口蹄疫病毒抑制G3BP1介导的RIG-I信号通路机制
发布时间：2021-04-29 23:56
天然免疫反应是机体抵御病原微生物入侵的第一道防线。宿主细胞通过模式识别受体识别病原微生物的核酸,诱导I型干扰素、炎性因子以及抗病原微生物效应蛋白的表达。RNA病毒感染机体后,其产生的核酸被位于胞浆的RIG-I（retinoic acid-inducible gene I）和MDA5（melanoma differentiation-associated gene 5）识别。RIG-I和MDA5与病毒RNA结合以后,其构象发生变化,然后被招募到天然免疫接头分子VISA上。之后,VISA发生类朊病毒样聚集,并通过它的TRAF结合基序来招募下游的TRAF2/3/5/6。TRAF家族蛋白进一步招募TBK1以及I（42）（42）复合物并磷酸化IRF3以及I?B?,最终导致IRF3以及NF-?B的激活以及下游抗病毒应答的产生。R（45）（32）病毒入侵机体后,机体内的RIG-I样受体是诱导天然免疫反应的关键蛋白,但是作为RLRs成员的RIG-I和MDA5是如何识别病毒核酸需要进一步研究。本研究中,我们发现过表达人源G3BP1（Ras GTPase-activating protein-SH3 do...
【文章来源】：中国农业科学院北京市
【文章页数】：102 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
abstract
英文缩略表
第一章 引言
1.1 天然免疫概况
1.1.1 天然免疫基本介绍
1.1.2 抗病毒天然免疫及模式识别受体
1.2 抗病毒天然免疫信号转导及其调节机制
1.2.1 TLRs介导的天然免疫信号转导
1.2.2 RLRs介导的天然免疫信号转导机制
1.3 RNA结合蛋白家族在抗病毒天然免疫中的作用
1.3.1 RNA结合蛋白家族种类与结构
1.3.2 RNA结合蛋白调节天然免疫的抗病毒机制
1.4 口蹄疫及口蹄疫病毒
1.4.1 口蹄疫
1.4.2 口蹄疫病毒
1.4.3 口蹄疫病毒的结构与功能
1.5 FMDV蛋白研究进展
1.5.1 FMDV蛋白与宿主互作研究进展
1.5.2 FMDV蛋白调节天然免疫研究进展
1.6 本研究的目的和意义
第二章 G3BP1 正调控RIG-I信号通路的机制研究
2.1 材料与方法
2.1.1 载体、细胞、病毒以及生化试剂
2.1.2 仪器设备
2.1.3 试剂配制
2.1.4 质粒的构建
2.1.5 细胞转染
2.1.6 免疫共沉淀和免疫印迹
2.1.7 双荧光素酶报告基因实验
2.1.8 VSV空斑实验
2.1.9 激光共聚焦显微镜实验
2.1.10 实时荧光定量PCR
2.1.11 过表达,RNAi,敲除细胞系构建
2.1.12 体外pull down实验
2.2 结果
2.2.1 过表达G3BP1在RNA病毒诱导的I型干扰素信号通路中的作用
2.2.2 沉默和敲除G3BP1对RNA病毒的调节作用
2.2.3 G3BP1增强细胞的抗病毒应答
2.2.4 G3BP1在VISA上游水平调节天然免疫信号通路
2.2.5 G3BP1与RIG-I有相互作用
2.2.6 G3BP1拮抗RNF125介导RIG-I的降解并促进RIG-I结合5′ppp-dsRNA
2.2.7 G3BP1 增加RNF125 自身泛素化
2.3 讨论
第三章 口蹄疫病毒3A抑制G3BP1 介导的RIG-I信号通路机制研究
3.1 材料与方法
3.1.1 载体、细胞、病毒以及生化试剂
3.1.2 仪器设备
3.1.3 试剂配制
3.1.4 质粒的构建
3.1.5 病毒感染及病毒滴度测定
3.1.6 病毒拷贝数测定
3.1.7 实时荧光定量PCR
3.2 实验结果
3.2.1 G3BP1 以及它的突变体对FMDV的影响
3.2.2 猪源G3BP1 促进RLH介导的信号转导
3.2.3 FMDV3A与 G3BP1 相互作用
3.2.4 FMDV3A增强FMDV复制和增殖
3.2.5 FMDV3A抑制G3BP1 介导的RLH抗病毒信号
3.2.6 口蹄疫病毒3A通过自噬途径降解G3BP1
3.2.7 口蹄疫病毒3A通过上调LRRC25的表达来降解G3BP1
3.2.8 LRRC25 增加FMDV复制和增殖
3.2.9 多种小RNA病毒的3A蛋白通过LRRC25 蛋白降解G3BP1
3.3 讨论
第四章 全文结论
参考文献
致谢
作者简历
【参考文献】：
期刊论文
[1]The DEAD-Box RNA Helicase DDX1 Interacts with the Viral Protein 3D and Inhibits Foot-and-Mouth Disease Virus Replication[J]. Qiao Xue,Huisheng Liu,Qiaoying Zeng,Haixue Zheng,Qinghong Xue,Xuepeng Cai. Virologica Sinica. 2019(06)
[2]靶向Toll样受体4治疗支气管哮喘的价值[J]. 王楠,王曦,高蕾,陈子,周林福. 中华肺部疾病杂志(电子版). 2019(04)
[3]特发性炎症性肌病相关间质性肺疾病发病机制的研究进展[J]. 唐子猗,青玉凤. 医学综述. 2019(12)
[4]hnRNPA2/B1在恶性肿瘤中的研究进展[J]. 刘雅雯,张尤历,徐岷. 中国医药导报. 2019(12)
[5]NLK的信号转导和生物学效应的研究进展[J]. 吴雅婷,冯乐平. 医学综述. 2012(22)
[6]抗病毒感染固有免疫应答的信号转导[J]. 谢广成,段招军. 病毒学报. 2012(03)
[7]CpG-ODN对小鼠骨髓造血系统辐射损伤的保护作用[J]. 张超,高福,崔建国,程赢,孙顶,周传丰,刘聪,李百龙,蔡建明. 第二军医大学学报. 2011(04)
博士论文
[1]ZCCHC3调控抗病毒天然免疫反应的分子机制[D]. 连欢.武汉大学 2018
[2]E3泛素连接酶TRIM4和TRIM21调节细胞抗病毒天然免疫信号转导的机制[D]. 燕杰.武汉大学 2012
[3]蛋白激酶NEK6调控细胞抗病毒信号转导机制及DNAzyme抗病毒活性研究[D]. 吴叔文.武汉大学 2012
硕士论文
[1]DDX56抑制Ⅰ型干扰素信号转导及促进口蹄疫病毒复制的研究[D]. 付绍祖.中国农业科学院 2019
[2]猪ENPP1参与PRV感染的作用机制初探[D]. 鲁绍芳.河南农业大学 2018
[3]硒化卡拉胶与乙酰氨基葡萄糖对甲型肝炎病毒抗原诱导小鼠体液免疫应答的影响[D]. 贾森泉.昆明医科大学 2018
[4]SERPINA7等多种干扰素刺激基因在流感病毒抑制及SLE疾病发展中作用的初步研究[D]. 张路路.北京协和医学院 2018
[5]鸡传染性法氏囊病毒VP4、VP5蛋白在感染中对宿主天然防御能力的影响研究[D]. 李双洁.南京农业大学 2016
[6]腺苷A2A受体激动剂缓解小鼠DSS结肠炎及机制研究[D]. 万萍.南昌大学医学院 2015
[7]子宫颈癌细胞增殖转移与基因表达关系的实验研究[D]. 秦杰.中南大学 2012
本文编号：3168429
【文章来源】：中国农业科学院北京市
【文章页数】：102 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
abstract
英文缩略表
第一章 引言
1.1 天然免疫概况
1.1.1 天然免疫基本介绍
1.1.2 抗病毒天然免疫及模式识别受体
1.2 抗病毒天然免疫信号转导及其调节机制
1.2.1 TLRs介导的天然免疫信号转导
1.2.2 RLRs介导的天然免疫信号转导机制
1.3 RNA结合蛋白家族在抗病毒天然免疫中的作用
1.3.1 RNA结合蛋白家族种类与结构
1.3.2 RNA结合蛋白调节天然免疫的抗病毒机制
1.4 口蹄疫及口蹄疫病毒
1.4.1 口蹄疫
1.4.2 口蹄疫病毒
1.4.3 口蹄疫病毒的结构与功能
1.5 FMDV蛋白研究进展
1.5.1 FMDV蛋白与宿主互作研究进展
1.5.2 FMDV蛋白调节天然免疫研究进展
1.6 本研究的目的和意义
第二章 G3BP1 正调控RIG-I信号通路的机制研究
2.1 材料与方法
2.1.1 载体、细胞、病毒以及生化试剂
2.1.2 仪器设备
2.1.3 试剂配制
2.1.4 质粒的构建
2.1.5 细胞转染
2.1.6 免疫共沉淀和免疫印迹
2.1.7 双荧光素酶报告基因实验
2.1.8 VSV空斑实验
2.1.9 激光共聚焦显微镜实验
2.1.10 实时荧光定量PCR
2.1.11 过表达,RNAi,敲除细胞系构建
2.1.12 体外pull down实验
2.2 结果
2.2.1 过表达G3BP1在RNA病毒诱导的I型干扰素信号通路中的作用
2.2.2 沉默和敲除G3BP1对RNA病毒的调节作用
2.2.3 G3BP1增强细胞的抗病毒应答
2.2.4 G3BP1在VISA上游水平调节天然免疫信号通路
2.2.5 G3BP1与RIG-I有相互作用
2.2.6 G3BP1拮抗RNF125介导RIG-I的降解并促进RIG-I结合5′ppp-dsRNA
2.2.7 G3BP1 增加RNF125 自身泛素化
2.3 讨论
第三章 口蹄疫病毒3A抑制G3BP1 介导的RIG-I信号通路机制研究
3.1 材料与方法
3.1.1 载体、细胞、病毒以及生化试剂
3.1.2 仪器设备
3.1.3 试剂配制
3.1.4 质粒的构建
3.1.5 病毒感染及病毒滴度测定
3.1.6 病毒拷贝数测定
3.1.7 实时荧光定量PCR
3.2 实验结果
3.2.1 G3BP1 以及它的突变体对FMDV的影响
3.2.2 猪源G3BP1 促进RLH介导的信号转导
3.2.3 FMDV3A与 G3BP1 相互作用
3.2.4 FMDV3A增强FMDV复制和增殖
3.2.5 FMDV3A抑制G3BP1 介导的RLH抗病毒信号
3.2.6 口蹄疫病毒3A通过自噬途径降解G3BP1
3.2.7 口蹄疫病毒3A通过上调LRRC25的表达来降解G3BP1
3.2.8 LRRC25 增加FMDV复制和增殖
3.2.9 多种小RNA病毒的3A蛋白通过LRRC25 蛋白降解G3BP1
3.3 讨论
第四章 全文结论
参考文献
致谢
作者简历
【参考文献】：
期刊论文
[1]The DEAD-Box RNA Helicase DDX1 Interacts with the Viral Protein 3D and Inhibits Foot-and-Mouth Disease Virus Replication[J]. Qiao Xue,Huisheng Liu,Qiaoying Zeng,Haixue Zheng,Qinghong Xue,Xuepeng Cai. Virologica Sinica. 2019(06)
[2]靶向Toll样受体4治疗支气管哮喘的价值[J]. 王楠,王曦,高蕾,陈子,周林福. 中华肺部疾病杂志(电子版). 2019(04)
[3]特发性炎症性肌病相关间质性肺疾病发病机制的研究进展[J]. 唐子猗,青玉凤. 医学综述. 2019(12)
[4]hnRNPA2/B1在恶性肿瘤中的研究进展[J]. 刘雅雯,张尤历,徐岷. 中国医药导报. 2019(12)
[5]NLK的信号转导和生物学效应的研究进展[J]. 吴雅婷,冯乐平. 医学综述. 2012(22)
[6]抗病毒感染固有免疫应答的信号转导[J]. 谢广成,段招军. 病毒学报. 2012(03)
[7]CpG-ODN对小鼠骨髓造血系统辐射损伤的保护作用[J]. 张超,高福,崔建国,程赢,孙顶,周传丰,刘聪,李百龙,蔡建明. 第二军医大学学报. 2011(04)
博士论文
[1]ZCCHC3调控抗病毒天然免疫反应的分子机制[D]. 连欢.武汉大学 2018
[2]E3泛素连接酶TRIM4和TRIM21调节细胞抗病毒天然免疫信号转导的机制[D]. 燕杰.武汉大学 2012
[3]蛋白激酶NEK6调控细胞抗病毒信号转导机制及DNAzyme抗病毒活性研究[D]. 吴叔文.武汉大学 2012
硕士论文
[1]DDX56抑制Ⅰ型干扰素信号转导及促进口蹄疫病毒复制的研究[D]. 付绍祖.中国农业科学院 2019
[2]猪ENPP1参与PRV感染的作用机制初探[D]. 鲁绍芳.河南农业大学 2018
[3]硒化卡拉胶与乙酰氨基葡萄糖对甲型肝炎病毒抗原诱导小鼠体液免疫应答的影响[D]. 贾森泉.昆明医科大学 2018
[4]SERPINA7等多种干扰素刺激基因在流感病毒抑制及SLE疾病发展中作用的初步研究[D]. 张路路.北京协和医学院 2018
[5]鸡传染性法氏囊病毒VP4、VP5蛋白在感染中对宿主天然防御能力的影响研究[D]. 李双洁.南京农业大学 2016
[6]腺苷A2A受体激动剂缓解小鼠DSS结肠炎及机制研究[D]. 万萍.南昌大学医学院 2015
[7]子宫颈癌细胞增殖转移与基因表达关系的实验研究[D]. 秦杰.中南大学 2012
本文编号：3168429
本文链接：https://www.wllwen.com/shoufeilunwen/nykjbs/3168429.html
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