双峰驼PIGR和FCGRT的基因克

发布时间：2017-12-16 17:38

  本文关键词：双峰驼PIGR和FCGRT的基因克隆、生物信息学分析及在扁桃体中表达特性的研究

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【摘要】：机体黏膜生态系统主要由黏膜和其表面的微生态系统构成,是抵抗外界病原微生物入侵的第一道防线。pIgR和FcRn是黏膜生态系统中参与黏膜免疫应答的重要效应分子,能够转运相应抗体到黏膜表面,并能中和清除病原,以维持黏膜生态系统中正常的微生物菌群和生理环境。呼吸道、消化道和泌尿生殖道等器官的多种细胞能够合成pIgR和FcRn,并在特定部位参与黏膜免疫应答。扁桃体(包括腭扁桃体、咽扁桃体、舌扁桃体、软腭扁桃体、会厌扁桃体、咽鼓管扁桃体)在不同动物呼吸道中的存在情况不同,并且作为重要的黏膜相关淋巴组织(Mucosa-associated lymphoid tissues,MALT)在呼吸道黏膜免疫和整个黏膜免疫系统中发挥着重要的作用。以上6种扁桃体在双峰驼中均存在。为了确定pIgR和FcRn在双峰驼各扁桃体中的表达和分布特点以及两种受体在局部黏膜免疫中的生物学功能,同时为进一步探究两种受体在双峰驼和其他动物体内的生物学功能有无物种间差异。本文以6峰健康成年(6~16岁)阿拉善双峰驼为研究对象,借助生物信息学分析对双峰驼pIgR和FcRnα链的相关生物信息学特性加以分析;克隆得到双峰驼的pIgR和FcRnα链的编码区(coding regions,CDS);并采用免疫组织化学和实时荧光定量(相对)等方法,研究了成年双峰驼6种扁桃体中FCGRT和PIGR的相对表达量及各扁桃体各部位pIgR和FcRn阳性细胞的分布特点。研究结果如下:(1)PIGR和FCGRT在不同扁桃体中的表达及相关生物信息学分析PIGR和FCGRT在咽扁桃体中的表达水平显著高于其他各扁桃体(p0.05)。对两者的生物信息学分析表明双峰驼pIgR和FcRnα链均为I型跨膜分泌蛋白;pIgR和FcRnα链的一级结构在区域分布上同人和牛等哺乳动物具有相似性;而双峰驼与人的pIgR和FcRnα链的三级结构显示出高度的相似性。此外,序列同源性分析显示,克隆得到的PIGR和FCGRT CDS区的核苷酸和氨基酸序列与GenBank中预测序列的核苷酸和氨基酸CDS区序列高度一致。(2)pigr阳性细胞在各扁桃体中的分布同一扁桃体不同区域:腭扁桃体中,滤泡区显著高于滤泡间区(p0.05),滤泡间区又显著高于上皮下区和网状上皮下区(p0.05);会厌扁桃体中,滤泡区显著高于滤泡间区和网状上皮下区,滤泡间区和网状上皮下区(两者彼此差异不显著)又显著高于上皮下区(p0.05);软腭扁桃体中,滤泡区、上皮下区和网状上皮下区(三者之间彼此差异不显著)显著高于腺体周围区和滤泡间区(两者之间彼此差异不显著)(p0.05);咽鼓管扁桃体中,滤泡区、滤泡间区和腺体周围区差异不显著(p0.05),但三者分别显著高于上皮下区(p0.05)。不同扁桃体同一区域:滤泡区中,会厌扁桃体显著高于腭扁桃体、咽扁桃体以及咽鼓管扁桃体(三者之间彼此差异不显著)(p0.05);滤泡间区中,会厌扁桃体和咽扁桃体(两者彼此差异不显著)显著高于腭扁桃体和咽鼓管扁桃体(两者彼此差异不显著),腭扁桃体和咽鼓管扁桃体均又显著高于软腭扁桃体(p0.05);上皮下区中,咽扁桃体和软腭扁桃体(两者彼此差异不显著)均显著高于腭扁桃体、舌扁桃体、会厌扁桃体以及咽鼓管扁桃体(四者之间彼此差异不显著)(p0.05);网状上皮下区中,会厌扁桃体和软腭扁桃体(两者彼此差异不显著)均显著高于腭扁桃体(p0.05);腺体周围区中,咽扁桃体和咽鼓管扁桃体(两者彼此差异不显著)均显著高于软腭扁桃体(p0.05)。(3)fcrn阳性细胞在各扁桃体中的分布同一扁桃体不同区域:腭扁桃体中,网状上皮下区显著高于其他三个区域(p0.05);咽扁桃体中,滤泡区、滤泡间区和腺体周围区(三者彼此差异不显著)均显著高于上皮下区(p0.05);会厌扁桃体中,滤泡区和网状上皮下区(两者彼此差异不显著)显著高于滤泡间区和上皮下区(p0.05);软腭扁桃体中,滤泡区、滤泡间区和网状上皮下区(三者彼此差异不显著)均显著高于上皮下区和腺体周围区(两者彼此差异不显著)(p0.05);咽鼓管扁桃体中,滤泡区和腺体周围区(两者彼此差异不显著)显著高于滤泡间区和上皮下区(两者彼此差异不显著)(p0.05)。不同扁桃体同一区域:滤泡区中,腭扁桃体、会厌扁桃体和软腭扁桃体(三者彼此差异不显著)均显著高于咽扁桃体和咽鼓管扁桃体(两者彼此差异不显著)(p0.05);滤泡间区中,咽扁桃体、会咽扁桃体和软腭扁桃体(三者彼此差异不显著)均显著高于腭扁桃体和咽鼓管扁桃体(两者彼此差异不显著)(p0.05);上皮下区中,腭扁桃体、舌扁桃体和会厌扁桃体(三者彼此差异不显著)均显著高于咽扁桃体,软腭扁桃体和咽鼓管扁桃体(三者彼此差异不显著)(p0.05);网状上皮下区中,腭扁桃体和会厌扁桃体(两者彼此差异不显著)均显著高于软腭扁桃体(p0.05);腺体周围区中,咽扁桃体、软腭扁桃体和咽鼓管扁桃体三者之间无显著差异(p0.05)。(4)pIgR和FcRn阳性细胞在同一扁桃体同一区域的分布腭扁桃体的滤泡区、滤泡间区、上皮下区和网状上皮下区中FcRn阳性细胞的密度均显著高于pIgR阳性细胞的密度(p0.05);咽扁桃体的上皮下区中FcRn阳性细胞的密度显著高于pIgR阳性细胞的密度(p0.05),其他区域无显著差异;会厌扁桃体滤泡区、滤泡间区、上皮下区和网状上皮下区两种阳性细胞密度差异不显著(p0.05);软腭扁桃体和舌扁桃体各区域两种受体阳性细胞差异均不显著(p0.05)。上述结果证实,不同类型的扁桃体在发挥黏膜免疫应答时,其免疫应答的诱导部位可能不同,提示不同扁桃体产生黏膜免疫应答的诱导机制可能不同;pIgR和Fc Rn阳性细胞在扁桃体各区域的分布优势可能还与解剖学位置有关;pIgR和Fc Rnα链的核苷酸和氨基酸序列在属及属以下分支的物种中的高度同源性表明pIgR和FcRnα链在双峰驼、人、牛、啮齿类动物以及其他哺乳动物内具有相似的生物学功能。
【学位授予单位】：甘肃农业大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：S824

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1 贾帅;双峰驼PIGR和FCGRT的基因克隆、生物信息学分析及在扁桃体中表达特性的研究[D];甘肃农业大学;2017年

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本文编号：1296899