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萝卜高密度遗传图谱构建与红皮性状基因鉴定

发布时间:2021-05-07 01:16
  高密度遗传图谱是提高参考基因组组装、基因定位、比较基因组研究的重要工具。萝1、(Raphanus sativus L.)是一种重要的一、二年生十字花科根菜类蔬菜作物。萝卜肉质根营养丰富,药用食疗价值高,不同基因型萝卜品种品质性状存在显著的差异。基于传统分子标记构建的萝卜遗传图谱,由于标记密度低,可利用的功能标记偏少,极大程度上限制了萝卜重要品质性状的基因定位研究。鉴于此,本研究以萝卜高代自交系‘NAU-LB’(白色长圆柱形)和‘NAU-YH’(红色小圆球形)为亲本配制F2群体,通过全基因组重测序与基因分型技术构建萝卜高密度遗传图谱,并对11个品质性状进行了 QTL定位;通过构建的F2、BC1P1和BC1P2作图群体进行遗传分析表明根皮色性状是由单基因控制;基于萝卜三个转录组数据鉴定可变剪切、SNP、InDel、SSR标记;结合BSA-seq与精细作图技术定位红皮基因;主要研究结果如下:1.对‘NAU-LB’、‘NAU-YH’和137个F2单株进行全基因组重测序分别获得了 5.63Gb、7.46Gb、404.44Gb的原始数据。利用BWA软件,将两个亲本测序数据比对到萝卜参考基因组,利用... 

【文章来源】:南京农业大学江苏省 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】:109 页

【学位级别】:博士

【文章目录】:
摘要
ABSTRACT
缩略词表
第一章 文献综述
    1 分子标记技术
        1.1 基于杂交技术的第一代分子标记
        1.2 基于PCR的第二代分子标记
        1.3 基于高通量测序的第三代分子标记
    2. 遗传连锁图谱构建
        2.1 遗传连锁图谱构建步骤
        2.2 基于全基因组重测序构建遗传图谱
        2.3 萝卜遗传图谱研究进展
    3 萝卜品质性状QTL定位研究进展
        3.1 QTL定位原理和方法
        3.2 萝卜重要性状QTL定位研究进展
        3.3 萝卜根红色性状研究进展
    4. 转录组测序和可变剪切
        4.1 转录组测序技术简介
        4.2 可变剪切研究进展
        4.3 转录组测序开发SNP和InDel标记
    5. 本研究目的与意义
第二章 萝卜高密遗传图谱构建和品质性状QTL定位
    1 材料与方法
        1.1 供试材料
        1.2 基因组DNA的提取
        1.3 高通量基因组测序
        1.4 遗传连锁图谱构建
        1.5 表型测定
        1.6 图谱特征分析
        1.7 QTL定位分析
    2 结果与分析
        2.1 萝卜高密度遗传图谱
        2.2 遗传图谱与甘蓝和白菜基因组共线性分析
        2.3 萝卜基因组重组特征分析
        2.4 基于遗传图谱品质性状基因QTLs定位
    3 讨论
        3.1 萝卜高密度遗传图谱特征
        3.2 萝卜高密度遗传提高基因组组装
        3.3 比较分析萝卜与两个芸薹属基因组同源关系
        3.4 重组对萝卜遗传研究的影响
        3.5 萝卜品质性状QTL定位
第三章 萝卜红皮性状基因鉴定
    1 材料与方法
        1.1 试验材料和性状统计
        1.2 花青素总量测定
        1.3 BSA-seq分析
        1.4 转录组序列和比对到参考基因组
        1.5 可变剪切事件鉴定及验证
        1.6 SNP、InDel和SSR鉴定
        1.7 DNA多态性引物设计和验证
        1.8 分子标记开发
        1.9 基因定位
        1.10 候选基因克隆
        1.11 半定量和定量RT-PCR表达分析
    2 结果与分析
        2.1 萝卜红皮性状遗传规律
        2.2 BSA-seq分析鉴定红皮基因候选区域
        2.3 比较转录组鉴定可变剪切和分子标记开发
        2.4 萝卜红皮基因定位
        2.5 RsMYB90基因克隆及序列分析
        2.6 RsMYB90基因表达分析
    3 讨论
        3.1 可变剪切在转录调控中起着至关重要的作用
        3.2 比较转录组分析SNP和InDel特征
        3.3 SNP和InDel标记特征和多态性
        3.4 萝卜红皮基因定位
        3.5 植物皮色调控基因
全文结论
创新之处
参考文献
博士在读期间发表学术论文
致谢


【参考文献】:
博士论文
[1]陆地棉种内高密度遗传图谱构建及重要农艺性状QTL定位[D]. 贾晓昀.西北农林科技大学 2017
[2]应用生物组学分析鉴定萝卜盐胁迫响应相关基因与miRNA[D]. 孙小川.南京农业大学 2016
[3]桉树高密度遗传图谱构建及生长和材性相关QTL解析[D]. 于晓丽.中国林业科学研究院 2015
[4]MYB对杨梅果实花青素苷合成的调控及其机制[D]. 牛姗姗.浙江大学 2011



本文编号:3172954

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