试验结果:(1)10mg/kg剂量脂多糖悬浊液腹腔注射能够成功制备大鼠小肠炎症模型;(2)大鼠超声雾化吸入苦参露可显著缓解脂多糖引起的以下症状:腹泻,红细胞、血红蛋白、总白细胞及血小板浓度下降,血清促炎因子(IL-1β、IL-6、TNF-α)浓度升高,小肠组织中TLR4表达的增加,IκBα的降解以及p65磷酸化的增加;(3)苦参露预处理通过减少TLR4、MyD88、TRIF表达,从上游抑制IEC-6、RIMVEC细胞NF-κB及MAPK信号通路的激活及转导;通过降低p65磷酸化水平和减少IκBα降解,直接抑制细胞NF-κB的激活;通过降低ERK、JNK、p38的磷酸化水平,直接抑制细胞MAPK信号通路的转导。结论:在试验条件下,苦参露能够有效缓解脂多糖诱导的大鼠小肠炎症。其机制可能是通过抑制小肠上皮细胞及微血管内皮细胞TLR4、NF-κB及MAPK信号通路的激活从而减少IL-1β、IL-6、TNF-α的分泌,进而减轻LPS诱导的炎症对小肠组织的损伤作用。
【学位授予单位】:中国农业大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2017
【分类号】:S853.74
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