PCR检测及猪传染性胃肠炎病毒分离鉴定

  本文关键词：猪传染性胃肠炎病毒感染ST细胞差异蛋白质组学研究，，由笔耕文化传播整理发布。

《东北农业大学》 2015年

猪冠状病毒性腹泻RT-PCR检测及猪传染性胃肠炎病毒分离鉴定

杜彩虹  

【摘要】：猪冠状病毒性腹泻是由猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和猪流行性腹泻病毒(PEDV)是一种有极高死亡率的恶疾,初期症状为上吐下泻。这两种恶疾的致病因素同属冠状病毒,所致疾病临床表现十分相似,并多以混合感染。此类疾病是我国及世界各养猪国家仔猪早期死亡的重要病因之一。准确了解两种疾病在我国不同地区发病和死亡情况对科学防治本病具有重要意义。本实验在2012年2月至2015年8月收集了内蒙古西部和东部地区的26个规模化猪场发病猪的腹泻粪便,对这些病料样品进行了PEDV和TGEV的RT-PCR扩增,以此了解当地腹泻发生的准确病因,另一方面,利用TGEV RT-PCR扩增阳性的粪便样品,在ST细胞上进行了病毒的分离培养。通过对26个规模化养猪场TGEV和PEDV两种病毒的检测表明,有22个发病猪场检测到了PEDV,有4个猪场检测到TGEV,当中有3个猪场是与PEDV混合感染,只有1个猪场为TGEV单独感染,其中2个猪场TGEV和PEDV均未检出。调查结果显示,在内蒙古地区发生猪病毒性肠炎的治病因素主要是因为病毒性的治病因子导致的通过对猪病毒性腹泻治病因子的分离培养显示,,病毒在ST细胞上培养的前20代很难观察到细胞病变,随着传代次数的增加,病变逐渐明显,30代以后,细胞表现为圆缩,脱落逐渐明显。RT-PCT检测表明,所有代次的病毒均检测到TGEV,说明病毒在细胞上能够稳定的增殖和传代下去;通过间接免疫荧光、病毒电镜的形态观察充分证明,所分离的病毒是猪传染性胃肠炎病毒。本病毒的分离培养,为进一步研究病毒的致病性,病毒免疫原性等提供了较高的理论基础和实践意义。

【关键词】：
【学位授予单位】：东北农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：S858.28
【目录】：

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