Cited2水平对小鼠和人卵子质量和胚胎发育的影响

发布时间：2016-12-14 06:37

  本文关键词：Cited2水平对小鼠和人卵子质量和胚胎发育的影响，由笔耕文化传播整理发布。

《中国农业大学》 2015年

Cited2水平对小鼠和人卵子质量和胚胎发育的影响

方园  

【摘要】：Cited2是调节着床后胚胎(胎儿)正常发育的转录辅助因子之一。目前,关于Cited2在卵母细胞成熟及早期胚胎发育过程中的作用未见报道,本研究旨在探索Cited2在卵母细胞成熟和早期胚胎发育过程中的作用。 蛋白表达分析结果表明：Cited2蛋白主要表达于生长卵泡中。随后,通过对GV、GVBD. MI和Mil阶段的卵母细胞进行Cited2基因表达分析,研究其在卵母细胞成熟过程中的表达情况。结果表明：Cited2mRNA水平在卵母细胞成熟过程中基本保持不变；Cited2蛋白在小鼠GV期卵母细胞中表达量较高并且主要定位于生发泡中,而在小鼠MⅡ期卵母细胞中表达最低并弥散于胞质中。相对于发育潜力高的SN型(surrounded nucleolus,染色质凝聚于核仁周围成环状)GV期卵母细胞,Cited2蛋白在发育潜力低的NSN (non surrounded nucleolus,染色质松散)型GV期卵母细胞中表达更高。此外,Cited2蛋白水平在发育潜力低(形态异常)的小鼠GV期卵母细胞中显著高于发育潜力高(形态正常)的GV期卵母细胞,在体外老化的小鼠卵母细胞显著高于未老化的卵母细胞。随后,通过注射siRNA减少GV期卵母细胞中Cited2蛋白水平,加速了卵母细胞核成熟；而注射GFP-Cited2mRNA升高卵母细胞中Cited2蛋白水平,则抑制了卵母细胞GVBD的发生和极体排出。 同时,Cited2基因在(1-、2-、4-和8-细胞)卵裂期胚胎、桑葚胚、囊胚和孵化囊胚各发育阶段胚胎中的表达量也逐渐降低。通过注射GFP-Cited2mRNA升高小鼠原核期胚胎的Cited2水平将会阻滞胚胎后期发育,主要表现为2-细胞期胚胎发育阻滞。RT-PCR检测发现p21waf/cip1mRNA水平在Cited2基因超表达的小鼠胚胎中显著高于对照组胚胎。以上小鼠研究结果表明：Cited2水平和小鼠卵母细胞发育质量相关。随后,本实验探讨Cited2的水平过高是否也会影响人和家畜的卵母细胞质量。 卵母细胞老化是影响家畜卵母细胞质量和发育潜力的重要原因之一。通过RT-PCR检测,本研究发现Cited2水平在体外老化的猪卵母细胞中显著升高。随后,通过H2O2和防线菌酮(CHX)处理分别升高和降低猪卵母细胞胞内活性氧物质(ROS)水平,发现ROS水平升高是猪卵细胞老化和碎裂的原因之一。随后,RT-PCR分析表明ROS水平升高促进老化猪卵母细胞中Cited2、PPARy和bim的表达。 现有研究表明：卵丘细胞中相关基因的表达水平能够在一定程度上反映胚胎的发育潜力,因此本实验就卵丘细胞中Cited2水平利人胚胎发育潜力的关系进行研究。蛋白表达分析结果表明：病人卵丘细胞中的Cited2蛋白水平各不相同。本研究将卵丘细胞中Cited2水平在整体均值以上的IVF病人归入Cited2高表达组,均值以下则归入低表达组。随后,按分组统计IVF病人的临床数据和胚胎数据。在Cited2高表达组病人中,这些病人在IVF周期中获取的卵母细胞表现出较低的受精率、优质胚胎率、着床率和妊娠率。此外,Cited2高表达组病人血清中基础卵泡刺激激素(FSH)水平明显下降,其卵丘细胞表现出较高的活性Caspase-3表达水平。定量RT-PCR分析表明,Cited2高表达组病人卵丘细胞中葡萄糖代谢相关基因(PCK1)和孕酮受体(PR)基因的表达及胞内葡萄糖水平也明显升高。对于ICSI病人,卵丘细胞中Cited2蛋白水平升高也会导致胚胎发育潜力下降。 综上,我们得到以下结论：1) Cited2水平过高会抑制小鼠卵母细胞核成熟和早期胚胎发育。2) Cited2水平升高与卵母细胞发育潜力下降相关。3)人卵丘细胞中Cited2水平过高与受精后胚胎发育潜力下降相关。本研究首次发现了Cited2基因在小鼠卵母细胞成熟和早期胚胎发育过程中的表达规律和作用,以及Cited2水平升高与卵母细胞和胚胎发育潜力下降的关系。丰富了哺乳动物的卵母细胞成熟和早期胚胎发育理论,为人胚胎发育潜力预测提供新的理论依据。

【关键词】：
【学位授予单位】：中国农业大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：S814
【目录】：

下载全文 更多同类文献

CAJ全文下载

(如何获取全文？ 欢迎：购买知网充值卡、在线充值、在线咨询)

CAJViewer阅读器支持CAJ、PDF文件格式

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 姜平;王敏;曲文玉;譚季春;邢玉凤;郭帅帅;蒋丽;刘丽英;付珉;;囊胚期与卵裂期胚胎培养及移植60例疗效比较[J];中国实用妇科与产科杂志;2005年12期

2 焦云萍;王珏;潘汝能;苏兰;;IVF中囊胚移植17周期临床分析[J];中国优生与遗传杂志;2007年02期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 李红;曾卫森;罗琛;邢福祺;;Bax/Bak在抑制人颗粒细胞凋亡中的作用[J];南方医科大学学报;2009年12期

2 郭新宇;姚元庆;;胚胎培养上清液中可溶性HLA-G表达与胚胎发育潜能的关系[J];广东医学;2012年02期

3 任广志;郭吉利;郜军伟;范兴兴;李改英;李新建;;NCOA1基因多态性与豫南黑猪繁殖性能相关分析[J];东北农业大学学报;2013年09期

4 Hélène Léger;Caroline Smet-Nocca;Amel Attmane-Elakeb;Sara Morley-Fletcher;Arndt G.Benecke;Sebastian Eilebrecht;;A TDG/CBP/RARα Ternary Complex Mediates the Retinoic Acid-dependent Expression of DNA Methylation-sensitive Genes[J];Genomics,Proteomics & Bioinformatics;2014年01期

5 鲍斌;林燕;薛薏;;小鼠p300-HAT真核表达质粒的构建[J];安徽农业科学;2013年27期

6 殷学利;黄素群;;利福霉素联合封闭负压引流对溃疡型淋巴结核创面愈合的研究[J];重庆医学;2014年02期

7 黄颖;于洋;乔杰;;卵母细胞质量评估研究进展[J];国际生殖健康/计划生育杂志;2014年04期

8 邵丽;崔毓桂;千日成;;卵母细胞及其胚胎发育潜能相关的生物标记物[J];国际生殖健康/计划生育杂志;2014年05期

9 杨帆;康健;马郁芳;;microRNA-29在心血管疾病中的研究进展[J];大连医科大学学报;2014年06期

10 鲍晓;徐家伟;孙莹璞;;人卵丘细胞内基因表达与胚胎发育潜能的关系[J];国际生殖健康/计划生育杂志;2015年01期

中国重要会议论文全文数据库 前3条

1 王晓丽;杨娟;陈玉;成俊萍;潘红平;韦精卫;陆凤花;石德顺;;水牛卵丘颗粒细胞凋亡与卵母细胞体外发育潜能的研究[A];中国畜牧兽医学会动物解剖学及组织胚胎学分会第十五次学术研讨会论文集[C];2008年

2 王实;朴海仙;吴俊波;金一;;卵母细胞凋亡途径及调控因子的研究现状[A];中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十五届学术研讨会论文集（下册）[C];2010年

3 孙青原;;Evaluation of oocyte quality:morphological,cellular and molecular predictors[A];第一届中华医学会生殖医学分会、中国动物学会生殖生物学分会联合年会论文汇编[C];2007年

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 常秀峰;补肾调经方对IVF-ET妊娠结局及颗粒细胞凋亡和OSFs的影响[D];河北医科大学;2011年

2 王晓丽;水牛卵母细胞体外成熟与凋亡的初步研究[D];广西大学;2007年

3 李红;人工抗凋亡促进胚胎发育的研究[D];南方医科大学;2007年

4 赵志明;颗粒细胞端粒酶及相关因子的表达变化对卵巢功能及卵裂球的影响[D];河北医科大学;2009年

5 刘海萍;祛瘀解毒法对子宫内膜异位症患者及大鼠卵丘颗粒细胞凋亡与分泌影响的研究[D];山东中医药大学;2009年

6 李海军;牛卵丘—卵母细胞复合体凋亡发生和调控与其发育潜能关系研究[D];内蒙古大学;2008年

7 申可佳;护卵汤对GnRHa超排卵大鼠卵泡发育的影响研究[D];湖南中医药大学;2012年

8 郭新宇;可溶性人类白细胞抗原G作为胚胎发育与着床潜能标志性分子的研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2012年

9 蔡开来;抑制素对小鼠卵泡发育和精子发生的分子和细胞调控机制研究[D];华中农业大学;2011年

10 杨春华;PTEN负调控癌蛋白AIB1的机理[D];大连理工大学;2013年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 刘寒艳;补救性ICSI临床结局及受精失败卵子纺锤体和染色体分析[D];广州医学院;2010年

2 王洪锋;牛卵母细胞体外成熟培养的研究[D];西北农林科技大学;2006年

3 江超;牛外周血淋巴细胞对输卵管上皮细胞和卵泡颗粒细胞凋亡及生长的影响[D];华中农业大学;2007年

4 黎淑贞;人卵巢壁层颗粒细胞和卵丘颗粒细胞表达多种细胞因子的研究[D];第一军医大学;2007年

5 吴媛霞;人卵巢颗粒细胞凋亡与IVF-ET妊娠结局的关系[D];山西医科大学;2008年

6 刘景;颗粒细胞MDA、SOD水平和凋亡率对卵子质量和IVF-ET结局的影响[D];中南大学;2008年

7 阳艳;可溶性人类白细胞分化抗原G与胚胎发育[D];华中科技大学;2007年

8 易晓芳;TNF-α及IFN-γ在人卵泡液中的检测及其与颗粒细胞凋亡的关系[D];中国医科大学;2009年

9 朱玉林;常规体外受精中完全受精失败和低受精率的相关因素及后续处理结果分析[D];河北医科大学;2012年

10 徐荣伟;TGF-β1、VEGF表达与大肠癌侵袭转移及预后的关系[D];山东大学;2013年

【二级参考文献】

中国期刊全文数据库 前5条

1 常秀峰,张建平,余裕炉;囊胚培养与移植[J];国外医学(计划生育分册);2004年04期

2 焦云萍,王珏,彭林;110周期体外受精——胚胎移植临床分析[J];中国计划生育学杂志;2003年07期

3 张永苗,张宁媛;囊胚培养与囊胚移植的研究进展[J];中华男科学;2001年04期

4 黄莉,乃东红,叶健,孙燕萍,张海英,谢丹尼;IVF中囊胚和胚胎移植应用的比较[J];中国优生与遗传杂志;2002年04期

5 余兰,王树玉,贾婵维,许奕;配子、原核和胚胎形态学与IVF种植率关系的研究进展[J];中国优生与遗传杂志;2005年05期

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 周玉,张俊辉,杨振国,朱世成,张凯,冯现维;温度和光照对神仙鱼胚胎发育的影响[J];水产科学;2001年03期

2 李金玉;林健荣;廖富蘋;陈海英;;不同温湿度催青条件对蚕卵胚胎发育蛋白代谢的影响[J];广东蚕业;2003年01期

3 张学英,彭士琪,郭振怀;枣授粉受精及胚胎发育研究[J];林业科学;2004年05期

4 刘文生,李勇,肖建光;胡子鲇胚胎发育的观察[J];华南农业大学学报;2004年04期

5 于业辉;张守纯;刘超;;中华大蟾蜍的胚胎发育观察[J];沈阳农业大学学报;2009年06期

6 ;日本研究发现促进胚胎分化的蛋白质[J];东北农业大学学报;2010年03期

7 马天意;宗琦;张凌献;程薪宇;刘保东;;蜈蚣草胚胎发育的观察[J];西北植物学报;2010年05期

8 施永海;张根玉;朱雅珠;刘建忠;臧维玲;;河口区养殖菊黄东方鲀的胚胎发育[J];大连海洋大学学报;2010年03期

9 姚桂桂;刘新轶;谢楠;王宇希;冯晓宇;郭水荣;;杂交鳢杭鳢1号胚胎发育过程的观察[J];江西农业学报;2010年11期

10 詹萍萍;王春琳;张晓梅;母昌考;宋微微;;长蛸胚胎发育过程中可溶性蛋白含量及组成变化[J];海洋学研究;2010年04期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 匡刚桥;梁珂;;神仙鱼胚胎发育研究[A];第三届全国现代生态渔业管理与技术研究[C];2011年

2 周爱国;马建波;龙敏明;梁日深;王超;邹青;陈金涛;邹记兴;;杂交鳢的胚胎发育及胚后发育的初步研究[A];2012年中国水产学会学术年会论文摘要集[C];2012年

3 钱耀森;王培亮;郑小东;杨建敏;李琪;;人工繁育条件下长蛸的生物学特性及胚胎发育[A];中国动物学会、中国海洋湖沼学会贝类学会分会第十四次学会研讨会论文摘要汇编[C];2009年

4 洪孝友;朱新平;陈昆慈;潘德博;李凯彬;;美洲鲥胚胎发育的初步观察[A];2010年中国水产学会学术年会论文摘要集[C];2011年

5 蔡清洁;何文辉;董占营;李鲜鲜;陈再忠;崔丽香;张奥;;清洁虾胚胎发育过程中脂肪酸的变化研究[A];2013年中国水产学会学术年会论文摘要集[C];2013年

6 冯欣璐;姚守秀;米拉;姚秀娟;赵宗胜;;杂交禽、鹌鹑与鸡胚胎发育规律的形态学比较分析[A];中国动物遗传育种研究进展——第十五次全国动物遗传育种学术讨论会论文集[C];2009年

7 吴丹;范晶;杨柳;陈时锦;齐丽娜;梁家充;蒋钦扬;蒋和生;;印记基因与胚胎发育[A];中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十五届学术研讨会论文集（上册）[C];2010年

8 刘静霞;桂建芳;;银鲫胎球蛋白B基因的克隆及其在胚胎发育过程中的表达图式研究[A];中国的遗传学研究——中国遗传学会第七次代表大会暨学术讨论会论文摘要汇编[C];2003年

9 姚俊杰;胡先成;赵云龙;段晓伟;安传光;;罗氏沼虾胚胎发育过程中蛋白质含量及氨基酸的组成[A];2005年上海市动物学会学术会议论文集[C];2005年

10 夏建红;刘静霞;李志;周莉;桂建芳;;一个新的胚胎发育调控基因的表达图式及其功能研究[A];湖北省遗传学会、江西省遗传学会2006年学术年会暨学术讨论会论文摘要集[C];2006年

中国重要报纸全文数据库 前10条

1 福建农林大学 宣传部;[N];福建科技报;2004年

2 陈勇;[N];光明日报;2005年

3 武安市 继辉;[N];河北农民报;2009年

4 刘伯开;[N];山西科技报;2004年

5 郑卫军;[N];中国渔业报;2008年

6 张乐 徐嫣嫣;[N];中国高新技术产业导报;2001年

7 杨骏 编译;[N];大众科技报;2001年

8 记者 胡其峰;[N];光明日报;2014年

9 ;[N];人民日报;2006年

10 杨玉凤 李小玲 刘剑霞 胡枭;[N];中国渔业报;2005年

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 陈伟;荔枝(Litchi chinensis Sonn．)胚胎发育的生理生化基础[D];福建农林大学;2000年

2 薛璐;人类早期胚胎功能基因组学研究及胚胎发育相关新基因功能初探[D];武汉大学;2010年

3 夏建红;鱼类两个胚胎发育调控基因的表达特征及功能分析[D];中国科学院研究生院（水生生物研究所）;2007年

4 赵栓;干扰素诱导基因15在牛体外卵母细胞成熟及胚胎发育中的作用研究[D];中国农业大学;2014年

5 于建宁;5-脱氧杂氮胞苷对小鼠附植前胚胎发育的影响[D];南京农业大学;2008年

6 赵杨;cyclin K在卤虫胚胎发育过程中的分子特征及功能研究[D];浙江大学;2012年

7 李文兰;白菜型油菜胚胎发育过程中转录组和蛋白质组的研究[D];武汉大学;2011年

8 蒋晞;G蛋白偶联受体激酶在胚胎发育中调控作用的研究[D];复旦大学;2010年

9 方园;Cited2水平对小鼠和人卵子质量和胚胎发育的影响[D];中国农业大学;2015年

10 赵振华;山羊早期胚胎发育基因表达与调控的研究[D];扬州大学;2008年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 郑建美;长角血蜱胚胎发育的研究[D];河北师范大学;2010年

2 张鑫磊;半滑舌鳎胚胎发育及幼鱼营养需求的研究[D];中国海洋大学;2006年

3 关国平;家蚕vasa基因的原位杂交研究[D];西南大学;2006年

4 王丽云;弹尾纲活体胚胎培养及原（虫兆）目和长角（虫兆）目胚胎发育的研究[D];聊城大学;2013年

5 秦洁;青鳉胚胎发育培养及冷冻保存研究[D];河北农业大学;2010年

6 余颖;池蝶蚌性腺、生殖细胞发生及胚胎发育观察[D];南昌大学;2008年

7 陈学文;中华青鳉胚胎发育及胚胎低温保存的初步研究[D];上海海洋大学;2013年

8 李俊霞;葡萄糖、蔗糖、氯化钠对班马鱼胚胎发育的影响[D];山东师范大学;2007年

9 沈毅;Ypel3基因表达与小鼠胚胎发育关系研究[D];哈尔滨工业大学;2011年

10 冯越;鸡胚胎发育过程的核磁共振研究[D];西北大学;2002年

  本文关键词：Cited2水平对小鼠和人卵子质量和胚胎发育的影响，由笔耕文化传播整理发布。

，

本文编号：212308